cal27細胞（人舌鱗癌細胞）

CAL27細胞是由J·Gioanni於(yu) 1982年從(cong) 一名56歲的白人男性舌頭中部的病變部位建立的上皮細胞係。
CAL27細胞為(wei) 多角形，胞漿呈高度顆粒狀，模態數為(wei) 43，非整倍體(ti) 。CAL 27細胞表現出明顯的致瘤性，在裸鼠皮下接種後能夠在6周內(nei) 形成實體(ti) 瘤。CAL27細胞對角蛋白抗體(ti) 呈強陽性染色。

CAL27細胞在半固態培養(yang) 基中生長不良。對於(yu) 化療藥物如VP16、CCNU、VM26、ADM、CPA和MTX的作用下，CAL 27細胞的胸苷摻入顯著受抑製，表現出耐藥性對於(yu) VDS、CDP和ACTD。

1993年，提交給ATCC的CAL 27培養(yang) 物被發現受到支原體(ti) 汙染，後經過BM細胞周期蛋白治療21天，細胞得以恢複正常。

cal27細胞特性

• cal27細胞從(cong) 一名56歲的白人男性舌頭中部的病變部位建立。

• cal27細胞為(wei) 上皮細胞，多角形，胞漿高度顆粒狀。

• cal27細胞的模態數為(wei) 43，為(wei) 非整倍體(ti) 。

• cal27細胞具有致瘤性，裸鼠皮下接種2 x 10^6個(ge) 細胞後在6周內(nei) 形成實體(ti) 瘤。

• 免疫細胞化學研究顯示CAL 27細胞對角蛋白抗體(ti) 呈強陽性染色。

• cal27細胞在半固態培養(yang) 基中生長不良。

• cal27細胞對VP16（依托泊苷）、CCNU（1-[2-氯乙基]-3-環己基-1-硝基脲）、VM26（替尼泊苷）、ADM（阿黴素）、CPA（環磷酰胺）和MTX（甲氨蝶呤）存在下，觀察到胸苷摻入的顯著抑製。

• cal27細胞對VDS（硫酸vindesine sulfate）、CDP（順式鉑）或ACTD（放線菌素D）處理具有抗性。

• 1993年提交給ATCC的CAL 27培養(yang) 物被發現受到支原體(ti) 汙染，後通過21天的BM細胞周期蛋白治療恢複正常。

cal27細胞參數表

cal27人舌鱗癌細胞培養

CAL 27 細胞傳代步驟

• 當CAL 27細胞密度達到80%-90%時，可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。具體(ti) 步驟如下：

• 棄去上清：棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗CAL 27細胞1-2次。

• 消化：加入1ml胰酶（消化液）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化2-4分鍾，顯微鏡下觀察消化情況，CAL 27細胞大部分變圓並脫落時，迅速取出培養(yang) 瓶，輕敲幾下後加入胰酶3倍體(ti) 積的培養(yang) 基終止消化。

• 離心：用巴氏管輕輕打勻後吸出，1000RPM條件下離心5分鍾，棄去上清液。

• 重懸：加入適量培養(yang) 液後吹勻CAL 27細胞。

• 分瓶：首次傳(chuan) 代時推薦將CAL 27細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中，建議凍存一支備用。後續傳(chuan) 代可根據實際情況按1:2至1:4的比例進行。

CAL 27 細胞凍存步驟

• 消化與(yu) 計數：CAL 27細胞凍存時，棄去培養(yang) 基，用PBS清洗一遍後加入1ml胰酶，細胞變圓脫落後，加入3ml含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。

• 離心與(yu) 重懸：5分鍾1000RPM離心去掉上清。加入1ml血清重懸CAL 27細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x10^6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

• 凍存：將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80℃冰箱，至少2小時後轉入液氮罐儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項

• 形態與(yu) 生長特性：CAL 27細胞呈上皮細胞樣，貼壁生長，常用於(yu) 口腔鱗狀細胞癌相關(guan) 研究。

• 推薦培養(yang) 條件：使用DMEM培養(yang) 基，添加10%胎牛血清，在37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) CAL 27細胞。

• 傳(chuan) 代與(yu) 倍增：CAL 27細胞倍增時間約為(wei) 35小時，傳(chuan) 代周期為(wei) 2-4天，按1:2至1:4的比例進行傳(chuan) 代。