
U937細胞係(人組織細胞淋巴瘤細胞)
- 來源:組織細胞淋巴瘤
- 細胞特征:懸浮細胞,單核細胞
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:u937細胞產(chan) 生溶菌酶和β2-微球蛋白、受PMA刺激後可產(chan) 生TNF-α、表達補體(ti) 受體(ti) C3R
U-937細胞係是由Nilsson K實驗室於(yu) 1974年首次建立的。U937細胞係源自一位37歲白人男性惡性組織細胞性淋巴瘤患者的胸腔積液樣本。
U-937細胞是單核細胞前體(ti) ,具有單核細胞和組織細胞的特征。
研究表明U-937細胞可以通過人類混合淋巴細胞培養(yang) 物的上清液誘導分化為(wei) 終末單核細胞。然而,PCR和細胞遺傳(chuan) 學分析發現,許多U-937庫存中被人類髓係白血病細胞係K-562汙染,最早的庫存汙染水平達0.6%。因此,自1994年3月起,除專(zhuan) 利需要外,該細胞係已停止銷售。
U937細胞係特性特征
u937細胞產(chan) 生溶菌酶和β2-微球蛋白、受PMA刺激後可產(chan) 生TNF-α、表達補體(ti) 受體(ti) C3R
u937細胞表達Fas抗原,對TNF和抗Fas抗體(ti) 敏感
u937細胞不合成免疫球蛋白、EBV(EB病毒)陰性
U937細胞可被多種因子誘導分化為(wei) 終末單核細胞,包括:人混合淋巴細胞培養(yang) 上清、佛波酯(PMA)、維生素D3、γ-幹擾素(γ-IFN)、腫瘤壞死因子(TNF)、維甲酸
u937細胞屬於(yu) 髓係細胞,可組成性地分泌大量細胞因子和趨化因子
腫瘤壞死因子-α和重組GM-CSF可獨立促進U937細胞中白介素-10的產(chan) 生
u937細胞是少數幾種表達許多單核細胞特征的細胞係之一
U937細胞係參數表
細胞名稱 | U937細胞係(人組織細胞淋巴瘤細胞) |
細胞別稱 | U937;U-937;U 937 |
患者信息 | 人;37歲;白人男性 |
組織來源 | 組織細胞淋巴瘤患者的胸腔積液 |
生長特性形態 | 懸浮生長;單核細胞樣 |
倍增時間 | 約30-60小時 |
細胞代數 | 10代以內 |
基因表達 | 溶菌酶;β2-微球蛋白;TNF-α(PMA刺激後) |
表麵標記特性 | 補體受體(C3R);Fas抗原;對TNF和抗Fas抗體敏感 |
EBV | EBV陰性 |
免疫球蛋白 | 不合成免疫球蛋白; |
培養基 | RPMI-1640;10% FBS (胎牛血清) |
培養條件 | 37°C;5% CO2 |
傳代方式 | 1:3-1:5比例,每3-4天傳代一次 |
分化誘導劑 | 人混合淋巴細胞培養上清、PMA、維生素D3、γ-IFN、TNF、維甲酸 |
分化結果 | 可向終末單核細胞分化 |
吞噬細胞因子 | 強吞噬能力;可產生多種細胞因子,如TNF-α |
轉染特性 | 可作為轉染宿主 |
凍存/儲存 | 無血清凍存液;液氮儲存;1-2 × 10^6 cells/mL |
主要用途 | 單核細胞/巨噬細胞功能研究、炎症研究、藥物篩選、信號轉導研究、基因功能研究、細菌性腹膜炎等疾病模型研究 |
汙染風險 | 1994年發現部分庫存被K-562細胞係汙染,使用時需確認細胞純度 |
培養教程
U937人組織細胞淋巴瘤細胞係培養教程
U937細胞複蘇步驟
解凍:將凍存的U937細胞快速在37°C水浴中解凍。
轉移和離心:
將解凍後的U937細胞懸液轉移到含15mL預熱的培養(yang) 基的50mL離心管中。
在800rpm下離心5分鍾,以去除凍存液。
重懸細胞:棄去上清液,用5mL新鮮培養(yang) 基重懸U937細胞。
培養(yang) :將U937細胞轉移至25cm²培養(yang) 瓶中,置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。
U937細胞常規培養
懸浮生長:U937細胞為(wei) 懸浮生長,不需酶消化即可傳(chuan) 代。
密度控製:保持U937細胞密度在1×10^5 - 1×10^6 cells/mL之間。
傳(chuan) 代周期:每3-4天傳(chuan) 代一次,傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3到1:5。
U937細胞傳代步驟
細胞懸浮:輕輕吹打培養(yang) 瓶使U937細胞懸浮均勻。
轉移:取適量U937細胞懸液加入新的培養(yang) 瓶中。
添加培養(yang) 基:加入新鮮培養(yang) 基至適當體(ti) 積以支持U937細胞生長。
U937細胞計數
計數工具:使用血球計數板或自動細胞計數儀(yi) 。
密度調整:確保U937細胞密度在理想範圍內(nei) 。
U937細胞凍存
收集細胞:選擇對數生長期的U937細胞進行凍存。
調整密度:將U937細胞密度調整至1-2×10^6 cells/mL。
凍存液:使用無血清凍存液(例如,10% DMSO in FBS)。
降溫過程:以1°C/min的速率降溫,最終轉移至液氮中長期保存U937細胞。
U937細胞培養注意事項
細胞密度控製:保持適宜密度以確保U937細胞的良好生長。
培養(yang) 基更換:每3-4天或根據生長情況及時更換培養(yang) 基以支持U937細胞。
