
GM12878細胞(人B淋巴細胞)
- 來源:外周血
- 細胞特征:懸浮生長,淋巴母細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+10% P/S
- 其他:GM12878細胞經EB病毒轉化獲得,能夠持續在體(ti) 外增殖
GM12878細胞係是一株源自一位白人女性(NA12878)外周血的B淋巴細胞係,GM12878細胞經過Epstein-Barr病毒(EBV)的轉化獲得,EB病毒是一種常見的皰疹病毒,能夠誘導B淋巴細胞轉化為(wei) 具有無限增殖能力的細胞,從(cong) 而使其在體(ti) 外維持生長。GM12878細胞表現出典型的淋巴母細胞形態,呈懸浮狀態生長。GM12878細胞常用於(yu) 基因組學、表觀遺傳(chuan) 學和免疫學等領域的研究。
GM12878細胞參數表
細胞名稱 | GM12878細胞(人B淋巴細胞) |
別名 | GM-12878 |
來源 | 一位白人女性的外周血B淋巴細胞 |
轉化方法 | Epstein-Barr病毒(EBV)轉化 |
細胞類型 | 轉化細胞 |
性別/年齡 | 女性 |
組織 | 外周血 |
疾病狀態 | 常態 |
細胞形態特征 | 淋巴母細胞樣,適合懸浮生長 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 青黴素/鏈黴素(P/S) |
培養條件 | 37°C,95%空氣,5%二氧化碳 |
傳代比例 | 1:2 至 1:4 |
生物安全等級 | BSL-1 |
凍存條件 | 60%培養基、30%胎牛血清、10% DMSO,液氮保存 |
保藏機構 | Coriell |
應用領域 | 基因組學、表觀遺傳學、免疫學研究 |
供應限製 | 僅供科研使用 |
內毒素含量 | <10 EU/mL |
細胞特性 | 無菌操作,支原體檢測陰性 |
注意事項 | 使用前需充分預熱,保持無菌操作 |
培養教程
GM12878人B淋巴細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出凍存的GM12878細胞管,迅速置於(yu) 37°C水浴中,輕輕搖晃直至細胞完全融化。
將融化後的GM12878細胞懸液轉移至含有10 mL預熱完全培養(yang) 基(RPMI-1640 + 10%胎牛血清(FBS)+ 1%青黴素/鏈黴素(P/S))的離心管中,混勻。
將混合後的細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO2培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。
細胞傳代
每2-3天觀察GM12878細胞的生長狀態,當細胞達到80%匯合時進行傳(chuan) 代。
吸出培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基,用預溫的PBS輕輕衝(chong) 洗細胞層1-2次。
加入2-3 mL預溫的胰酶-EDTA溶液,在37°C下孵育2-3分鍾,使細胞脫離。
加入5 mL完全培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打以使細胞懸浮。
將細胞懸液轉移至15 mL離心管中,1000 rpm離心5分鍾。
棄去上清,用5 mL完全培養(yang) 基重懸細胞。
按1:2或1:3的比例將細胞接種至新的T25培養(yang) 瓶中。
將新培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
細胞凍存
收集對數生長期的GM12878細胞,離心後棄去上清。
用凍存液(60% RPMI-1640 + 30% FBS + 10%二甲基亞(ya) 碸(DMSO))重懸細胞,調整細胞密度為(wei) 1-2×10^6 cells/mL。
將細胞懸液分裝至凍存管中,置於(yu) -80°C冰箱過夜。
次日,將凍存管轉入液氮罐中保存。
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AMEL X/Y | X |
CSF1PO | 12, 13 |
D13S317 | 11, 12 |
D16S539 | 9, 10 |
D18S51 | 15, 16 |
D19S433 | 14, 15 |
D21S11 | 29, 30 |
D3S1358 | 15, 17 |
D5S818 | 11, 12 |
D7S820 | 8, 9 |
FGA | 22, 23 |
TH01 | 7, 9 |
TPOX | 8, 9 |
VWA | 16, 18 |