THLE-2人肝永生化細胞（SV40永生化） （暫不提供）

THLE-2和THLE-3細胞係是通過SV40大T抗原感染正常人肝上皮細胞衍生出的永生化細胞，這些細胞是通過將含有SV40 T抗原Bgl I-Hpa I片段的逆轉錄病毒載體(ti) 導入PA317包裝細胞係中生成的病毒感染而獲得的。
THLE細胞係在藥物毒理學以及肝癌病因和發病機製的研究中提供了重要的體(ti) 外模型。THLE-2和THLE-3細胞表現出正常成人肝上皮細胞的表型特征。廣泛應用於(yu) 肝功能、藥物代謝和毒理學研究中，是研究肝髒疾病和藥物反應的重要工具。

THLE-2肝細胞特性特征

• 無致瘤性：THLE-2細胞注射到無胸腺裸鼠體(ti) 內(nei) 時不會(hui) 形成腫瘤。

• THLE-2細胞能夠將苯並[a]芘、N-亞(ya) 硝基二甲胺和黃曲黴毒素B1代謝為(wei) 最終的致癌代謝物，這些代謝物能夠與(yu) DNA結合，表明其具有功能性的細胞色素P450途徑。

• 酶表達：環氧化物水解酶、NADPH細胞色素P450還原酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、穀胱甘肽S-轉移酶、穀胱甘肽過氧化物酶

• THLE-2細胞係表達正常成人肝上皮細胞相關(guan) 的基因，包括與(yu) 肝功能、代謝和解毒相關(guan) 的基因。
  

• 在惡性轉化相關(guan) 研究中，THLE-2-TCE變種顯示出基因組不穩定性，增殖、遷移和侵襲相關(guan) 的原癌基因表達顯著升高，而抑癌基因表達降低。

• THLE-2細胞在轉化過程中涉及多個(ge) 信號通路的異常活化，如TGFβ1/SMAD、MAPK、PI3K/AKT/mTOR和NFκB等，這些通路與(yu) 細胞增殖和存活密切相關(guan)
  

THLE-2人肝永生化細胞參數表

THLE-2人正常肝SV40永生化細胞培養教程

THLE-2細胞複蘇

• 解凍THLE-2細胞：將凍存的THLE-2細胞從(cong) 液氮中取出，迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍，過程中輕輕搖動，確保均勻解凍。

• 離心處理：將解凍後的THLE-2細胞懸液轉移至離心管中，加入4 mL完全培養(yang) 基後，在1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。

• 重懸與(yu) 培養(yang) ：用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸THLE-2細胞，將細胞移入培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中，加入8 mL完全培養(yang) 基，置於(yu) 培養(yang) 箱中過夜，次日觀察細胞狀態。

THLE-2細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機：當THLE-2細胞鋪滿培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿表麵80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。

• 洗滌細胞：棄去培養(yang) 基，用不含鈣、鎂的PBS輕輕清洗THLE-2細胞1-2次。

• 消化細胞：加入1 mL含有0.25%胰酶和0.53 mM EDTA的消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察THLE-2細胞變圓並脫落，隨後加入培養(yang) 基終止消化。

• 離心與(yu) 重懸：在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。用新鮮培養(yang) 基重懸THLE-2細胞懸液。

• 分瓶培養(yang) ：將消化後的THLE-2細胞按1:2的比例分至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，加入新鮮培養(yang) 基。

THLE-2細胞凍存

• 細胞準備：在細胞狀態良好且生長旺盛時，收獲THLE-2細胞，棄去培養(yang) 基，用PBS清洗。

• 消化與(yu) 離心：加入胰酶消化THLE-2細胞，待細胞脫落後加入培養(yang) 基終止消化。離心後棄去上清，加入10% DMSO的凍存液，以每管1×10^6個(ge) THLE-2細胞的密度分裝。

• 凍存操作：將THLE-2細胞懸液分裝至凍存管中，逐步降溫至-80℃，最後移入液氮中保存。