RPMI8226細胞（人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞）

RPMI8226細胞係是從(cong) 一名61歲男性患者的外周血中分離出來的人B淋巴細胞，患者患有IgG lambda型多發性骨髓瘤。RPMI8226細胞係僅(jin) 產(chan) 生和分泌lambda輕鏈，而不分泌重鏈。RPMI 8226廣泛應用多發性骨髓瘤的病理機製和治療方法研究，並適合作為(wei) 轉染宿主。

RPMI 8226細胞係具有不穩定的近三倍體(ti) 核型，染色體(ti) 數目為(wei) 68-70，並存在兩(liang) 條帶有末端著絲(si) 粒的大標記染色體(ti) 。

RPMI8226細胞特性特征

• RPMI8226細胞僅(jin) 產(chan) 生和分泌lambda輕鏈、不分泌重鏈；

• RPMI8226細胞不表達表麵和胞漿IgG、IgM

• HLA表達：HLA Aw19, B15, B37, Cw2

• 源自IgG lambda型多發性骨髓瘤患者；表達免疫球蛋白輕鏈基因

• RPMI8226細胞對以下病毒敏感：人脊髓灰質炎病毒1、單純皰疹病毒、痘苗病毒、水皰性口炎病毒；

• 同工酶：G6PD，A
  
  

• 細胞表麵標記：

• 陽性：CD28+, CD38+, CD49e+, CD138+

• 陰性：CD19-, CD20-, CD3-, CD5-, CD10-, CD13-, CD34-, CD80-

RPMI8226細胞參數表

RPMI8226人多發性骨髓瘤外周血B淋巴細胞培養教程

RPMI 8226細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的RPMI 8226細胞，迅速放入37℃水浴鍋中解凍，約1-2分鍾。

• 將解凍後的RPMI 8226細胞懸液小心轉移到裝有9 mL預熱培養(yang) 基的15 mL離心管中。

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 用5 mL新鮮培養(yang) 基輕輕重懸RPMI 8226細胞。

• 將RPMI 8226細胞懸液轉移到25 cm²培養(yang) 瓶中，並置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

RPMI 8226細胞日常維護

• 每日檢查RPMI 8226細胞生長狀況，確保無汙染（例如，細菌、真菌）。

• 每2-3天更換培養(yang) 基：

• 將RPMI 8226細胞懸液以1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，用新鮮預熱的培養(yang) 基重懸RPMI 8226細胞。

• 將RPMI 8226細胞密度調整至2-5 x 10^5 cells/mL。

RPMI 8226細胞傳代

• 當RPMI 8226細胞密度達到8-10 x 10^5 cells/mL時，需進行傳(chuan) 代。

• 將RPMI 8226細胞懸液離心（1000 rpm，5分鍾），棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸RPMI 8226細胞。

• 以1:3或1:4的比例稀釋RPMI 8226細胞，並轉移到新的培養(yang) 瓶中。

• 調整最終RPMI 8226細胞密度至2-5 x 10^5 cells/mL。

RPMI 8226細胞計數和活力檢測

• 取20 μL RPMI 8226細胞懸液，與(yu) 20 μL 0.4%台盼藍混合。

• 將混合液置於(yu) 細胞計數板上，並在顯微鏡下計數。

• 計算RPMI 8226細胞密度和活力：活力 = (活細胞數/總細胞數) x 100%。

RPMI 8226細胞凍存

• 在對數生長期收集RPMI 8226細胞，並離心後棄去上清。

• 用凍存液（90% FBS + 10% DMSO）重懸RPMI 8226細胞，調整密度至5-10 x 10^6 cells/mL。

• 將1 mL RPMI 8226細胞懸液分裝到凍存管中。

• 將凍存管放入程序降溫盒中，置於(yu) -80℃冰箱中過夜。

• 次日將RPMI 8226細胞凍存管轉移到液氮中進行長期保存。

注意事項

• 始終遵循無菌操作規程，以防止RPMI 8226細胞汙染。

• 定期觀察RPMI 8226細胞形態和生長狀態，確保細胞處於(yu) 對數生長期。

• 適當調整RPMI 8226細胞的培養(yang) 條件以適應實驗需求。

• 避免RPMI 8226細胞過度生長或密度過低。

• 定期進行RPMI 8226細胞特性鑒定，如免疫表型分析，確保細胞係的穩定性和純度。