
mm.1r細胞(人多發性骨髓瘤細胞)
- 來源:外周血;女性多發性骨髓瘤患者的外周血
- 細胞特征:懸浮和輕微的貼壁同時存在,成淋巴瘤細胞
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:mm.1r細胞係對地塞米鬆具有耐藥性,而MM.1S細胞係對地塞米鬆敏感。
MM.1R細胞是1990年從(cong) 一名42歲的黑人女性多發性骨髓瘤患者的外周血中分離,是一種B淋巴母細胞係。MM.1R細胞對地塞米鬆具有耐藥性。MM.1R細胞是從(cong) 母細胞株MM.1中衍生出來的,MM.1細胞是一種對類固醇療法產(chan) 生抗藥性的多發性骨髓瘤患細胞。
mm.1r細胞特性
mm.1r細胞係對地塞米鬆具有耐藥性,而MM.1S細胞係對地塞米鬆敏感。
mm.1r細胞複蘇後需要大約兩(liang) 周才能恢複正常生長。
抗原表達:CD25陰性、CD38陽性、CD52陽性、CD59陽性
基因表達:λ輕鏈免疫球蛋白表達。
表達標記:表達糖皮質激素受體(ti) ,但不表達。
mm.1r細胞參數表
細胞名稱 | mm.1r細胞(人多發性骨髓瘤細胞) |
別稱 | MM1R細胞, MM1.R細胞, MM-1R細胞, MM1-R細胞 |
中文名稱 | 人多發性骨髓瘤細胞 |
細胞來源 | ATCC CRL-2975 |
組織來源 | 外周血 |
疾病特征 | 多發性骨髓瘤,對類固醇療法耐藥 |
患者年齡 | 42歲 |
患者性別 | 女性 |
生物安全等級 | 1 |
生長方式 | 懸浮和輕微貼壁 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
完全培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培養條件 | 37℃, 5% CO2 |
培養環境 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;飽和濕度 |
傳代比例 | 1:2至1:4,每周2次,或每2-3天一次 |
傳代周期 | 3-5天 |
換液頻率 | 2-3天一次 |
凍存條件 | 90%完全培養基+10% DMSO,液氮儲存 |
抗原表達 | CD25-, CD38+, CD52+, CD59+ |
受體表達 | 糖皮質激素受體,未表達 |
基因表達 | λ輕鏈免疫球蛋白 |
運輸方式 | 常溫運輸(T25培養瓶)或幹冰運輸(凍存管) |
支原體檢測 | 陰性 |
倍增時間 | 32-48小時 |
細胞描述 | MM.1R細胞是從(cong) 一位對類固醇療法產(chan) 生抗藥性的多發性骨髓瘤患者的外周血中建立的,MM.1R對地塞米鬆耐藥,近緣細胞係MM.1S對地塞米鬆敏感。 MM.1R細胞複蘇後需要兩(liang) 周左右才能恢複正常生長。 |
培養教程
mm.1r人多發性骨髓瘤細胞培養教程
細胞傳代
mm1r細胞生長至適當密度(通常為(wei) 培養(yang) 瓶表麵的80%覆蓋),首先棄去培養(yang) 上清液。
用PBS潤洗mm1r細胞:加入不含鈣和鎂離子的PBS,輕輕潤洗mm1r細胞1-2次。
消化mm1r細胞:加入足量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液,確保消化液充分覆蓋所有mm1r細胞表麵。將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,通常1分鍾後觀察mm1r細胞是否變圓脫落。
終止消化:當大部分mm1r細胞開始變圓並脫離表麵時,快速將培養(yang) 瓶移回操作台,輕輕敲擊幾下培養(yang) 瓶,並加入適量完全培養(yang) 基終止消化過程。
收集mm1r細胞:將mm1r細胞懸液轉移到15ml離心管中,以1000rpm離心4-5分鍾,去除上清液。
mm1r細胞重懸:用1-2ml完全培養(yang) 基輕輕懸浮mm1r細胞沉澱,然後根據需要按1:2的比例分配到新的含有充足培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。
培養(yang) 條件:將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。在傳(chuan) 代後24小時內(nei) 更換新的培養(yang) 基,以促進mm1r細胞生長和健康狀態。
細胞凍存
mm1r細胞收集和計數:當mm1r細胞達到適當的生長狀態時,可以進行凍存。收集mm1r細胞及培養(yang) 液,轉移至無菌離心管中。
離心和洗滌:以1000rpm離心4-5分鍾,去除上清液,並用PBS洗滌一次。
mm1r細胞計數和凍存液配製:根據mm1r細胞計數,將mm1r細胞重懸於(yu) 適量的凍存液中(通常為(wei) 90% FBS + 10% DMSO),使mm1r細胞濃度在5×10^6~1×10^7細胞/ml之間。
凍存管標記和冷凍:將凍存液中的mm1r細胞按1ml/支分裝入凍存管中,確保每支凍存管都標記清楚細胞類型、傳(chuan) 代數、日期等信息。首先在-20℃冰箱中快速冷凍1.5小時,然後轉移到-80℃冰箱中過夜,最終存儲(chu) 在液氮中長期保存。
細胞複蘇
mm1r細胞解凍:從(cong) 液氮中快速取出凍存管,將其迅速置於(yu) 37℃水浴中,直到凍存管中的冰塊完全融化。注意避免過度攪動或振蕩,以免對mm1r細胞造成損傷(shang) 。
mm1r細胞重懸:將凍存管中的mm1r細胞懸液緩慢加入到15ml離心管中,用預熱的完全培養(yang) 基輕輕懸浮mm1r細胞沉澱。
mm1r細胞分配:將懸液按需要分配到新的含有適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,通常每個(ge) T25瓶需要添加6ml完全培養(yang) 基。
培養(yang) :將培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO2的細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。觀察mm1r細胞的生長情況和密度,根據需要在培養(yang) 後24小時內(nei) 進行液體(ti) 更換。
相關資料
- 人胚肺細胞與幹細胞的區別
- 人類胚胎肺細胞和幹細胞是兩種細胞類型,它們在多個方麵存在著顯著的差異,包括來源、特性和用途...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,14 |
D1S1656 | 11,12 |
D2S441 | 11 |
D2S1338 | 21,22 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 8,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14 |
D10S1248 | 12,15 |
D12S391 | 17,24 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 11,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 29,30 |
D22S1045 | 10,11 |
FGA | 20,24 |
Penta D | 2.2,9 |
Penta E | 13,15 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 8 |
15,17 |