
MAEC細胞(小鼠主動脈內(nei) 皮細胞) (暫不提供)
- 來源:主動脈
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:M199+5% FBS+1% P/S
- 其他:MAEC細胞經過特殊處理,使其具備自發永生化的能力。
MAEC小鼠主動脈內(nei) 皮細胞(Mouse Aortic Endothelial Cells)是從(cong) 雌性P53缺陷型小鼠的主動脈內(nei) 皮細胞中分離,具有自發永生化特性。MAEC細胞係因其P53基因的缺陷,使得小鼠對腫瘤具有易感性。P53基因在細胞周期調控、DNA損傷(shang) 修複和凋亡中發揮重要作用,缺陷導致細胞異常增殖。MAEC細胞具備典型的內(nei) 皮樣形態,呈貼壁生長。MAEC細胞因自發永生化而適合長期體(ti) 外培養(yang) ,廣泛應用於(yu) 血管生物學、腫瘤學和心血管疾病等研究。它為(wei) 研究P53基因缺陷對內(nei) 皮功能的影響提供了良好的模型,並可用於(yu) 探索與(yu) 血管功能障礙、心血管疾病和腫瘤發生相關(guan) 的生物學機製,且在藥物篩選和評估中具有重要價(jia) 值。
MAEC細胞特性特征
自發永生化:MAEC細胞經過特殊處理,具備自發永生化能力,能夠在體(ti) 外長期培養(yang) 而不失去增殖能力。
MAEC細胞的基因表達特征與(yu) 內(nei) 皮功能密切相關(guan) ,通常表達多種內(nei) 皮細胞標誌物,如:E-cadherin、VEGF(血管內(nei) 皮生長因子);
MAEC細胞在不同實驗條件下可能表現出不同的蛋白質表達模式。例如:α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin);
MAEC細胞的功能調控涉及多條信號通路,包括:p53信號通路、NF-kB信號通路。
MAEC細胞參數表
細胞名稱 | MAEC細胞(小鼠主動脈內皮細胞) |
英文名稱 | Mouse Aortic Endothelial Cells (MAEC) |
種屬 | 小鼠 |
來源 | 雌性P53缺陷型小鼠的主動脈內皮細胞 |
細胞形態 | 上皮樣,呈貼壁生長 |
汙染檢測 | 支原體、細菌、酵母檢測均為陰性 |
培養基 | M199基礎培養基 + 5% FBS + 1% P/S |
溫度 | 37℃ |
氣相組成 | 95%空氣,5%二氧化碳 |
濕度 | 70%-80% |
凍存液 | 70% ECM + 20% FBS + 10% DMSO(現用現配) |
凍存條件 | 液氮保存 |
分子特征 | E-cadherin ↓(上皮細胞標誌物,維持上皮細胞表型和極性) |
α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)↑(反映新生血管情況,表達增高與腫瘤的侵潤和轉移有關) | |
波形蛋白(Vimentin)↑(間質細胞標誌物,表達增高使細胞的遷移能力增加) | |
β-連環蛋白(β-catenin)↑(參與粘附連接,誘導EMT的發生) | |
纖粘連蛋白(Fibronectin)↑(EMT發生時增高,非特異性的) | |
操作要求 | 在二級生物安全台內操作,注意個人防護 |
培養教程
MAEC小鼠主動脈內皮細胞培養教程
MAEC細胞接種步驟
細胞狀態檢查:收到MAEC細胞後,首先使用顯微鏡檢查其狀態,確保細胞活性良好並能正常貼壁。
接種密度:根據實驗需求,將MAEC細胞以每孔5×10⁴個(ge) 細胞的密度接種於(yu) 6孔板中,或根據實驗規模接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中。
貼壁過程:MAEC細胞接種後需在培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 2-4小時,直至細胞貼壁穩定。
MAEC細胞傳代方法
傳(chuan) 代時機:當MAEC細胞鋪滿培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿表麵達到80%-90%匯合度時進行傳(chuan) 代。
棄去MAEC細胞培養(yang) 液後,用無鈣、無鎂的PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)輕輕清洗1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,放入培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察MAEC細胞形態是否變圓並開始脫落。
加入含10% FBS的培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打使MAEC細胞懸浮。
1000 RPM離心3-5分鍾後,棄去上清液,用新鮮培養(yang) 基重懸MAEC細胞。
以1:2至1:3的比例將MAEC細胞分配至新的培養(yang) 瓶中,加入適量培養(yang) 基繼續培養(yang) 。
MAEC細胞凍存步驟
收集並離心MAEC細胞後,棄去上清液,用凍存液重懸細胞。
每管分裝約1 mL MAEC細胞懸液至凍存管中,按常規凍存程序逐步降溫至-80℃或液氮保存。
MAEC細胞複蘇步驟
將凍存的MAEC細胞快速置於(yu) 37℃水浴中解凍,輕輕搖晃至完全解凍。
解凍後,將MAEC細胞加入4-6 mL完全培養(yang) 基中,輕輕混合均勻。
1000 RPM離心3-5分鍾,棄去上清液,用新鮮培養(yang) 基重懸MAEC細胞。
轉移MAEC細胞至新的T25培養(yang) 瓶中,並添加6-8 mL培養(yang) 基。
將複蘇後的MAEC細胞放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中過夜,次日檢查其生長狀態,確保MAEC細胞恢複正常。
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參考文獻
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