
SNU-423細胞(人肝癌細胞)
- 來源:原發性肝細胞癌
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:SNU-423細胞係表達B型血抗原和Rh+抗原
SNU-423細胞是一株人肝細胞癌細胞係,由J.-G. Park及其團隊於(yu) 1990年從(cong) 一名韓國患者的原發性肝細胞癌中提取。患者在接受了脂質醇聯合阿黴素的經導管動脈栓塞治療後,提取了腫瘤組織進行體(ti) 外培養(yang) 。SNU-423細胞最初使用添加5%熱滅活胎牛血清的ACL-4培養(yang) 基進行培養(yang) ,後續在含10%熱滅活胎牛血清的RPMI 1640培養(yang) 基中維持。
SNU-423細胞具有非整倍體(ti) 特性,模態染色體(ti) 數為(wei) 79。原發性腫瘤呈單發結節形態,組織學顯示為(wei) 小梁型結構,而在培養(yang) 中可觀察到多核細胞特征。SNU-423細胞在研究肝癌的生物學特性和藥物反應方麵具有重要的實驗價(jia) 值,為(wei) 肝癌的基礎研究及潛在治療方法的開發提供了有力工具。
SNU-423細胞特性特征
抗原表達:B型血抗原、Rh+(Rh陽性)
乙型肝炎病毒(HBV)檢測:Southern blot雜交檢測顯示存在HBV DNA,但HBV基因組RNA未表達。這表明SNU-423細胞可能與(yu) HBV感染相關(guan) ,但並不活躍表達HBV基因組。
SNU-423細胞係廣泛用於(yu) 多種研究領域,包括:肝癌的生物學研究、藥物敏感性測試、癌症治療策略開發
SNU-423細胞參數表
細胞名稱 | SNU-423細胞(人肝癌細胞) |
細胞別稱 | SNU423; NCI-SNU-423 |
來源 | 韓國患者的原發性肝細胞癌;40歲男性患者,腫瘤為單結節狀 |
建立時間 | 1990年由J.-G. Park及其團隊建立 |
組織來源 | 肝髒 |
疾病類型 | 原發性肝細胞癌 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時間 | 24-48小時;每周2-3次傳代 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS |
氣體條件 | 95%空氣;5% CO₂ |
溫度條件 | 37℃ |
濕度條件 | 70%-80% |
傳代比例 | 1:2 |
凍存條件 | 凍存液:90% FBS,10% DMSO;或使用非程序凍存液 |
質量控製 | 細菌、真菌、支原體、內毒素檢測 |
抗原表達 | B型血;Rh+ |
分子特征 | 非整倍體(模態編號=79) |
組織學特征 | 小梁型;原發腫瘤伴有結節周圍延伸 |
細胞特性 | 多核細胞 |
用途 | 癌症研究、藥物敏感性測試;不可用於治療或臨床應用 |
培養教程
SNU-423人肝癌細胞培養教程
收到SNU423細胞後的處理
收到SNU423細胞後,首先檢查培養(yang) 瓶是否完好,觀察是否有漏液或破損現象。如果發現任何異常,應立即拍照並聯係供應商。
使用75%酒精擦拭SNU423細胞培養(yang) 瓶的表麵,進行消毒處理。
在顯微鏡下檢查SNU423細胞的形態,確認其是否已貼壁。
將培養(yang) 瓶靜置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中2-3小時,確保SNU423細胞適應環境。
棄去運輸過程中的舊培養(yang) 基,向培養(yang) 瓶中加入6mL完全培養(yang) 基(RPMI-1640培養(yang) 基,含10%胎牛血清和1%雙抗),並輕輕搖動均勻。
SNU423細胞複蘇
將凍存的SNU423細胞懸液迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍,解凍過程中輕輕搖動凍存管,確保細胞均勻解凍。
解凍後,將SNU423細胞懸液加入4mL預熱的完全培養(yang) 基中,混合均勻。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液,加入1-2mL預熱的完全培養(yang) 基後輕輕吹打,使SNU423細胞懸浮。
將SNU423細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶或10cm培養(yang) 皿中,加入適量培養(yang) 基(約8mL),並在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
第二天更換新鮮培養(yang) 基,並在顯微鏡下檢查SNU423細胞的生長情況。
SNU423細胞傳代
當SNU423細胞覆蓋培養(yang) 瓶底麵積的80%-90%時,可進行傳(chuan) 代。
棄去SNU423細胞的培養(yang) 上清液,用無鈣鎂離子的PBS緩衝(chong) 液清洗1-2次。
向培養(yang) 瓶中加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA混合溶液,並放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,消化約1-2分鍾。
在顯微鏡下觀察,當SNU423細胞開始變圓並脫離培養(yang) 表麵時,輕輕敲擊培養(yang) 瓶邊緣幫助細胞脫落,並加入適量完全培養(yang) 基終止消化。
將SNU423細胞懸液以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液,加入1-2mL新鮮完全培養(yang) 基,輕輕吹打使SNU423細胞均勻懸浮。
按1:2比例分裝至新的培養(yang) 瓶中,並補充8mL完全培養(yang) 基。
SNU423細胞凍存
當SNU423細胞生長狀態良好、密度適中時,可進行凍存操作。首先棄去培養(yang) 基,用PBS清洗一次。
加入1mL胰酶消化SNU423細胞,當細胞完全脫落後,加入1mL含血清的完全培養(yang) 基終止消化。
將SNU423細胞懸液以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
加入1mL完全培養(yang) 基懸浮SNU423細胞,根據細胞密度加入足量培養(yang) 基和DMSO(終濃度10%),確保細胞濃度不低於(yu) 1×10⁶ cells/mL。
將1mL SNU423細胞懸液分裝至每支凍存管中,並確保凍存管標記清楚。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,緩慢降溫至-80℃,2小時後轉移至液氮中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 (ATCC=CRL-2238; KCLB=00423; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
11,12,13 (Cosmic-CLP=909737) | |
D2S1338 | 19,24 |
D3S1358 | 17 (PubMed=25877200) |
17,18 (ATCC=CRL-2238; KCLB=00423) | |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 11,16 |
D13S317 | 10,13 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 12,13 |
D19S433 | 14,16.2 |
D21S11 | 30 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11,12 |
TH01 | 6,9 (ATCC=CRL-2238; Cosmic-CLP=909737) |
9 (KCLB=00423; PubMed=25877200; PubMed=31378681) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15 |
參考文獻
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