IM-9細胞（人外周血B淋巴細胞）

IM-9細胞係源自一名白人女性的外周血，患者患有多發性骨髓瘤。IM9細胞係是通過愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）的感染，使B淋巴細胞發生轉化，賦予了其持續增殖的能力，成為(wei) 永生化的淋巴母細胞樣細胞。
IM9細胞係來源於(yu) 多發性骨髓瘤患者，主要特征是EBV轉化的B淋巴細胞。這一轉化過程保留了供體(ti) 的二倍體(ti) 基因組，細胞遺傳(chuan) 學數據表明其基因組在ATCC的初始種子庫中保持穩定性，文獻中報道了一些細胞係的細胞遺傳(chuan) 不穩定性。
IM-9細胞係廣泛應用於(yu) 免疫學和腫瘤學研究，尤其在B淋巴細胞相關(guan) 疾病、抗體(ti) 生成機製以及免疫反應的研究中。由於(yu) 保留了供體(ti) 的完整基因組，IM9細胞在遺傳(chuan) 研究和疾病易感性分析中具有重要的研究價(jia) 值。

IM-9細胞特性特征

• IM9細胞為(wei) 懸浮生長的淋巴母細胞樣細胞，形態上與(yu) 正常B淋巴細胞相似。

• 抗原表達：CD11a+；CD19+；CD20+；CD38-；CD49e+

• 受體(ti) 表達：生長激素受體(ti) 、胰島素受體(ti) 、降鈣素受體(ti)

• 免疫球蛋白：IM-9細胞能夠產(chan) 生多種免疫球蛋白，尤其是IgG和IgM，這使得它們(men) 在抗體(ti) 研究中具有重要價(jia) 值。

• IM9細胞呈EBNA陽性。
  

• 同工酶特征：ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，2；PGM1，1-2；PGM3，0

IM-9細胞參數表

IM-9人外周血B淋巴細胞培養教程

IM9細胞複蘇

• 解凍細胞：將IM9細胞從(cong) 液氮中取出後，迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍，並輕輕搖動以確保IM9細胞均勻解凍。

• 稀釋DMSO：立即加入4 ml RPMI-1640培養(yang) 基，輕輕混合以稀釋IM9細胞凍存液中的DMSO。

• 離心：在1000 RPM下離心4分鍾，去除上清液，以保留IM9細胞。

• 重懸細胞：用1-2 ml新鮮培養(yang) 基重懸IM9細胞，並將其轉移至T25培養(yang) 瓶中。

• 培養(yang) 環境：將IM9細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃的CO2培養(yang) 箱中，氣相為(wei) 95%空氣和5% CO2，適合IM9細胞的生長條件。

• 細胞觀察：每周定期檢查IM9細胞的形態和生長狀態，及時更換培養(yang) 基以避免汙染。

IM9細胞傳代操作

• 傳(chuan) 代時機：當IM9細胞的密度達到80%-90%時需進行傳(chuan) 代操作。

• 洗滌細胞：棄去舊的培養(yang) 基後，用無鈣、無鎂的PBS緩衝(chong) 液洗滌IM9細胞1-2次。

• 消化細胞：加入0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA混合液，在37℃下消化1-2分鍾，待IM9細胞脫附。

• 終止消化：加入少量培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打以使IM9細胞懸浮。

• 離心與(yu) 重懸：在1000 RPM下離心4分鍾，去除上清液，加入6-8 ml新鮮培養(yang) 基重懸IM9細胞。

• 分瓶培養(yang) ：按1:2的比例將IM9細胞懸液分至新的T25或T75培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

• 建議每周換液2-3次，以保持良好的IM9細胞生長環境。

IM9細胞凍存步驟

• 準備工作：當IM9細胞狀態良好時進行凍存，棄去培養(yang) 基後，用PBS緩衝(chong) 液洗滌細胞。

• 消化與(yu) 終止：輕微消化IM9細胞，加入含血清的培養(yang) 基終止反應。

• 離心重懸：離心後去掉上清液，重懸IM9細胞，並加入DMSO使其終濃度為(wei) 10%。

• 分裝凍存：將IM9細胞懸液分裝至凍存管中，放入-70℃預凍，然後轉移至液氮中（-196℃）保存。