
KLE細胞係(人子宮內(nei) 膜癌細胞係)
- 來源:子宮;子宮內(nei) 膜
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表達:O型血;Rh+
KLE人子宮內(nei) 膜癌細胞係是從(cong) 一名64歲白人女性的子宮內(nei) 膜腺癌組織中分離,最早由G·R·Richardson於(yu) 1984年建立。KLE細胞係表現為(wei) 上皮樣形態,具有貼壁生長的特性,並且在染色體(ti) 數目上表現出非整倍體(ti) 的特征,染色體(ti) 數量範圍在51到66之間。
KLE細胞特性特征
微絨毛:在電子顯微鏡下觀察,KLE細胞表麵具有微絨毛,顯示出與(yu) 正常子宮內(nei) 膜相似的結構。
致瘤性:在裸鼠中接種107個(ge) 細胞後,腫瘤在21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)發展,顯示出強烈的致瘤能力。
細胞間連接:腫瘤細胞間緊密相連,形成特定的連接複合體(ti) ,類似於(yu) 孕激素刺激下的正常子宮內(nei) 膜。腫瘤不形成腺體(ti) 。
血型:KLE細胞表達O型血抗原,Rh+,這可能影響其在體(ti) 內(nei) 的免疫反應
KLE細胞參數表
細胞名稱 | KLE細胞係(人子宮內膜癌細胞係) |
細胞類型 | 人子宮內膜癌細胞 |
組織來源 | 子宮內膜 |
患者信息 | 64歲白人女性 |
細胞形態 | 貼壁生長;上皮細胞樣 |
染色體特征 | 非整倍體,染色體數量範圍51-66 |
致瘤性 | 在裸鼠中接種107個細胞後,腫瘤在21天內100%發展 |
抗原表達 | O型血,Rh+ |
培養基 | DMEM/F12 + 10% FBS + 1% P/S |
培養氣相 | 95%空氣 + 5% CO2;37°C |
傳代比例 | 1:2 到 1:5 |
細胞密度 | 約5×10^5 cells/mL |
支原體檢測 | 陰性 |
內毒素含量 | ≤3 EU/mL |
儲存條件 | 液氮或-80°C冰箱 |
複蘇後存活率 | 良好 |
細胞生長狀態 | 良好,形態正常 |
凍存方式 | 液氮凍存 |
質量保證 | 細胞株來源於ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,保證5代以內 |
培養教程
KLE人子宮內膜癌細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存的KLE細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍,時間控製在1-2分鍾內(nei) 。
解凍後,立即將KLE細胞轉移至含有10% FBS的DMEM/F12培養(yang) 基中,輕輕混勻以避免KLE細胞損傷(shang) 。
將KLE細胞懸液離心(1000 rpm,5分鍾),去除上清液。
細胞接種
將KLE細胞重懸於(yu) 適量的新鮮培養(yang) 基中(如5-10 mL),然後轉移至已準備好的細胞培養(yang) 瓶中。
輕輕搖晃培養(yang) 瓶,使KLE細胞均勻分布在瓶底。
培養監測
每天檢查KLE細胞的生長情況,特別注意是否存在汙染。
KLE細胞通常在2-3天內(nei) 貼壁並開始增殖,確保培養(yang) 條件穩定。
細胞傳代
當KLE細胞達到70%-80%匯合度時,開始傳(chuan) 代操作。
去除培養(yang) 基,用無菌PBS緩衝(chong) 液洗滌KLE細胞,清除殘餘(yu) 的培養(yang) 基。
加入適量的胰酶溶液(1-2 mL),確保KLE細胞完全浸泡,輕輕搖晃。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中,觀察KLE細胞是否脫落,通常需要1-5分鍾。
KLE細胞脫落後,加入新鮮培養(yang) 基中和胰酶,終止胰酶反應,輕輕吹打KLE細胞懸液。
KLE細胞懸液離心(1000 rpm,5分鍾),去除上清液,將KLE細胞重懸於(yu) 新鮮培養(yang) 基中,接種至新的培養(yang) 瓶中。
細胞儲存
若需長期保存KLE細胞,使用含10% DMSO的凍存培養(yang) 基,將KLE細胞分裝於(yu) 凍存管中。
將凍存管放入-80°C冰箱中保存,或逐步冷卻至液氮中以長期保存KLE細胞。
注意事項
無菌操作:在整個(ge) KLE細胞培養(yang) 過程中,嚴(yan) 格保持無菌操作,防止汙染。
培養(yang) 基更換:每2-3天更換培養(yang) 基,保持KLE細胞的最佳生長環境。
細胞密度管理:避免KLE細胞過度生長,定期傳(chuan) 代以維持KLE細胞的活力。
運輸條件:KLE細胞運輸時需冷藏於(yu) 2℃-8℃,使用幹冰或冰袋確保溫度控製。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 13,14 |
D2S1338 | 18,19 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 9,12 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 8,14 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 13,17 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 23,25 |
Penta D | 13 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |