A9細胞（小鼠皮下結締組織細胞）

A9細胞是一種源自小鼠脂肪組織的成纖維細胞樣細胞係，起源於(yu) 1940年建立的L929細胞株。L929細胞株最初來自於(yu) 雄性C3H/An小鼠的正常皮下乳暈和脂肪組織。（A9細胞是從(cong) 野生型細胞株L中分離得到的小鼠皮下結締組織細胞的衍生係。）

A9細胞對HAT選擇培養(yang) 基敏感，同時缺失了腺苷轉磷酸核糖基酶與(yu) 次黃嘌呤轉磷酸核糖基酶。此外，A9細胞對8-氮鳥嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鳥嘌呤(0.1mM)具有抗性。

A9細胞株的一個(ge) 顯著特征是它們(men) 表達腺苷磷酸核糖基轉移酶（APRT）和次黃嘌呤磷酸核糖基轉換酶（HPRT），分別表示為(wei) APRT+和HPRT+。A9細胞屬於(yu) 雜交瘤細胞類型，是通過將來自小鼠（Mus musculus）的B淋巴細胞與(yu) 同一物種的骨髓瘤細胞融合而形成的。這種獨特的組合使得A9細胞同時表現出B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的特性。

由於(yu) A9細胞對偽(wei) 狂犬病病毒（PRV）、印第安納毒株的水泡性口炎病毒（VSV）和單純皰疹病毒（HSV）等病毒的敏感性和反應，使其在病毒研究中具有重要價(jia) 值。這種敏感性使得A9細胞成為(wei) 研究病毒複製、發病機製以及潛在的抗病毒治療的理想模型。在免疫學研究中，A9細胞也是一個(ge) 有價(jia) 值的模型，用於(yu) 探究免疫反應、抗體(ti) 產(chan) 生、單克隆抗體(ti) 產(chan) 生以及雜交瘤技術等方麵。此外，A9細胞的快速增殖速度（大約24小時的倍增時間）為(wei) 實驗和下遊應用提供了充足的細胞供應。

A9細胞參數表

1. 細胞接收及檢查：

• 收到A9細胞後，請檢查發貨培養(yang) 瓶的狀況，若有破損、液溢出或細胞汙染，請及時聯係我們(men) 並拍照記錄。

• 使用低倍鏡（4或5X物鏡）下確認A9細胞的生長狀態，並在10X和20X物鏡下觀察細胞形態，同時拍攝細胞狀態照片和培養(yang) 瓶外觀照片，作為(wei) 細胞狀態的依據。

2. 細胞處理：

複蘇A9細胞：

• 將含有1mL A9細胞懸液的凍存管在37°C水浴中快速解凍。

• 加入4mL培養(yang) 基，混合均勻後離心，棄去上清液，補充1-2mL培養(yang) 基後吹勻。

• 將所有A9細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。

A9細胞傳(chuan) 代：

• 若A9細胞密度達到80%-90%，可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 對於(yu) 貼壁A9細胞，推薦傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2。

A9細胞凍存：

• 待A9細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

• 使用凍存液（50% basal medium+40% FBS+10% DMSO）進行凍存。

3. 培養操作：

• 將A9細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中放置約2-3小時，使細胞適應培養(yang) 條件。

4. 貼壁A9細胞傳代：

• 棄去培養(yang) 上清，用PBS潤洗A9細胞1-2次。

• 加入0.25% Trypsin-EDTA溶液消化1-2分鍾，觀察A9細胞消化情況。

• 加入培養(yang) 基終止消化，按1：2到1：5的比例分配到新的培養(yang) 瓶中。

5. 凍存處理：

• 棄去培養(yang) 基，用PBS清洗瓶底，加入胰酶消化A9細胞。

• 離心後加入DMSO至最終濃度為(wei) 10%，分配到凍存管中進行凍存。

注意事項：

• 培養(yang) 操作需在無菌條件下進行，避免細菌和真菌的汙染。

• 定期觀察A9細胞形態和生長情況，及時進行傳(chuan) 代和處理。

• 凍存液需按規定比例配製，記錄A9細胞凍存位置以便下次使用。