
SP20細胞(小鼠骨髓瘤細胞)
- 來源:脾髒
- 細胞特征:懸浮細胞,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:Sp20細胞係表現出H-2d抗原的表達,且不分泌免疫球蛋白。
Sp20細胞(全名Sp2/0-Ag14細胞)是來源於(yu) 小鼠脾髒的B淋巴細胞係,常用於(yu) 免疫學研究。sp20細胞係通過將BALB/c小鼠的脾細胞(經綿羊紅細胞免疫處理的小鼠)與(yu) P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合形成。
SP20細胞特性特征
分子和表達特征:不分泌免疫球蛋白、對20μg/ml的8-氮鳥嘌呤具有抗性、對HAT(Hypoxanthine-Aminopterin-Thymidine)敏感
抗原表達:H-2d
應用:可用作製備單克隆抗體(ti) 的細胞係、可作為(wei) 細胞融合實驗的伴侶(lv) 細胞係、在免疫學和細胞生物學研究中是重要的工具細胞係
免疫球蛋白基因表達缺失:由於(yu) 不分泌免疫球蛋白的特性,Sp2/0-Ag14細胞係在基因水平上缺乏相關(guan) 的免疫球蛋白基因表達
SP20細胞參數表
細胞名稱 | SP20細胞(小鼠骨髓瘤細胞) |
別稱 | SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; SP2/O; SP-2; GM03569; GM03569B; GM3569 |
細胞類型 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
來源 | BALB/c小鼠脾細胞與P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合 |
形態 | 淋巴母細胞樣,懸浮生長 |
生物安全等級 | 1 |
培養基 | DMEM + 10% 胎牛血清(FBS) + 1% 青黴素-鏈黴素(P/S) |
培養條件 | 37°C, 95% 空氣, 5% 二氧化碳 |
傳代方法 | 1:2 至 1:3,每周 2-3 次,傳代時細胞密度達 80%-90% |
抗原表達 | H-2d |
免疫球蛋白分泌 | 不分泌 |
8-氮鳥嘌呤抗性 | 對 20μg/ml 有抗性 |
HAT 敏感性 | 對 HAT 敏感 |
病毒檢測 | 鼠痘病毒(ECTV)陰性 |
支原體檢測 | 通過支原體檢測 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;溫度:液氮 |
複蘇方法 | 快速解凍於37℃水浴中,隨後加入培養基並離心去除DMSO |
保藏機構 | ATCC(CRL-1581, CRL-8287),DSMZ(ACC-146),ECACC(85072401) |
應用領域 | 單克隆抗體生產,細胞融合實驗,免疫學和細胞生物學研究 |
培養教程
Sp20小鼠骨髓瘤細胞培養教程
SP20細胞複蘇
解凍SP20細胞: 將SP20細胞凍存管從(cong) 液氮中取出,立即放入37℃水浴中,快速搖勻,使其在1分鍾內(nei) 完全融化。
稀釋SP20細胞: 將解凍後的SP20細胞懸液轉移到離心管中,加入4 mL培養(yang) 基,輕輕混勻。
離心: 在1000 RPM下離心4分鍾,棄去上清液。
重懸SP20細胞: 補加1-2 mL培養(yang) 基,輕輕吹勻。
接種: 將SP20細胞懸液加入培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,培養(yang) 過夜,第二天更換培養(yang) 液並檢查細胞密度。
SP20細胞傳代
檢查SP20細胞密度: 當SP20細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
洗滌SP20細胞: 棄去培養(yang) 上清,用PBS潤洗SP20細胞1-2次。
消化SP20細胞: 加入1 mL消化液於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中觀察SP20細胞脫落情況。
終止消化: 當SP20細胞完全脫落後,加入2-3 mL培養(yang) 基以終止消化反應。
離心: 將SP20細胞懸液轉移至離心管中,離心1000 RPM 4分鍾,棄去上清。
重懸SP20細胞: 補加適量培養(yang) 基,輕輕吹勻,將SP20細胞懸液按比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
SP20細胞凍存
準備SP20細胞: 選擇健康的SP20細胞,進行離心並重懸於(yu) 凍存液中,細胞濃度通常為(wei) 5×10⁶細胞/mL。
分裝: 將1 mL SP20細胞懸液分裝到凍存管中,密封並標記細胞名稱和凍存日期。
冷凍: 將凍存管放入-80°C冰箱中冷凍24小時,然後轉移至液氮中長期保存。
SP20細胞的生長表現
生長速度: 在適當的培養(yang) 基和條件下,SP20細胞的倍增時間通常為(wei) 24-36小時。
不同培養(yang) 容器中的表現: SP20細胞在培養(yang) 瓶、培養(yang) 皿和懸浮培養(yang) 係統中均表現良好,懸浮培養(yang) 係統可進一步提高SP20細胞的生長速度和產(chan) 量。
注意事項
保持無菌操作,避免交叉汙染。
定期檢查SP20細胞生長狀態,確保其處於(yu) 良好狀態。
根據實驗需求調整培養(yang) 基成分和添加生長因子。
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