HT3細胞係（人子宮頸癌細胞係）

HT-3細胞是一種上皮樣細胞，是從(cong) 一名58歲的白人女性宮頸癌患者的淋巴結中分離。

HT-3細胞屬於(yu) 亞(ya) 三倍體(ti) 至超三倍體(ti) 範圍（+A，+B，+C，+D，+F，-E），其模態數在65至66之間。HT3細胞係中存在雙心核、端心核碎片、分鍾、易位、環、二次收縮、斷裂、粉碎以及大的近心核和大的近中心核標記等異常結構。

HT3細胞係特性

• HT-3 細胞HT-3細胞是上皮樣細胞，可用於(yu) 癌症研究
  

• HT-3 細胞的超微結構特點包括大量微絨毛、突出的核仁、稀疏的粗麵內(nei) 質網（RER）以及發育良好的高爾基體(ti)

• HT-3 細胞表達視網膜母細胞瘤蛋白（pRB），但大小異常；P53 表達升高，存在密碼子245處的點突變（Gly -> Val）

• HT-3 細胞檢測：人乳頭瘤病毒 DNA 和 RNA 均為(wei) 陰性、未觀察到病毒顆粒

• HT-3 細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成低分化表皮樣癌（III級）、在類固醇治療的倉(cang) 鼠中也能形成腫瘤

• 腫瘤基因：p53+，pRB+
  

• 基因表達：血型A，Rh+

• 同工酶包括 AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1

• HT-3 細胞在1965年發現並消除了支原體(ti) 汙染

HT3細胞係參數表

HT3人子宮頸癌細胞係培養教程

培養前準備

• 用75%酒精噴灑整個(ge) HT-3 細胞培養(yang) 瓶消毒

• 將HT-3 細胞培養(yang) 瓶平躺置於(yu) 培養(yang) 箱中進行1-3小時的緩衝(chong)

• 置於(yu) 無菌操作台，打開HT-3 細胞培養(yang) 瓶瓶口，將其中的培養(yang) 液去掉

• 加入5-6mL新鮮培養(yang) 基（以T25培養(yang) 瓶為(wei) 例），置於(yu) 細胞培養(yang) 箱中培養(yang)

• 根據HT-3 細胞生長狀況及培養(yang) 基顏色變化進行換液及傳(chuan) 代，一般2到3天換一次液

HT-3細胞傳代

• 當HT-3 細胞長滿瓶底麵積80%-90%時，進行傳(chuan) 代。傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3到1:8。

• 將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置於(yu) 37℃預熱

• 倒掉HT-3 細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，加入3-5 ml PBS，輕晃洗滌後棄去

• 加入1-2 ml預熱好的胰酶，置於(yu) 37℃孵育消化

• 顯微鏡下觀察消化情況，HT-3 細胞觸角回收變圓且輕拍瓶壁見HT-3 細胞脫落為(wei) 最佳消化時間，記錄最佳消化時間以便下次消化

• 消化好後加入3ml完全培養(yang) 基終止消化

• 用移液槍輕輕吹打瓶壁上的HT-3 細胞，使之完全脫落，收集HT-3 細胞懸液

• 1200rpm離心3分鍾，棄上清，加入完全培養(yang) 基重懸HT-3 細胞，進行傳(chuan) 代

HT-3細胞凍存細胞的複蘇

• 將含有1mL HT-3 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍

• 加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻

• 在1000RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液，用完全培養(yang) 基重懸HT-3 細胞

• 將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中，37℃培養(yang) 過夜

• 第二天顯微鏡下觀察HT-3 細胞生長情況和細胞密度