HAEC細胞（人主動脈內(nei) 皮細胞SV40永生化）

HAEC-SV40細胞係是一種經SV40大T抗原基因轉染的人類主動脈內(nei) 皮細胞永生化細胞係。最初kaiyun网站安全來自於(yu) 人類主動脈內(nei) 皮，通過慢病毒轉染技術引入SV40大T抗原基因，從(cong) 而獲得無限增殖的能力。HAEC-SV40細胞係因其穩定的增殖性和內(nei) 皮細胞的特征，為(wei) 血管生物學、藥物篩選及疾病模型研究提供了重要的實驗工具。HAEC-SV40細胞可以在適宜的條件下穩定傳(chuan) 代20代以上，適合長時間的實驗。

HAEC細胞特性特征

• HAEC細胞經過SV40大T抗原轉染後，增殖能力顯著增強，能夠在體(ti) 外長期培養(yang) 而不出現衰老現象
  

• HAEC細胞凋亡率較低，顯示出更強的存活能力

• HAEC細胞不具備惡性轉化的特性，適合用於(yu) 基礎研究和安全性評估

• 在1μM血管緊張素II存在下會(hui) 收縮

• SV40大T抗原陽性
  

• 基因表達與(yu) kaiyun网站安全相比基本不發生變化

• 通過免疫染色和qRT-PCR驗證SV40大T抗原在永生化細胞中的表達

• HAEC-SV40細胞合適條件下至少可以穩定傳(chuan) 代20代以上
  

• HAEC-SV40細胞生長迅速，可用於(yu) 提取大量蛋白質進行生化分析、成本低廉，容易培養(yang)

HAEC細胞SV40永生化參數表

HAEC人主動脈內皮細胞SV40永生化培養教程

培養步驟

• 預熱培養(yang) 基、胰酶、PBS、離心管、培養(yang) 瓶及無菌槍頭至室溫。
  

• 使用移液管吸棄HAEC細胞培養(yang) 瓶中的原培養(yang) 基。
  

• 加入3-5 mL常溫PBS，輕輕潤洗HAEC細胞10-20秒，隨後吸走PBS。
  

• 加入約1 mL胰酶，輕輕晃動培養(yang) 瓶以確保胰酶均勻覆蓋HAEC細胞層。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化，直至細胞間隙增大部分脫落。

• 當HAEC細胞間隙明顯增大時，加入2-3 mL完全培養(yang) 基以終止消化過程。
  

• 混勻細胞懸液後，進行900 rpm離心3-5分鍾，棄去上清液。
  

• 加入新鮮的完全培養(yang) 基，輕輕重懸HAEC細胞，並均勻分配到新的培養(yang) 瓶中。
  

• 補充完全培養(yang) 基後，將HAEC細胞培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中培養(yang) 。
  

注意事項

• 消化敏感性：HAEC細胞對消化過程極為(wei) 敏感。消化時間和操作力度需嚴(yan) 格控製，避免過度吹打以減少氣泡產(chan) 生。

• 細胞貼壁性：HAEC細胞的貼壁能力較弱，溫度變化或運輸可能導致細胞回縮。操作後需及時放回培養(yang) 箱恢複。

• 培養(yang) 基要求：必須使用專(zhuan) 用的內(nei) 皮細胞培養(yang) 基，確保HAEC細胞健康和正常增殖。

凍存細胞步驟

• 消化並離心獲得HAEC細胞沉澱後，加入含40% FBS和5% DMSO的凍存液，輕輕重懸細胞。
  

• 將細胞懸液迅速轉移至標記好的凍存管中。
  

• 將凍存管放入程序凍存盒中，置於(yu) -80℃冰箱中過夜，然後轉移至液氮中保存。
  

複蘇細胞步驟

• 從(cong) 液氮中取出凍存管，立即放入37℃水浴中快速複蘇。
  

• 複蘇後，將HAEC細胞懸液迅速轉移至含有完全培養(yang) 基的離心管中，900 rpm離心3-5分鍾，棄去上清液。
  

• 用新鮮完全培養(yang) 基重懸HAEC細胞，轉移至培養(yang) 瓶中，並將其放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。