
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞)
- 來源:B淋巴細胞;漿細胞;骨髓瘤
- 細胞特征:懸浮細胞 , 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表達:表達H-2d抗原; 基因表達:能夠表達免疫球蛋白和單克隆抗體(ti)
P3X63Ag8鼠骨髓瘤細胞源自P3K細胞株,後者起源於(yu) 漿細胞MOPC-21的組織培養(yang) 株。P3X63Ag8細胞係為(wei) 超二倍體(ti) ,模態數為(wei) 65。P3X63Ag8細胞表達抗原H-2d和免疫球蛋白,並產(chan) 生單克隆抗體(ti) 。經檢測,發現鼠痘病毒呈陰性。
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞特性特征
抗原表達:表達H-2d抗原。
基因表達:能夠表達免疫球蛋白和單克隆抗體(ti) 。
p3x63ag8細胞缺乏3-酮類固醇還原酶活性,是膽固醇營養(yang) 缺陷型細胞。
對0.1 mM 8-氮鳥嘌呤具有抗性。
在HAT(次黃嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶)培養(yang) 基中無法存活。
p3x63ag8細胞能夠生成但不分泌免疫球蛋白
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞參數表
細胞名稱 | P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) |
細胞類型 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
細胞來源 | P3K細胞株,源自漿細胞MOPC-21的組織培養株 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
生長特性 | 懸浮生長 |
模態數 | 65(超二倍體) |
抗原表達 | H-2d |
基因表達 | 免疫球蛋白,單克隆抗體 |
倍增時間 | 2-3天 |
安全等級 | BSL1 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培養條件 | 37°C,5% CO2 |
傳代比例 | 1:2 |
凍存條件 | 基礎培養基 + 8% DMSO + 20% FBS,液氮保存 |
細胞密度 | 1x10^5 到 1x10^6 cells/mL |
pH值 | 7.0-7.4 |
滲透壓 | 280-320 mOsm/kg |
抗性 | 對0.1 mM 8-氮鳥嘌呤具有抗性 |
敏感性 | 在HAT培養基中死亡 |
膽固醇營養 | 由於缺失3-酮類固醇還原酶活性,這些細胞是膽固醇營養缺陷型細胞 |
病毒檢測 | 鼠痘病毒陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
細菌、酵母和真菌檢測 | 陰性 |
主要用途 | 雜交瘤融合的配體細胞,單克隆抗體生產 |
其他用途 | 骨髓瘤相關研究,化學藥物和MicroRNA治療研究 |
培養教程
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞培養教程
P3X63Ag8細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的P3X63Ag8細胞,在37°C水浴中快速解凍(1-2分鍾)。
將P3X63Ag8細胞懸液轉移到含10mL預熱培養(yang) 基的15mL離心管中。
以800 rpm離心5分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸P3X63Ag8細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。
常規培養
保持P3X63Ag8細胞密度在1x10^5到1x10^6 cells/mL之間。
每2-3天觀察P3X63Ag8細胞狀態,根據需要進行傳(chuan) 代。
傳代步驟
收集P3X63Ag8細胞懸液,以800 rpm離心5分鍾。
棄去上清,用新鮮培養(yang) 基重懸P3X63Ag8細胞。
按1:2的比例分配到新的培養(yang) 瓶中。
補充新鮮培養(yang) 基至適當體(ti) 積。
P3X63Ag8細胞凍存
準備凍存液:基礎培養(yang) 基 + 8% DMSO + 20% FBS。
收集對數生長期的P3X63Ag8細胞並計數。
調整P3X63Ag8細胞濃度至2-5x10^6 cells/mL。
將P3X63Ag8細胞懸液與(yu) 等體(ti) 積的2倍濃度凍存液混合。
分裝到凍存管中,每管1mL。
使用程序降溫盒在-80°C冰箱中緩慢降溫。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
注意事項
定期檢查P3X63Ag8細胞形態和生長狀態。
保持無菌操作,防止汙染。
避免P3X63Ag8細胞過度生長或密度過低。
定期進行支原體(ti) 檢測。
若不使用抗生素,需更頻繁地更換培養(yang) 基。
特殊處理
由於(yu) P3X63Ag8細胞是膽固醇營養(yang) 缺陷型,可能需要在培養(yang) 基中額外添加膽固醇或相關(guan) 前體(ti) 物質。
質量控製
定期檢查P3X63Ag8細胞的生長曲線和倍增時間。
監測P3X63Ag8細胞的抗體(ti) 產(chan) 生能力(如適用)。
進行P3X63Ag8細胞特性鑒定,如流式細胞術分析表麵標記物。
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