
SP20細胞(Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞)
- 來源:脾髒
- 細胞特征:懸浮細胞,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:Sp2/0-Ag14細胞不分泌免疫球蛋白,這使其成為(wei) 單克隆抗體(ti) 生產(chan) 的理想選擇
Sp2/0-Ag14細胞係是通過通過將經過綿羊紅細胞免疫的BALB/c小鼠脾細胞與(yu) P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合而形成的,是一種小鼠骨髓瘤細胞係,由B淋巴細胞從(cong) 小鼠脾髒分離。主要用於(yu) 單克隆抗體(ti) 的生產(chan) 。SP20細胞在免疫學研究中具有重要應用。
SP20細胞特性特征
不分泌免疫球蛋白: SP20細胞不分泌免疫球蛋白,這使其成為(wei) 單克隆抗體(ti) 生產(chan) 的理想選擇.
藥物敏感性: SP20細胞係對20μg/ml的8-氮鳥嘌呤具有抗性,並且對HAT(次黃嘌呤-氨基蝶呤-胸苷)敏感.
病毒檢測: SP20細胞係鼠痘病毒(ECTV)呈陰性,並通過了支原體(ti) 檢測.
抗原表達: SP20細胞係表達H-2d抗原,這是小鼠的主要組織相容性複合體(ti) (MHC)抗原之一.
基因特征: 由於(yu) 其不分泌免疫球蛋白的特性,SP20細胞係在基因水平上缺乏相關(guan) 的免疫球蛋白基因表達,這使其在單克隆抗體(ti) 生產(chan) 中具有獨特的優(you) 勢
SP20細胞參數表
細胞名稱 | SP20細胞(Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞) |
細胞別稱 | SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14;SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2;SP2;GM03569; GM03569B; GM3569 |
細胞類型 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
物種 | 小鼠(Mus musculus) |
來源 | 經過綿羊紅細胞免疫的BALB/c小鼠脾細胞與P3X63Ag8骨髓瘤細胞融合 |
形態 | 淋巴母細胞樣,懸浮生長 |
培養基 | DMEM,10%胎牛血清(FBS),青黴素和鏈黴素 |
培養條件 | 37°C,95%空氣,5%二氧化碳 |
傳代 | 1:2至1:3,每周3次,傳代時達80%-90% |
抗原表達 | H-2d |
免疫球蛋白 | 不分泌 |
8-氮鳥嘌呤 | 對20μg/ml抗性 |
HAT | 敏感 |
病毒檢測 | 鼠痘病毒(ECTV)陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
應用 | 單克隆抗體生產、細胞融合實驗、抗體工程 |
複蘇活力 | 存活率 > 90% |
凍存溫度 | -196°C(液氮) |
運輸溫度 | -80°C(幹冰) |
培養教程
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的SP20細胞,迅速放入37°C水浴中解凍。
將解凍的SP20細胞懸液轉移到含有預熱培養(yang) 基的離心管中。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸SP20細胞,並轉移到培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳代
傳(chuan) 代比例:1:2至1:4;傳(chuan) 代頻率:每周2~3次
當SP20細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
收集細胞懸液,1000rpm離心5分鍾。
棄去上清,用新鮮培養(yang) 基重懸SP20細胞。
按照傳(chuan) 代比例將SP20細胞分配到新的培養(yang) 瓶中。
添加新鮮培養(yang) 基至適當體(ti) 積。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
換液
頻率:每周2~3次
方法:更換50-70%的舊培養(yang) 基為(wei) 新鮮培養(yang) 基。
細胞凍存
凍存液配方:55%基礎培養(yang) 基 + 40%FBS + 5%DMSO
收集對數生長期的SP20細胞。
以1000rpm離心5分鍾,棄去上清。
用凍存液重懸SP20細胞,調整密度至1-2×10^6個(ge) /ml。
將SP20細胞懸液分裝到凍存管中。
將凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80°C冰箱中緩慢降溫。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
注意事項
定期檢查SP20細胞形態和生長狀況。
保持無菌操作,避免汙染。
定期進行支原體(ti) 檢測。
細胞密度應保持在適當範圍內(nei) ,不宜過高或過低。
避免反複凍融SP20細胞,以防影響細胞活性。
SP20細胞的實驗優勢
單克隆抗體(ti) 生產(chan) :由於(yu) 不分泌免疫球蛋白,SP20細胞是製備雜交瘤和生產(chan) 單克隆抗體(ti) 的理想選擇。
細胞融合實驗:SP20細胞可以作為(wei) 細胞融合中的B細胞組分,用於(yu) 製備雜交瘤。
抗體(ti) 工程:在抗體(ti) 工程和改造中,SP20細胞可作為(wei) 重要的工具細胞。
藥物敏感性研究:SP20細胞對20μg/ml的8-氮鳥嘌呤有抗性,對HAT培養(yang) 基敏感,可用於(yu) 相關(guan) 藥物研究。
腫瘤學研究:作為(wei) 骨髓瘤細胞模型,SP20細胞可用於(yu) 評估新治療方法和藥物的有效性,以及研究漿細胞瘤的發生和發展機製。
基因轉染和蛋白質表達:SP20細胞適用於(yu) 基因轉染和蛋白質表達的體(ti) 外實驗模型。
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參考文獻
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