
ms751細胞係(人子宮頸表皮癌細胞係)
- 來源:子宮頸;宮頸表皮樣癌淋巴結轉移灶
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:HPV-45的E6/E7區域序列以poly(A)+RNA的形式表達
MS751細胞係是從(cong) 一名47歲白人女性的子宮頸表皮樣癌淋巴結轉移灶中分離。ms751細胞係顯示出典型的上皮細胞形態,表現出貼壁生長的特征。
ms751細胞核型為(wei) 近二倍體(ti) ,主要染色體(ti) 數範圍在38到41之間,核型號為(wei) 39。在染色體(ti) 分析中,發現了多種變異,包括del(2)(q34)、del(8)(p21)、14p+、der(X)t(X;14)(q28;q13)、t(3q8q)等結構異常,這些異常可能會(hui) 隨細胞傳(chuan) 代而有所變化。
ms751細胞係分子特征、表達特征、基因特征等
ms751細胞含有人乳頭狀瘤病毒18 (HPV-18) 序列、包含部分來源於(yu) HPV-45基因組的E6/E7區域序列
ms751細胞表達AB型血和Rh+抗原
HPV-45的E6/E7區域序列以poly(A)+RNA的形式表達
ms751細胞可能存在與(yu) HPV-18和HPV-45相關(guan) 的基因整合或表達
ms751細胞具有致瘤性,在裸鼠中可形成分化不良的表皮樣癌(III級)
同工酶譜:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,1-2;Me-2,1;PGM1, 1-2;PGM3,1-2
ms751細胞係參數表
細胞名稱 | ms751細胞係(人子宮頸表皮癌細胞係) |
別稱 | MS-751; MS 751 |
細胞類型/來源 | 人宮頸表皮癌細胞係,宮頸表皮樣癌淋巴結轉移灶 |
患者信息 | 47歲白人女性 |
建立信息 | 1974年由J. Sykes建立 |
細胞庫編號 | ATCC® CRL-2267™ |
細胞形態/生長特性 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
細胞大小/倍增時間 | 約15-20μm / 約30-36小時(待確認) |
HPV檢測 | HPV-18陽性; HPV-45部分E6/E7區域序列存在 |
基因表達 | HPV-45 E6/E7以poly(A)+RNA形式表達; p53低表達; pRB正常表達 |
蛋白表達 | 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性; E-cadherin, Vimentin |
血型/Rh因子 | AB型 / Rh陽性 (Rh+) |
同工酶譜 | AK-1, ES-D, G6PD, GLO-I, Me-2, PGM1, PGM3 |
裸鼠模型 | 可形成分化不良的表皮樣癌(III級),成瘤時間約2-3周(待確認) |
培養基/添加劑 | MEM + 10% FBS + 1% GlutaMAX-1 + 1% MEM NEAA + P/S |
培養環境 | 37°C, 5% CO2, 飽和濕度 |
培養容器/貼壁效率 | T25, T75, 100mm培養皿 / 約70-80%(待確認) |
傳代比例/周期 | 首次1:2, 常規1:3到1:6 / 3-4天 |
最佳傳代密度/胰酶消化 | 70-80%匯合度 / 5-8分鍾(0.25% 胰蛋白酶-EDTA) |
凍存液/溫度 | 90% 培養基 + 10% DMSO / 液氮氣相 |
生物安全等級 | BSL-2 |
汙染檢測 | 支原體陰性; 無細菌真菌汙染; 無其他人源細胞汙染 |
細胞活力/純度 | ≥85% / ≥98% |
主要用途 | 宮頸癌研究, HPV相關研究, 藥物篩選 |
特殊應用 | 病毒-宿主相互作用研究, 癌症免疫治療研究(待開發) |
培養教程
ms751人子宮頸表皮癌細胞係培養教程
MS751細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存細胞,迅速放入37°C水浴中解凍。
解凍後將MS751細胞懸液轉移到預熱的培養(yang) 基中,經過離心去除上清,然後用新鮮培養(yang) 基重懸細胞,轉移到培養(yang) 瓶中。
MS751常規傳代
當MS751細胞密度達到70-80%時,用PBS洗滌細胞,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化。
在37°C孵育5-8分鍾後,加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基終止消化,離心收集細胞,用新鮮培養(yang) 基重懸細胞,按1:3到1:6的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
MS751細胞凍存
製備MS751細胞凍存液:90%培養(yang) 基 + 10% DMSO。
收集對數生長期的MS751細胞,調整密度至1-2 x 10^6 cells/mL,分裝到凍存管中。
使用程序降溫盒緩慢降溫至-80°C,24小時後轉移到液氮中長期保存。
常見錯誤與成功關鍵步驟
MS751細胞常見錯誤:
培養(yang) 基配製不當,如血清濃度錯誤。
細胞密度控製不當,過密或過稀影響生長。
無菌操作不足,導致汙染風險增加。
MS751細胞成功關(guan) 鍵步驟:
使用正確的培養(yang) 基配方和培養(yang) 條件。
定期檢查細胞形態和生長狀態。
嚴(yan) 格執行無菌操作,保持培養(yang) 環境清潔。
MS751細胞計數方法與細胞密度設置
MS751細胞計數方法: 使用血球計數板在顯微鏡下計數,計算公式為(wei) 細胞濃度 = 計數細胞數 x 稀釋倍數 x 10^4 / 計數格數。
MS751細胞接種密度: 建議為(wei) 1-2 x 10^4 cells/cm²。
MS751細胞傳(chuan) 代密度: 當細胞匯合度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 (CCRID; PubMed=25877200) |
11,12 (ATCC=HTB-34; Cosmic-CLP=1240179; DepMap=ACH-001360; PubMed=29156801) | |
D2S1338 | 22 |
D3S1358 | 19 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 14 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 16 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 20 |
Penta D | 9 |
Penta E | 12 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8 |
vWA | 16 |
參考文獻
- 《中國解剖學會2011年年會論文文摘匯編》 2011年
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