
U266細胞(U266B1人多發性骨髓瘤細胞)
- 來源:骨髓瘤;B淋巴細胞
- 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表達:免疫球蛋白,單克隆抗體(ti) ,白細胞介素-6 (IL-6) ;同種型:IgE,λ輕鏈
U266 [U266B1]人多發性骨髓瘤細胞是從(cong) 一名53歲男性多發性骨髓瘤患者的外周血中分離出的B淋巴細胞,常用於(yu) 研究免疫係統疾病和免疫學。U266細胞係在1970年由N.K. Nilsson建立,源於(yu) 骨髓瘤患者的B淋巴細胞,具備漿細胞的特征。
U266細胞特性特征
U266細胞主要為(wei) 懸浮生長,部分細胞可能附著在培養(yang) 瓶底
U266細胞表達與(yu) 體(ti) 內(nei) 骨髓瘤細胞相同的免疫球蛋白;產(chan) 生人白細胞介素-6 (IL-6);產(chan) 生IgE和λ輕鏈
基因表達:表達免疫球蛋白基因、表達單克隆抗體(ti) 基因、表達白細胞介素-6基因;
U266細胞參數表
細胞名稱 | U266細胞(U266B1人多發性骨髓瘤細胞) |
細胞別稱 | U266-B1; U266B1; U-266; U266; U266S; U266BL; U266Bl; 266Bl |
來源 | 漿細胞骨髓瘤;男性;53歲 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
細胞類型 | 腫瘤細胞,B淋巴細胞 |
生長特性 | 懸浮細胞,部分細胞可能附著 |
建立時間 | 1970年(由N.K. Nilsson建立) |
收錄 | ATCC |
生物安全等級 | 1級 |
致瘤性 | 是 |
推薦培養基 | RPMI-1640 + 15% FBS + 1% P/S |
培養環境 | 37℃,5% CO2,飽和濕度 |
換液周期 | 2-3天 |
培養基體積 | T25瓶:10-12ml;10cm皿:12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定) |
基因表達 | 免疫球蛋白,單克隆抗體,白細胞介素-6 (IL-6) |
同種型 | IgE,λ輕鏈 |
應用 | 3D細胞培養,免疫係統疾病研究,免疫學研究,轉染宿主 |
凍存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO |
凍存規格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性 |
安全性 | 所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內操作,並請注意防護 |
保存條件 | 液氮存儲 |
供應限製 | 僅供科學研究之用 |
培養教程
U266人多發性骨髓瘤細胞培養教程
傳代方法
混勻細胞: 將培養(yang) 瓶中的U266細胞輕輕混勻。
收集細胞: 將細胞培養(yang) 基轉移至離心管中,以900rpm離心3-5分鍾,棄去上清。
重懸細胞: 加入新的完全培養(yang) 基,輕輕重懸U266細胞。
分裝細胞: 將U266細胞懸液均勻分配到新的培養(yang) 瓶中。
補充培養(yang) 基: 補足完全培養(yang) 基,並將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
凍存方法
離心細胞: 將U266細胞離心後,加入配置好的凍存液輕輕重懸細胞。
移入凍存管: 將細胞懸液快速移入標記好的凍存管中。
程序凍存: 將凍存管放入程序凍存盒,放入-80℃冰箱中過夜,然後轉入液氮保存。
無程序凍存盒: 將凍存管放置於(yu) 泡沫盒中於(yu) 4℃靜置5-10分鍾,再轉至-20℃冰箱靜置2小時,隨後轉入-80℃冰箱過夜,再轉入液氮保存。
細胞複蘇
快速解凍: 將凍存管從(cong) 液氮中取出,立即放入37℃水浴中解凍,輕輕搖動凍存管以加速解凍。
離心去除DMSO: 解凍後將U266細胞懸液轉移至含有10ml完全培養(yang) 基的離心管中,以900rpm離心5分鍾,棄去上清。
重懸細胞: 加入新鮮完全培養(yang) 基,輕輕重懸U266細胞,轉移至培養(yang) 瓶中並放入培養(yang) 箱培養(yang) 。
細胞觀察
活細胞: 圓形透亮,細胞膜完整的U266細胞。
死細胞: 細胞膜破裂,細胞內(nei) 容物外泄的U266細胞。
注意事項
懸浮細胞處理: 部分懸浮U266細胞可能會(hui) 附著於(yu) 培養(yang) 瓶底部,輕輕晃動培養(yang) 基或用吸管輕輕吹打細胞層可使其脫落,無需胰酶消化。
細胞吹打: 使用培養(yang) 皿更適合吹打U266細胞操作,吹打時應盡量輕柔,避免產(chan) 生過多氣泡以免影響細胞狀態。
無菌操作: 所有操作應在無菌條件下進行,防止U266細胞汙染。
細胞凍存活性檢查: 凍存後及時複蘇U266細胞以檢查凍存活性,若發現異常,及時調整實驗方案。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12,13 |
D1S1656 | 12,15 |
D2S441 | 10,11 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 11,17 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 14 |
D12S391 | 18 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 10 |
D18S51 | 12,14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 15,16 |
DYS391 | 10 |
FGA | 18 |
Penta D | 10,13 |
Penta E | 10,12 |
TH01 | 5,7 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |
參考文獻
- 《蘭州大學》 2009年
- 摘要:...根治腫瘤治療的分子靶標。雖然已經從急性髓性白血病、多發性骨髓瘤、乳腺癌、胰腺癌、肝癌...
- 《山西醫科大學》 2011年
- 摘要:目的:應用MADB-106大鼠乳腺癌細胞構建轉移性骨癌痛模型,通過對該模型痛行為學、影像學...
- 《浙江大學》 2021年
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- 《山西醫科大學》 2016年
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