rl95-2細胞（人子宮內(nei) 膜癌細胞）

RL95-2細胞是一種上皮樣人子宮內(nei) 膜癌細胞，來源於(yu) 一名65歲白人女性患者的子宮內(nei) 膜腺癌組織，由DL Way於(yu) 1983年建立。rl95-2細胞常用於(yu) 癌症研究，具有特征性結構，包括α角蛋白、明確的連接複合體(ti) 、張力絲(si) 和表麵微絨毛。rl95-2細胞表達雌激素受體(ti) ，是陽性標記的細胞係。

rl95-2細胞特性特征

• 分子特征：表達α角蛋白；細胞表麵具有微絨毛；具有明確的連接複合體(ti) 和張力絲(si) ；

• 表達特征：雌激素受體(ti) 陽性（estrogen receptor positive）

• 生長特性：貼壁生長；極容易形成細胞團，不易消化成單個(ge) 細胞；貼壁速度較慢；傾(qing) 向於(yu) 團狀生長，不會(hui) 完全覆蓋培養(yang) 皿

rl95-2細胞參數表

rl95-2人子宮內膜癌細胞係培養教程

凍存RL95-2細胞的複蘇

• 在37℃水浴中快速解凍RL95-2細胞凍存管，約1-2分鍾。

• 使用75%酒精消毒管壁後，在無菌操作台內(nei) 操作RL95-2細胞。

• 將RL95-2細胞懸液轉入含有9mL完全培養(yang) 基的15mL離心管，1000rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，用新鮮培養(yang) 基重懸RL95-2細胞，轉移到T25培養(yang) 瓶。

• 將RL95-2細胞置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

RL95-2細胞接收後的處理

• 收到RL95-2細胞的T25瓶後，用75%酒精消毒瓶壁，並放入37℃培養(yang) 箱2-3小時。

• 顯微鏡下檢查RL95-2細胞狀態，確保無汙染且RL95-2細胞狀態良好。

• 如果RL95-2細胞密度低於(yu) 60%，棄去舊培養(yang) 基，加入6-8mL新鮮培養(yang) 基繼續培養(yang) 。

• 當RL95-2細胞密度達70%-80%以上時，可進行傳(chuan) 代。

RL95-2細胞傳代操作

傳代比例：首次傳代比例建議為1:2，即一個T25瓶RL95-2細胞分為兩個T25瓶或兩個6cm培養皿。

• 棄去RL95-2細胞的舊培養(yang) 基，用PBS輕輕衝(chong) 洗細胞。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育2-5分鍾，觀察RL95-2細胞開始脫落。

• 加入完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打RL95-2細胞使其脫離瓶壁。

• 將RL95-2細胞懸液轉移到離心管中，1000rpm離心5分鍾。

• 棄去上清，加入新鮮培養(yang) 基重懸RL95-2細胞，並按1:2比例分裝到新T25瓶中。

• 放入培養(yang) 箱中繼續培養(yang) RL95-2細胞。

RL95-2細胞凍存操作

• 當RL95-2細胞密度達80%-90%時，棄去培養(yang) 基，用PBS衝(chong) 洗。

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化RL95-2細胞，終止消化後離心收集細胞。

• 重懸於(yu) 凍存液（90% FBS + 10% DMSO）中，分裝到RL95-2細胞凍存管。

• 逐步降溫：先放置於(yu) -80℃過夜，然後轉入液氮中長期保存RL95-2細胞。

RL95-2細胞注意事項

• 運輸用培養(yang) 基：運輸過程中使用的RL95-2細胞培養(yang) 基不能再用於(yu) 培養(yang) ，請換用新配製的完全培養(yang) 基。

• 細胞狀態觀察：每次傳(chuan) 代前後都要顯微鏡下觀察RL95-2細胞狀態，確保健康無汙染。

• 貼壁細胞：RL95-2細胞貼壁較慢，消化處理後24小時內(nei) 盡量不要移動培養(yang) 瓶，以免影響貼壁。

• 特殊現象：RL95-2細胞培養(yang) 過程中可能有少量細胞漂浮，屬於(yu) 正常現象。

RL95-2細胞優化措施

• 消化時間控製：嚴(yan) 格控製RL95-2細胞消化時間（2-5分鍾），密切觀察細胞脫落情況，及時終止消化。

• 輕柔操作：消化後使用含血清的培養(yang) 基輕輕吹打RL95-2細胞，避免過度用力。

• 過濾處理：若RL95-2細胞懸液中有明顯細胞團，使用40μm或70μm的細胞篩網過濾。

• 降低接種密度：初次傳(chuan) 代建議1:2比例，避免RL95-2細胞接種密度過高。

• 培養(yang) 基調整：可增加血清濃度至15-20%以促進RL95-2細胞貼壁。

• 靜置培養(yang) ：接種後24小時內(nei) 不要移動培養(yang) 瓶，確保RL95-2細胞充分貼壁。

• 及時換液：首次接種後48-72小時更換培養(yang) 基，以去除未貼壁RL95-2細胞。

• 定期觀察：每日觀察RL95-2細胞生長狀態，及時處理細胞團。

• 提前傳(chuan) 代：當RL95-2細胞密度達70-80%時進行傳(chuan) 代，防止過度生長。