小鼠心肌細胞（kaiyun网站安全）

原代小鼠心肌細胞是從(cong) 實驗小鼠（如C57BL/6J品係）心髒組織中分離獲得的一類細胞，廣泛應用於(yu) 心血管疾病研究及基礎生物醫學領域。

小鼠心肌細胞通常來源於(yu) 左心室，通過膠原酶和Dispase聯合酶解技術在無菌條件下分離，能夠保持來源組織的生物學特性，包括節律性搏動和特定的電生理活動。分離出的心肌細胞形態多樣，呈梭形、多邊形或菱形，在貼壁培養(yang) 2小時後逐漸附著，並在培養(yang) 12小時後開始伸出偽(wei) 足，48小時後部分細胞呈掌狀並出現節律性搏動。作為(wei) 終末分化細胞，心肌細胞在體(ti) 外不增殖，但其結構和功能特性得以維持，實驗操作簡便且重複性好，小鼠心肌細胞適用於(yu) 心肌肥厚、信號通路、缺血預處理等基礎研究，以及生物力學分析、藥物篩選、安全性評價(jia) 等應用。

小鼠心肌細胞特性特征

• 小鼠心肌細胞在體(ti) 外不具備增殖能力，屬於(yu) 終末分化細胞，但能夠維持其生理功能。

• 心肌細胞具有獨特的電生理活動，包括動作電位的產(chan) 生和傳(chuan) 導，這對於(yu) 心髒的正常功能至關(guan) 重要。
  

• 原代小鼠心肌細胞表達多種與(yu) 心髒發育和功能相關(guan) 的基因，如肌動蛋白（Actin）、**肌球蛋白（Myosin）**等。
  

• 小鼠心肌細胞還表達一些關(guan) 鍵的轉錄因子，如GATA4和NKX2-5，它們(men) 在心髒發育和功能維持中起著重要作用。

• 心肌細胞常見的標誌物包括心肌特異性蛋白（如Troponin T、α-Actinin）。
  

• 信號通路：心肌細胞在響應不同刺激時涉及多個(ge) 信號通路，包括TGF-β信號通路、Wnt/β-catenin信號通路等，這些通路在心髒病理狀態下尤為(wei) 重要

小鼠心肌細胞參數表

小鼠心肌細胞原代培養教程

小鼠心肌細胞複蘇

• 解凍細胞：將裝有小鼠心肌細胞的凍存管迅速置於(yu) 37°C水浴中，輕輕搖晃使細胞完全融化（通常1-2分鍾內(nei) 完成）。

• 稀釋細胞：解凍後的小鼠心肌細胞懸液轉移至離心管，加入4-6 mL完全培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 離心：以1000 rpm離心3-5分鍾，去除上清液。

• 重懸細胞：用完全培養(yang) 基重懸小鼠心肌細胞，使細胞分散均勻。

• 接種：將細胞懸液移至T25培養(yang) 瓶，加入6-8 mL完全培養(yang) 基，置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 觀察：次日使用顯微鏡檢查小鼠心肌細胞貼壁情況，換新鮮培養(yang) 基以去除非貼壁細胞。

小鼠心肌細胞傳代

• 洗滌：棄去舊培養(yang) 基，用PBS清洗小鼠心肌細胞1-2次以去除殘留物和死細胞。

• 消化：加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液（T25瓶約1-2 mL），置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察小鼠心肌細胞狀態，細胞變圓脫落時及時終止消化。

• 終止消化：加入3-4 mL完全培養(yang) 基終止酶作用，輕輕吹打使細胞完全脫離。

• 離心：以1000 rpm離心3-5分鍾，棄上清液。

• 重懸和接種：用新鮮培養(yang) 基重懸小鼠心肌細胞，按照1:2或1:5比例接種到新的培養(yang) 瓶，加入適量完全培養(yang) 基繼續培養(yang) 。

小鼠心肌細胞凍存

• 細胞收集：按照傳(chuan) 代步驟收集消化後的小鼠心肌細胞，用血球計數板計數細胞數，凍存密度建議為(wei) 1×10⁶至1×10⁷個(ge) 活細胞/mL。

• 離心和重懸：以1000 rpm離心3-5分鍾，去除上清，用凍存液重懸小鼠心肌細胞。

• 分裝與(yu) 標記：將小鼠心肌細胞懸液分裝至凍存管，標注細胞名稱、代數及凍存日期。

• 降溫：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，以-1°C/min速率降至-80°C，然後轉入液氮中長期保存。

• 位置記錄：記錄凍存管在液氮容器中的位置，以便後續使用。