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mm.1r細胞(人多發性骨髓瘤細胞)貨號:STM-CL-5233 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

mm.1r細胞(人多發性骨髓瘤細胞)

  • 來源:外周血;女性多發性骨髓瘤患者的外周血
  • 細胞特征:懸浮和輕微的貼壁同時存在,成淋巴瘤細胞
  • 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:mm.1r細胞係對地塞米鬆具有耐藥性,而MM.1S細胞係對地塞米鬆敏感。
Tags: 骨髓瘤細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,350.00
提供STR鑒定報告

MM.1R細胞是1990年從(cong) 一名42歲的黑人女性多發性骨髓瘤患者的外周血中分離,是一種B淋巴母細胞係。MM.1R細胞對地塞米鬆具有耐藥性。MM.1R細胞是從(cong) 母細胞株MM.1中衍生出來的,MM.1細胞是一種對類固醇療法產(chan) 生抗藥性的多發性骨髓瘤患細胞。

mm.1r細胞特性

  • mm.1r細胞係對地塞米鬆具有耐藥性,而MM.1S細胞係對地塞米鬆敏感。

  • mm.1r細胞複蘇後需要大約兩(liang) 周才能恢複正常生長。

  • 抗原表達:CD25陰性、CD38陽性、CD52陽性、CD59陽性

  • 基因表達:λ輕鏈免疫球蛋白表達。

  • 表達標記:表達糖皮質激素受體(ti) ,但不表達。

mm.1r細胞參數表

細胞名稱mm.1r細胞(人多發性骨髓瘤細胞)
別稱MM1R細胞, MM1.R細胞, MM-1R細胞, MM1-R細胞
中文名稱人多發性骨髓瘤細胞
細胞來源ATCC CRL-2975
組織來源外周血
疾病特征多發性骨髓瘤,對類固醇療法耐藥
患者年齡42歲
患者性別女性
生物安全等級1
生長方式懸浮和輕微貼壁
細胞形態淋巴母細胞樣
完全培養基RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S
培養條件37℃, 5% CO2
培養環境氣相:95%空氣+5%二氧化碳;飽和濕度
傳代比例1:2至1:4,每周2次,或每2-3天一次
傳代周期3-5天
換液頻率2-3天一次
凍存條件90%完全培養基+10% DMSO,液氮儲存
抗原表達CD25-, CD38+, CD52+, CD59+
受體表達糖皮質激素受體,未表達
基因表達λ輕鏈免疫球蛋白
運輸方式常溫運輸(T25培養瓶)或幹冰運輸(凍存管)
支原體檢測陰性
倍增時間32-48小時
細胞描述

MM.1R細胞是從(cong) 一位對類固醇療法產(chan) 生抗藥性的多發性骨髓瘤患者的外周血中建立的,MM.1R對地塞米鬆耐藥,近緣細胞係MM.1S對地塞米鬆敏感。

MM.1R細胞複蘇後需要兩(liang) 周左右才能恢複正常生長。

培養教程

mm.1r人多發性骨髓瘤細胞培養教程

細胞傳代

  • mm1r細胞生長至適當密度(通常為(wei) 培養(yang) 瓶表麵的80%覆蓋),首先棄去培養(yang) 上清液。

  • 用PBS潤洗mm1r細胞:加入不含鈣和鎂離子的PBS,輕輕潤洗mm1r細胞1-2次。

  • 消化mm1r細胞:加入足量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液,確保消化液充分覆蓋所有mm1r細胞表麵。將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,通常1分鍾後觀察mm1r細胞是否變圓脫落。

  • 終止消化:當大部分mm1r細胞開始變圓並脫離表麵時,快速將培養(yang) 瓶移回操作台,輕輕敲擊幾下培養(yang) 瓶,並加入適量完全培養(yang) 基終止消化過程。

  • 收集mm1r細胞:將mm1r細胞懸液轉移到15ml離心管中,以1000rpm離心4-5分鍾,去除上清液。

  • mm1r細胞重懸:用1-2ml完全培養(yang) 基輕輕懸浮mm1r細胞沉澱,然後根據需要按1:2的比例分配到新的含有充足培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。

  • 培養(yang) 條件:將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。在傳(chuan) 代後24小時內(nei) 更換新的培養(yang) 基,以促進mm1r細胞生長和健康狀態。

細胞凍存

  • mm1r細胞收集和計數:當mm1r細胞達到適當的生長狀態時,可以進行凍存。收集mm1r細胞及培養(yang) 液,轉移至無菌離心管中。

  • 離心和洗滌:以1000rpm離心4-5分鍾,去除上清液,並用PBS洗滌一次。

  • mm1r細胞計數和凍存液配製:根據mm1r細胞計數,將mm1r細胞重懸於(yu) 適量的凍存液中(通常為(wei) 90% FBS + 10% DMSO),使mm1r細胞濃度在5×10^6~1×10^7細胞/ml之間。

  • 凍存管標記和冷凍:將凍存液中的mm1r細胞按1ml/支分裝入凍存管中,確保每支凍存管都標記清楚細胞類型、傳(chuan) 代數、日期等信息。首先在-20℃冰箱中快速冷凍1.5小時,然後轉移到-80℃冰箱中過夜,最終存儲(chu) 在液氮中長期保存。

細胞複蘇

  • mm1r細胞解凍:從(cong) 液氮中快速取出凍存管,將其迅速置於(yu) 37℃水浴中,直到凍存管中的冰塊完全融化。注意避免過度攪動或振蕩,以免對mm1r細胞造成損傷(shang) 。

  • mm1r細胞重懸:將凍存管中的mm1r細胞懸液緩慢加入到15ml離心管中,用預熱的完全培養(yang) 基輕輕懸浮mm1r細胞沉澱。

  • mm1r細胞分配:將懸液按需要分配到新的含有適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,通常每個(ge) T25瓶需要添加6ml完全培養(yang) 基。

  • 培養(yang) :將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。觀察mm1r細胞的生長情況和密度,根據需要在培養(yang) 後24小時內(nei) 進行液體(ti) 更換。

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D18S5111,16
D19S43313
D21S1129,30
D22S104510,11
FGA20,24
Penta D2.2,9
Penta E13,15
TH017,8
TPOX8
15,17

參考文獻

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