
MS-5細胞(小鼠骨髓基質細胞)
- 來源:骨髓
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:MS-5細胞表達多種與(yu) 造血支持相關(guan) 的因子,如: 細胞因子:如IL-6、IL-3、GM-CSF等; 生長因子:如SCF(幹細胞因子)
MS-5小鼠骨髓基質細胞係是通過從(cong) C3H/HeJ小鼠骨髓中提取並經過長期培養(yang) 建立的貼壁成纖維樣細胞係。MS-5細胞係在造血微環境研究中有重要應用,尤其是在支持造血幹細胞增殖與(yu) 分化方麵。MS-5細胞來源於(yu) 遺傳(chuan) 穩定性良好的C3H/HeJ小鼠,研究人員通過從(cong) 其骨髓中分離出細胞,在特定培養(yang) 條件下長期培養(yang) ,使細胞逐漸展現出貼壁生長的成纖維樣形態。隨後,細胞接受輻射處理,抑製其過度增殖,形成穩定的基質細胞係。MS-5細胞係的成纖維樣形態及其支持造血功能的能力,使其在幹細胞研究、骨髓微環境以及再生醫學等領域具有重要的應用價(jia) 值。
MS-5細胞特性特征
基因表達:MS-5細胞表達多種與(yu) 造血支持相關(guan) 的因子,如細胞因子和生長因子,這些因子對造血幹細胞的增殖和分化起到促進作用。
表麵標誌物:MS-5細胞係可能表達一些成纖維細胞特有的標誌物,如CD44、CD90等,這些標誌物在細胞間相互作用中發揮重要作用。
造血微環境研究:MS-5細胞廣泛用於(yu) 研究骨髓微環境對造血幹細胞的影響,能有效模擬體(ti) 內(nei) 造血環境。
MS-5細胞參數表
細胞名稱 | MS-5細胞(小鼠骨髓基質細胞) |
細胞別稱 | MS5; Mouse Stromal-5 |
形態特性 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
種屬來源 | 小鼠 |
組織來源 | 骨髓 |
細胞代數 | 10代以內 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1 mL凍存管包裝 |
培養體係 | RPMI 1640 + 10% FBS + 1% P/S |
氣相條件 | 空氣95%;CO₂ 5% |
培養溫度 | 37℃ |
pH值範圍 | 7.2 - 7.4 |
倍增時間 | ~50 hours (DSMZ=ACC-441). |
傳代方法 | 建議當細胞密度達到80%-90%時進行傳代,通常1:2比例 |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO,推薦使用無血清凍存液 (CX001) |
支原體檢測 | 無 |
用途 | 科學研究,不可用於動物或人類疾病的治療產品 |
培養教程
MS-5小鼠骨髓基質細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的MS5細胞,立即將其放入37℃水浴中進行快速解凍(約1-2分鍾)。
將解凍後的MS5細胞轉移至含9 mL預熱培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
在1000 rpm下離心4分鍾,棄去上清液。
用1 mL PBS重懸MS5細胞,並進行細胞計數以確認細胞濃度。
根據實驗需求,調整MS5細胞的接種密度(通常為(wei) 1×10^5至1×10^6細胞/mL),將重懸的細胞加入培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶放入CO₂培養(yang) 箱中,讓MS5細胞在適宜條件下貼壁生長。
傳代
當MS5細胞生長至80%-90%匯合時,進行傳(chuan) 代操作。
用PBS洗滌細胞,以去除殘留的培養(yang) 基。
加入適量的0.25%胰酶消化細胞,通常消化時間為(wei) 2-5分鍾。
用培養(yang) 基中和胰酶,輕輕吹打混勻以確保細胞完全複懸。
在1000 rpm下離心4分鍾,棄去上清液並用PBS洗滌一次。
用新鮮培養(yang) 基重懸MS5細胞,並按照之前的接種密度接種到新的培養(yang) 瓶中。
凍存
在適當時機(如傳(chuan) 代後),進行MS5細胞凍存:
將細胞重懸於(yu) 90% FBS與(yu) 10% DMSO的混合液中。
分裝至凍存管中,確保標記清楚。
在-80℃冰箱中逐步降溫(每小時約降溫1℃),然後轉移至液氮中保存。