
WRL68細胞(人正常肝細胞)
- 來源:肝髒
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:EMEM (EBSS) + 2mM Glutamine + 1% (NEAA) + 10% FBS + 1% P/S
- 其他:WRL-68細胞能夠分泌重要的肝髒蛋白,如白蛋白和α-胎蛋白
WRL-68細胞係源自一位30歲6個(ge) 月的女性的健康肝髒組織。WRL68細胞具備典型的上皮細胞形態,能夠依附於(yu) 培養(yang) 基表麵生長。WRL-68細胞表現出與(yu) 肝髒kaiyun网站安全和肝細胞相似的形態學特征。WRL68細胞曾受到支原體(ti) 汙染,但已通過ECACC的處理完全清除。此外,基於(yu) STR PCR DNA分析,WRL-68細胞與(yu) HeLa細胞在遺傳(chuan) 學上無法區分,因此被認定為(wei) 來源於(yu) HeLa細胞。
盡管如此,WRL68細胞仍然廣泛應用於(yu) 肝髒生物學、肝髒疾病模型、藥物代謝研究及生物技術等領域,因其提供了研究正常肝細胞功能的一個(ge) 有價(jia) 值的模型。
WRL68細胞特性特征
分泌功能:WRL-68細胞能夠分泌重要的肝髒蛋白,如白蛋白和α-胎蛋白。
酶表達:肝髒特異性酶:表達丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、γ-穀氨酰轉肽酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP)。
同工酶:G6PD,A
汙染曆史:WRL-68曾被支原體(ti) 汙染,但經過ECACC的治療和治愈,現已確認無汙染。
WRL-68細胞廣泛應用於(yu) 以下領域:藥物代謝研究、肝髒疾病模型、生物技術研究。
WRL68細胞參數表
細胞名稱 | WRL68細胞(人正常肝細胞) |
細胞別稱 | WRL-68; WRL68 |
組織來源 | 肝髒 |
患者年齡 | 30歲6個月 |
患者性別 | 女 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
生物安全等級 | 2 |
細胞規格 | 1 x 10^6 cells/vial |
培養基組成 | 90% DMEM + 10% FBS 或 EMEM + 10% FBS |
氣相組成 | 95%空氣 + 5%二氧化碳 |
培養溫度 | 37℃ |
傳代比例 | 1:2至1:6,每周2次 |
凍存液配方 | 95%培養基 + 5% DMSO |
凍存條件 | 液氮儲存 |
支原體檢測 | 陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均為陰性 |
酶表達特征 | 丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、γ-穀氨酰轉肽酶(GGT) 、堿性磷酸酶(ALP) |
分泌功能 | 白蛋白、α-胎蛋白 |
應用領域 | 藥物代謝研究、肝髒疾病模型、生物技術等 |
供應限製 | 僅供科學研究,絕不可用於臨床治療 |
特別說明 | 此細胞係曾被支原體汙染,現已治愈。STR分析顯示與HeLa細胞無法區分。 |
培養教程
WRL68人正常肝細胞培養教程
收貨處理
收到WRL68細胞培養(yang) 瓶或凍存管後,首先檢查包裝是否完好,培養(yang) 液是否有泄漏或渾濁。
對於(yu) 凍存的WRL68細胞,檢查幹冰是否揮發完全,並確保凍存管沒有損壞。
使用75%酒精擦拭外部進行消毒處理。
若收到的是培養(yang) 瓶形式的WRL68細胞,將T-25培養(yang) 瓶放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置2-4小時,幫助細胞恢複狀態。
WRL68細胞複蘇
采用含10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素(如青黴素/鏈黴素)的DMEM或MEM培養(yang) 基,作為(wei) WRL68細胞的完全培養(yang) 基。
從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出凍存的WRL68細胞,快速放入37℃水浴中融化(約1分鍾),過程中輕輕搖動凍存管。
將融化的WRL68細胞加入5 mL已預熱的完全培養(yang) 基中,並轉移至15 mL離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液。
使用2 mL完全培養(yang) 基重懸WRL68細胞,並將其轉移至T-25培養(yang) 瓶中。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中,過夜培養(yang) 以便WRL68細胞貼壁生長。
WRL68細胞傳代
當WRL68細胞達到80%-90%匯合時,需進行傳(chuan) 代操作,以保持細胞活力和正常生長狀態。
吸棄培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基,用1 mL無菌PBS輕輕潤洗WRL68細胞一次,去除殘留血清。
加入1 mL 0.25%胰酶(Trypsin-EDTA)溶液,放入37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,觀察WRL68細胞是否開始變圓並脫落。
迅速加入1 mL完全培養(yang) 基中和胰酶,將細胞懸液收集到15 mL離心管中。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液,並用新鮮的完全培養(yang) 基重懸WRL68細胞。
按所需比例將WRL68細胞分至新的培養(yang) 瓶中,繼續在37℃、5% CO₂條件下培養(yang) 。
WRL68細胞凍存
按照傳(chuan) 代步驟收集WRL68細胞,並進行細胞計數,調整至5 x 10^6至1 x 10^7個(ge) /mL的細胞密度。
用預冷的凍存液(90%完全培養(yang) 基 + 10%二甲基亞(ya) 碸DMSO)重懸WRL68細胞。
將每管裝1 mLWRL68細胞懸液,做好標識。
將凍存管放置於(yu) -80℃冰箱中冷凍過夜,隨後轉移至液氮中進行長期保存。
注意事項
運輸中的培養(yang) 基不可繼續用於(yu) WRL68細胞培養(yang) ,需使用新鮮配製的完全培養(yang) 基。
運輸過程中的溫度變化可能導致部分WRL68細胞死亡,這是正常現象,需及時檢測細胞狀態。
在操作WRL68細胞時,需嚴(yan) 格遵守無菌技術,以避免汙染的發生。
定期觀察WRL68細胞的生長狀態,確保其生長良好,無異常形態或汙染。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 12,13 |
D13S317 | 12,13.3 (ATCC=CL-48) |
12,14 (ECACC=89121403) | |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 27,28 |
FGA | 18,21 |
Penta D | 8,15 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,12 |
vWA | 16,18 |
參考文獻
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