
NCI-H929細胞(人骨髓瘤細胞)
- 來源:骨髓;惡性胸腔積液
- 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+0.05mM β-mercaptoethanol+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因特征:c-myc原癌基因重排,並表達c-myc RNA;存在一個(ge) 激活的ras等位基因表達
NCI-H929細胞係來源於(yu) 一名62歲白人女性多發性骨髓瘤患者的惡性胸腔積液。NCI-H929細胞是一種B淋巴細胞,接近四倍體(ti) ,並且大多數8號染色體(ti) 的拷貝具有8q+異常。
NCI-H929細胞係具有以下特性和特征
抗原陽性表達:漿細胞抗原1(PCA-1)、CD38(T10)、轉鐵蛋白受體(ti)
抗原陰性表達:HLA-DR、CALLA、早期B細胞發育標誌物、EB病毒核抗原(EBNA)
分子標誌物:表達轉鐵蛋白
免疫球蛋白表達:產(chan) 生IgA類型免疫球蛋白,κ輕鏈
基因特征:c-myc原癌基因重排,並表達c-myc RNA;存在一個(ge) 激活的ras等位基因表達
生長特性:懸浮生長,形態呈淋巴母細胞樣
NCI-H929細胞參數表
細胞名稱 | NCI-H929細胞(人骨髓瘤細胞) |
細胞別稱 | NCI-H929; NCI H929; NCIH929; H929; H-929; h929 |
細胞來源 | 人骨髓瘤細胞,62歲白人男性的惡性胸腔積液 |
組織來源 | 骨髓 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
染色體特征 | 接近四倍體,8號染色體大多數拷貝有8q+異常 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清(FBS)+ 0.05 mM β-巰基乙醇,1% 雙抗 |
培養條件 | 37°C,5% CO2,濕度70%-80% |
培養參數 | 傳代比例 1:2 至 1:3;細胞密度維持 5×10^5 至 1×10^6 cells/ml;換液頻率 每周2-3次 |
凍存環境 | 凍存液:90% 血清,10% DMSO ; 液氮或-80°C |
表麵抗原表達 | 陽性:PCA-1,CD38,轉鐵蛋白受體; 陰性:HLA-DR,CALLA,EBNA,早期B細胞發育標誌物 |
免疫球蛋白表達 | IgA,κ輕鏈 |
基因特征 | c-myc原癌基因重排,激活的ras等位基因表達 |
生物安全等級 | BSL-1 |
應用 | 多發性骨髓瘤研究,藥物篩選 |
細胞代數 | 10代以內 |
支原體檢測 | 陰性 |
保藏機構 | ATCC (CRL-9068); DSMZ (ACC-163); ECACC (9505041); 中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心 |
供應限製 | 僅限於科學研究,不可用於治療 |
培養教程
NCI-H929人骨髓瘤細胞培養教程
NCI-H929細胞的複蘇步驟
在37°C水浴中快速解凍NCI-H929細胞凍存管。
將解凍的NCI-H929細胞懸液轉移到含4-6 mL完全培養(yang) 基的離心管中。
以1000 rpm離心3-5分鍾以去除保存液。
棄去上清液,用完全培養(yang) 基重懸NCI-H929細胞。
將重懸的NCI-H929細胞懸液轉移到含6-8 mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。
在37°C下培養(yang) NCI-H929細胞過夜。
NCI-H929細胞傳代
細胞密度:保持NCI-H929細胞在5×10^5至1×10^6 cells/mL之間。
傳(chuan) 代比例:1:2至1:3,確保NCI-H929細胞的健康增殖。
換液頻率:每周2-3次,保證NCI-H929細胞的營養(yang) 供應。
具體傳代步驟
收集NCI-H929細胞懸液,以1000 rpm離心5分鍾。
棄去上清液,用預熱的完全培養(yang) 基重懸NCI-H929細胞。
按1:2或1:3的比例將NCI-H929細胞分配到新的培養(yang) 瓶中。
補充完全培養(yang) 基至適當體(ti) 積以維持NCI-H929細胞的生長。
NCI-H929細胞凍存
凍存液配方:90%血清,10% DMSO,適用於(yu) NCI-H929細胞的長期保存。
收集對數生長期的NCI-H929細胞,以1000 rpm離心5分鍾。
棄去上清液,用凍存液重懸NCI-H929細胞。
將NCI-H929細胞懸液分裝到凍存管中,每管約1×10^6-1×10^7個(ge) 細胞。
使用程序降溫盒或-80°C冰箱緩慢降溫。
24小時後將NCI-H929細胞轉移到液氮中長期保存。
注意事項
培養(yang) 基配方:確保使用高質量的培養(yang) 基成分,特別是適用於(yu) NCI-H929細胞的RPMI-1640、FBS、β-巰基乙醇和雙抗。
細胞密度控製:保持適當的細胞密度,以保證NCI-H929細胞的健康生長。
傳(chuan) 代頻率:根據NCI-H929細胞的生長情況,每周進行2-3次傳(chuan) 代。
培養(yang) 條件:嚴(yan) 格控製培養(yang) 條件,確保培養(yang) 箱參數適合NCI-H929細胞。
無菌操作:保持嚴(yan) 格的無菌操作,防止NCI-H929細胞的汙染。
細胞狀態觀察:每天觀察NCI-H929細胞形態、密度和生長狀況。
使用低代次細胞:建議使用10代以內(nei) 的NCI-H929細胞進行實驗。
凍存與(yu) 複蘇:按照標準程序進行NCI-H929細胞的凍存和複蘇。
培養(yang) 基更換:定期更換新鮮完全培養(yang) 基,保證NCI-H929細胞的營養(yang) 供應。
細胞鑒定:定期進行STR鑒定,確保NCI-H929細胞係的純度。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 (ATCC=CRL-3580; DSMZ=ACC-163) |
11 (CCRID=1101HUM-PUMC000360; Cosmic-CLP=724825; ECACC=95050415; Technion Genomics Center BCF) | |
D1S1656 | 17.3 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 17,19 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 11,13 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 19.3 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 12,13 (DSMZ=ACC-163) |
12,14 (Technion Genomics Center BCF) | |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,15 |