
An3ca細胞(人子宮內(nei) 膜癌細胞)
- 來源:子宮內(nei) 膜癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:雌激素受體(ti) 狀態:雌激素受體(ti) 陰性(ER-)
AN3CA細胞係建立於(yu) 1964年,來源於(yu) 一名55歲女性子宮內(nei) 膜癌患者的淋巴結轉移組織。An3ca細胞係表現出典型的癌細胞特性,能夠在體(ti) 外長期傳(chuan) 代培養(yang) ,並在實驗動物(如裸鼠)中產(chan) 生明顯的腫瘤。AN3CA細胞為(wei) 雌激素受體(ti) 陰性(ER-),在體(ti) 內(nei) 評估時表現出侵襲性致瘤潛力。
An3ca細胞接種實驗動物產(chan) 生明顯腫瘤,但細胞的生物學特性及超微結構尚未深入研究,僅(jin) 發現該細胞係促黑激素合成為(wei) 陰性。
An3ca細胞表現出上皮細胞樣形態,廣泛用於(yu) 研究各種遺傳(chuan) 和環境因素對癌症細胞行為(wei) 的影響。
An3ca細胞特性
AN3 CA細胞源自人類子宮內(nei) 膜腺癌,1964年衍生自淋巴結轉移組織。
An3ca細胞具有癌細胞特性,包括能夠在體(ti) 外長期傳(chuan) 代培養(yang) 及在實驗動物中產(chan) 生明顯腫瘤。
AN3 CA細胞為(wei) 雌激素受體(ti) 陰性(ER-)。
AN3 CA細胞呈現上皮細胞形態,對此研究可以深入理解子宮內(nei) 膜癌的進展機製和開發新型治療策略。
An3ca細胞參數表
細胞名稱 | An3ca細胞(人子宮內膜癌細胞) |
別稱 | AN3_CA, AN3CA, AN3Ca, AN3CA, AN-3, AN3, Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma |
來源 | 子宮內膜癌患者的淋巴結轉移組織 |
建係時間 | 1964年 |
種屬 | 人 |
性別年齡 | 女性55歲 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
雌激素受體狀態 | 雌激素受體陰性(ER-) |
促黑激素合成 | 陰性 |
致瘤性 | 在裸鼠和皮質酮處理的倉鼠頰囊中有致瘤性 |
倍增時間 | 約55小時 |
培養基 | MEM (Minimal Essential Medium)+10% 南美級別胎牛血清+1X 非必需氨基酸 |
氣相 | 95% 空氣 + 5% CO2; 37°C;飽和濕度 |
傳代比例 | 1:3(培養麵積比),或 1:2-1:4 |
傳代方式 | 消化2-3分鍾 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
凍存液配方 | MEM + 10% FBS + 1X 非必需氨基酸 + 10% DMSO 或 60% 基礎培養(yang) 基 + 30% FBS + 10% DMSO |
汙染檢測 | 支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 |
生物安全等級 | 1級 |
備注 | AN3CA細胞表現出上皮細胞樣形態,並在接種實驗動物後能產(chan) 生明顯腫瘤 。雖然其生物學特性及超微結構尚未深入研究,但已知其促黑激素合成陰性。 |
培養教程
AN3CA細胞複蘇步驟
將含有1mL AN3CA細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。
加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。
在1000RPM條件下離心3-5分鍾,棄去上清液,完全培養(yang) 基重懸AN3CA細胞。
將細胞懸液加入含6-8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶(或皿)中37℃培養(yang) 過夜。
第二天顯微鏡下觀察AN3CA細胞生長情況和細胞密度。
AN3CA細胞傳代步驟
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗AN3CA細胞1-2次。
加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4mL含10%FBS的培養(yang) 基來終止消化。
輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心3-5分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
將AN3CA細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8mL完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力,後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
AN3CA細胞凍存步驟
收集AN3CA細胞及細胞培養(yang) 液,裝入無菌離心管中,1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
根據AN3CA細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度為(wei) 5×10^6~1×10^7/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
將凍存管放入-80℃冰箱,24小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,14 (DSMZ=ACC-267) |
12,14,15 (ATCC=HTB-111; CLS=300119; Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200; PubMed=25877200) | |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,14 |
D7S820 | 7,7.1,10 (ATCC=HTB-111; PubMed=25877200) |
7,10 (CLS=300119; Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200) | |
7.1,10 (DSMZ=ACC-267) | |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12,14 |
D16S539 | 10,14 (ATCC=HTB-111; CLS=300119; DSMZ=ACC-267; PubMed=25877200) |
10,14,15 (Cosmic-CLP=910781; IZSLER=BS TCL 200) | |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 23 |
Penta D | 9,11 |
Penta E | 9,16 |
TH01 | 9.3,10 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 14,20 |
參考文獻
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