HL-1細胞係（小鼠心肌細胞係）

HL-1細胞係來源於(yu) 成年雌性C57BL/6J小鼠的AT-1皮下腫瘤，該腫瘤由轉基因小鼠產(chan) 生，心房利鈉因子(ANF)啟動子驅動SV40大T抗原的表達。HL-1細胞是唯一能夠維持心肌細胞表型的永生化小鼠心肌細胞係，具備持續分裂和自發收縮的能力，同時保持細胞形態、生化特性及電生理特征。盡管經過多次傳(chuan) 代，HL-1細胞仍能保留其分化的心肌細胞表型。HL-1細胞係廣泛應用於(yu) 研究正常心肌細胞的信號傳(chuan) 導、細胞電化學、代謝過程以及轉錄調節功能，並在研究缺氧、高血糖-高胰島素血症、細胞凋亡和缺血再灌注損傷(shang) 等病理條件下的心髒功能中發揮了重要作用。HL-1細胞長期保留其心肌特性，使其成為(wei) 探索心髒功能與(yu) 病理機製的理想模型。

HL-1細胞係特性特征

• 永生化：HL-1細胞係是一種永生化的小鼠心肌細胞係，能夠持續分裂和自發收縮。

• 分化特征：HL-1細胞在培養(yang) 過程中能夠保持心髒表型，包括形態學、生化和電生理特性。

• 基因表達：HL-1細胞表達心髒特異性基因，如心房利鈉因子(ANF)，以及與(yu) 心髒功能相關(guan) 的其他基因。
  

• 轉基因特性：由於(yu) 其來源於(yu) 轉基因小鼠，HL-1細胞中SV40大t抗原的表達使其具備了永生化的能力。

• 心髒標誌物：HL-1細胞表達多種心髒特異性蛋白，例如肌動蛋白、心肌肌鈣蛋白等，這些蛋白質在心髒收縮和電生理活動中起重要作用。
  

HL-1細胞係參數表

HL-1小鼠心肌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 將含有1 mL HL1細胞懸液的凍存管從(cong) 液氮中取出後，迅速置於(yu) 37°C的水浴中，輕輕搖動，使HL1細胞迅速解凍。

• 解凍後，立即將HL1細胞懸液轉移到含有4 mL預溫至37°C的培養(yang) 基的無菌離心管中，輕輕混合均勻。

• 在1000 rpm條件下離心3分鍾，棄去上清液，用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸HL1細胞。

• 將HL1細胞懸液轉移至含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，並置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

• 第二天，檢查HL1細胞狀態並更換新鮮培養(yang) 基，以確保HL1細胞處於(yu) 良好生長狀態。

細胞傳代

• 當HL1細胞覆蓋麵積達到80%-90%時，準備進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 小心棄去培養(yang) 瓶中的培養(yang) 上清液，用無鈣、鎂離子的PBS緩衝(chong) 液清洗HL1細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基成分。

• 向培養(yang) 瓶中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA消化液，並將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中，消化1-3分鍾。

• 在顯微鏡下觀察HL1細胞的消化狀態，待大部分HL1細胞變圓且開始脫落時，迅速將培養(yang) 瓶取出。輕輕敲擊培養(yang) 瓶幾下，加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化反應。

• 將HL1細胞懸液輕輕混勻後，轉移至無菌離心管中，在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清液。

• 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸HL1細胞，並按1:2的比例將HL1細胞分裝到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，加入8 mL培養(yang) 基後，將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 收集HL1細胞和培養(yang) 液，轉移至無菌離心管中，以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 用PBS緩衝(chong) 液清洗HL1細胞一次，隨後棄去PBS，進行細胞計數。

• 根據HL1細胞數量，加入無血清的細胞凍存液，使HL1細胞密度達到5×10⁶~1×10⁷/mL，輕輕混勻。

• 將1 mL HL1細胞懸液分裝至已標識好的凍存管中。

• 將凍存管置於(yu) -80°C冰箱中進行初步冷凍，24小時後轉移至液氮罐中長期保存，並記錄凍存管的位置以便日後取用。