
HEEpiC-SV40細胞(人子宮內(nei) 膜上皮細胞永生化)
- 來源:子宮內(nei) 膜
- 細胞特征:貼壁生長 ,上皮細胞;SV40永生
- 培養(yang) 基:HEEpiC-SV40細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:HEEpiC-SV40細胞通過轉染SV40大T抗原基因進行永生化處理,使其能夠在體(ti) 外無限增殖
HEEpiC-SV40細胞係是從(cong) 人類子宮內(nei) 膜上皮細胞中衍生的永生化細胞係,經過SV40病毒轉染處理,能夠在體(ti) 外穩定傳(chuan) 代至少20代以上。子宮內(nei) 膜是子宮的內(nei) 層,主要負責月經周期的調節和妊娠的支持。盡管經過永生化處理,HEEpiC-SV40細胞仍保留了原始子宮內(nei) 膜上皮細胞的多項生物學特性,包括其形態和某些功能標誌。HEEpiC-SV40細胞係廣泛應用於(yu) 婦科和生殖生物學的研究,為(wei) 相關(guan) 領域的科學研究提供了寶貴的模型係統。
HEEpiC-SV40細胞特性特征
HEEpiC-SV40細胞與(yu) kaiyun网站安全比較,基因表達基本不發生變化
HEEpiC-SV40細胞通過慢病毒轉染SV40大T抗原基因實現永生化
SV40大T抗原可以抑製細胞周期調控蛋白(如p53和Rb),使細胞逃避正常的衰老機製
HEEpiC-SV40細胞用於(yu) 研究子宮內(nei) 膜的生理和病理變化,尤其是在月經周期、妊娠及相關(guan) 疾病(如子宮內(nei) 膜異位症)的研究中
HEEpiC細胞SV40永生化參數表
細胞名稱 | HEEpiC-SV40細胞(人子宮內膜上皮細胞永生化) |
細胞別稱 | HEEpiC+SV40; HEEpiC(SV40) |
細胞來源 | 人類子宮內膜上皮細胞 |
永生化方法 | SV40大T抗原轉染 |
細胞形態 | 上皮樣,貼壁生長 |
傳代能力 | 穩定傳代20代以上 |
純度 | 細胞角蛋白(PCK)陽性,純度高於90% |
培養基 | RPMI 1640或低糖DMEM,含20%胎牛血清和5-10 nmol/L胰島素 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
每周換液 | 2-3次 |
傳代比例 | 1:2至1:3 |
匯合率 | 80%-90%時進行傳代 |
SV40大T抗原 | 通過轉染SV40大T抗原基因實現永生化 |
細胞周期調控 | SV40大T抗原抑製p53和Rb蛋白,逃避正常衰老機製 |
基因表達 | 與kaiyun网站安全相比,基因表達基本不發生變化 |
基因組穩定性 | 在傳代過程中保持基因組的相對穩定性 |
轉基因表達 | SV40大T抗原的表達可通過qRT-PCR和免疫染色驗證 |
細胞生長特性 | 貼壁生長,適合長期培養 |
細胞觀察 | 定期觀察細胞形態和生長狀態 |
凍存條件 | 使用含10% DMSO的凍存液,在-80℃或液氮中保存 |
應用領域 | 用於研究子宮內膜的生理和病理變化,藥物篩選等 |
培養教程
HEEpiC-SV40人子宮內膜上皮細胞永生化培養教程
細胞培養步驟
從(cong) 冷凍保存中取出HEEpiC細胞,迅速解凍並輕輕混勻。
將解凍的HEEpiC細胞接種到T-25或T-75培養(yang) 瓶中,通常接種1-2 x 10^5個(ge) 細胞。
每周更換培養(yang) 液2-3次,輕輕吸去舊培養(yang) 液,並加入新鮮的培養(yang) 基,以維持HEEpiC細胞的健康生長。
定期觀察HEEpiC細胞的形態,確保細胞呈上皮樣形態並貼壁生長。細胞應處於(yu) 對數生長期,匯合率應維持在75%-85%。
傳代方法
當HEEpiC細胞匯合率達到80%-90%時,準備進行傳(chuan) 代。使用顯微鏡檢查細胞形態是否正常。
用PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)輕輕洗滌HEEpiC細胞,去除舊培養(yang) 基。
使用0.25%胰蛋白酶消化細胞,消化時間一般為(wei) 2-5分鍾,直至細胞從(cong) 瓶底脫落。
加入培養(yang) 基以終止消化反應。
細胞收集
收集HEEpiC細胞懸液,輕輕混勻。
按照1:2至1:3的傳(chuan) 代比例,將HEEpiC細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中。
培養後處理
將培養(yang) 瓶放回37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
注意事項
無菌操作: 確保整個(ge) 操作過程在無菌環境中進行,以避免HEEpiC細胞汙染。
細胞凍存: 達到適當生長狀態的HEEpiC細胞可以進行凍存,以備未來實驗使用。
定期檢測: 定期檢查HEEpiC細胞的形態和生長狀態,確保細胞健康。