避免細胞聚集:輕輕搖晃培養(yang) 瓶以防止U937細胞聚集成團。
防止汙染:采用無菌操作,培養(yang) 基中可加入抗生素保護U937細胞。
細胞活力監測:定期使用台盼藍染色法檢測U937細胞活力,保持在95%以上。
適時傳(chuan) 代:防止過度生長,確保U937細胞狀態良好。
細胞純度:每3-4個(ge) 月進行一次STR鑒定,確保U937細胞純度。
培養(yang) 條件穩定:保持U937細胞培養(yang) 環境的穩定性,避免頻繁開關(guan) 培養(yang) 箱。
狀態觀察:每日觀察U937細胞形態和生長狀態,記錄異常。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 (DSMZ=ACC-5; PubMed=15637111) |
12 (AddexBio=C0003005/72; ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; ECACC=85011440; Technion Genomics Center BCF; JCRB=IFO50038; JCRB=JCRB9021; KCLB=21593.1; PubMed=25877200; PubMed=34707142; RCB=RCB1978) | |
D1S1656 | 17.3 |
D2S441 | 10 |
D2S1338 | 17 (DSMZ=ACC-5) |
17,20 (ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=34707142) | |
D3S1358 | 16 (ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200; PubMed=34707142) |
16,17 (DSMZ=ACC-5) | |
D5S818 | 10,12 (PubMed=15637111) |
10,12,13 (DSMZ=ACC-5) | |
12 (AddexBio=C0003005/72; ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; ECACC=85011440; Technion Genomics Center BCF; JCRB=IFO50038; JCRB=JCRB9021; KCLB=21593.1; PubMed=25877200; PubMed=34707142; RCB=RCB1978) | |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 12,13 |
D10S1248 | 14 |
D12S391 | 17,18 |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,14 |
D19S433 | 14,16 |
D21S11 | 27 (DSMZ=ACC-5; PubMed=15637111) |
27,29 (ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200; PubMed=34707142) | |
D22S1045 | 17 |
FGA | 22,25 |
Penta D | 12,13 (ATCC=CRL-1593.2; CLS=300368; COG; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) |
13 (DSMZ=ACC-5; PubMed=15637111) | |
Penta E | 13 |
TH01 | 6,9.3 (AddexBio=C0003005/72; ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; DSMZ=ACC-5; ECACC=85011440; Technion Genomics Center BCF; JCRB=IFO50038; JCRB=JCRB9021; PubMed=11416159; PubMed=15637111; PubMed=25877200; PubMed=34707142; RCB=RCB1978) |
TPOX | 9.3 (KCLB=21593.1) |
8,11 | |
vWA | 14,15 (AddexBio=C0003005/72; ATCC=CRL-1593.2; CCRID; CLS=300368; COG; DSMZ=ACC-5; ECACC=85011440; Technion Genomics Center BCF; JCRB=IFO50038; JCRB=JCRB9021; PubMed=11416159; PubMed=15637111; PubMed=25877200; RCB=RCB1978) |
15 (KCLB=21593.1; PubMed=34707142) |
參考文獻
- 《胃腸病學和肝病學雜誌》 2019年01期
- 摘要:...與遷移的影響及其分子機製。方法 PMA誘導人淋巴瘤細胞U937向巨噬細胞分化,並用脂...
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