原代小鼠肝動脈平滑肌細胞

原代小鼠肝動脈平滑肌細胞（Mouse Primary Hepatic Arterial Smooth Muscle Cells, SMCs）是血管生理學和病理學研究中的重要工具，廣泛應用於(yu) 探索血管疾病機製和心血管係統功能。

小鼠肝動脈平滑肌細胞來源於(yu) 實驗室小鼠（如C57BL/6或BALB/c）的肝動脈組織，通過酶消化技術分離獲取。肝動脈的解剖結構具有顯著變異性，胚胎期供血來源於(yu) 胃左動脈、腹腔動脈及腸係膜上動脈，出生後通常保留腹腔動脈為(wei) 主供血動脈，但在個(ge) 別情況下可見副肝動脈或替代肝動脈。原代肝動脈平滑肌細胞在培養(yang) 初期即可貼壁伸展，呈現梭形、不規則形或扇形等多種形態；培養(yang) 至兩(liang) 周後，細胞增殖匯合，形態多為(wei) 長梭形，具分枝狀突起，呈平行單層或局部多層排列，高密度時則形成柵欄狀或旋渦狀。傳(chuan) 代後細胞保持良好的增殖能力和形態特征，4-6天即可匯合。這些細胞是血管壁的重要結構成分，在血流動力學調節和血管重塑中起關(guan) 鍵作用，能夠表達ICAM-1和VCAM-1等黏附分子，促進血管壁炎症反應，與(yu) 血管疾病的發生、發展及穩定性密切相關(guan) 。

小鼠肝動脈平滑肌細胞特性特征

• 生物標誌物表達：α-SMA（平滑肌肌動蛋白）、ICAM-1和VCAM-1；

• 基因表達：平滑肌細胞能表達多種與(yu) 收縮功能和細胞遷移相關(guan) 的基因，這些基因在血管重塑和病理狀態下可能發生調控
  

小鼠肝動脈平滑肌細胞參數表

原代小鼠肝動脈平滑肌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出裝有肝動脈平滑肌細胞的凍存管，佩戴防護手套，注意避免凍傷(shang) 。
  

• 準備37°C水浴鍋。

• 將凍存管的下半部分置於(yu) 37°C水浴中，快速振動凍存管，直到僅(jin) 剩一小塊冰芯（約需1分鍾）。
  

• 用消毒液擦拭凍存管外表麵，保持無菌操作環境。

• 緩慢將解凍後的肝動脈平滑肌細胞懸液加入盛有5ml預熱完全培養(yang) 基的離心管中，混勻。
  

• 室溫下以800轉/分離心5分鍾，棄去上清液。

• 加入10ml完全培養(yang) 基輕輕重懸肝動脈平滑肌細胞沉澱，吹打成單細胞懸液。
  

• 將細胞懸液轉移至10cm培養(yang) 皿，放入37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。
  

• 4小時後觀察細胞貼壁情況，約95%以上肝動脈平滑肌細胞應呈貼壁狀態，形態飽滿、生長狀態良好。

細胞傳代

• 當肝動脈平滑肌細胞達到80%-90%匯合時進行傳(chuan) 代。
  

• 用PBS清洗培養(yang) 皿，去除殘餘(yu) 培養(yang) 基和代謝廢物。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液，輕輕搖勻覆蓋細胞單層。
  

• 置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中孵育約2-5分鍾，待細胞開始脫落時輕敲培養(yang) 皿加速脫附。

• 加入等量完全培養(yang) 基（含20% FBS和1%雙抗）終止胰酶活性。
  

• 吸取細胞懸液輕輕吹打，確保肝動脈平滑肌細胞成單細胞狀態。

• 以800轉/分離心5分鍾，棄去上清液。
  

• 加入新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞，調整細胞濃度至1×10⁶/ml。

• 按比例將肝動脈平滑肌細胞懸液分裝至新的T-25培養(yang) 瓶或10cm培養(yang) 皿中，置於(yu) 培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 按傳(chuan) 代步驟處理肝動脈平滑肌細胞，使用預冷的凍存液將細胞重懸至0.5×10⁶/ml濃度。
  

• 將細胞懸液轉移至凍存管，確保每管裝量不超過1ml。
  

• 凍存管置於(yu) -80°C凍存盒中，降溫16-18小時後轉移至液氮罐中長期保存。