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HSEC細胞(人肝竇內(nei) 皮細胞永生化)貨號:STM-CL-5410 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

HSEC細胞(人肝竇內(nei) 皮細胞永生化)

  • 來源:肝竇內(nei) 皮;TERT永生化
  • 細胞特征:貼壁細胞 ,內(nei) 皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
  • 其他:由於(yu) 缺乏細胞間連接和基底膜,HSEC-TERT細胞具有較高的通透性,適合用於(yu) 研究物質在血液與(yu) 肝實質之間的交換。HSEC-TERT細胞培養(yang) 中有見漂浮顆粒物、漂浮細胞和部分形變細胞,來源於(yu) TERT轉化和篩選過程,為(wei) 正常現象,多見於(yu) 永生化細胞。
Tags: 肝竇內(nei) 皮細胞    
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價(jia) 格:¥ 2,300.00

HSEC-TERT人肝竇內(nei) 皮細胞(Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells, HSEC)是一種通過慢病毒攜帶TERT基因而實現永生化的細胞係,起源於(yu) 人類正常肝髒組織中的原代肝竇內(nei) 皮細胞。肝竇內(nei) 皮細胞是肝髒中數量最多的非實質細胞,約占肝非實質細胞總數的70%。它們(men) 在調節血液與(yu) 肝實質之間的物質交換中發揮著重要作用。

與(yu) 普通毛細血管內(nei) 皮細胞相比,HSEC-TERT細胞缺乏細胞間連接和基底膜,具有較高的通透性,這一特性對於(yu) 肝髒的功能至關(guan) 重要。在適宜的培養(yang) 條件下,HSEC-TERT細胞係能夠穩定傳(chuan) 代至少20代以上,同時保留了肝竇內(nei) 皮細胞的主要特性,如其獨特的窗孔結構和高通透性。HSEC-TERT細胞培養(yang) 中有見漂浮顆粒物、漂浮細胞和部分形變細胞,來源於(yu) TERT轉化和篩選過程,為(wei) 正常現象,多見於(yu) 永生化細胞。

HSEC永生化細胞特性特征

  • 高通透性:由於(yu) 缺乏細胞間連接和基底膜,HSEC-TERT細胞具有較高的通透性,適合用於(yu) 研究物質在血液與(yu) 肝實質之間的交換。

  • 基因表達:HSEC細胞攜帶TERT基因,這一基因的引入使得細胞能夠逃避衰老和凋亡,保持增殖能力。

  • 代謝特性:HSEC細胞能夠合成和分泌一些肝髒特異性蛋白,如白蛋白,反映其在肝髒功能方麵的特性。

HSEC人肝竇內皮細胞參數表

細胞名稱HSEC細胞(人肝竇內皮細胞TERT永生化)
細胞別稱HSEC(TERT)
來源人類正常肝髒組織中的原代肝竇內皮細胞;攜帶TERT基因
細胞形態內皮細胞樣
細胞類型貼壁細胞
生長特性適應性強,能夠在體外穩定增殖
生物安全等級2
致瘤性無致瘤性
培養條件內皮細胞專用培養基
培養環境37℃;5% CO2;飽和濕度
細胞簡介HSEC細胞是通過慢病毒攜帶TERT基因而建立的永生化細胞,合適條件下至少可以穩定傳代20代以上。
換液周期每2-3天
培養基內皮細胞專用培養基
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
凍存液凍存液:55%基礎培養基+40% FBS+5% DMSO 溫度:液氮
凍存規格200-300萬細胞/ml,1ml每管
細胞標誌物表達血管假性血友病因子(vWF)、CD31等內皮細胞特異性標誌物
功能特性能合成和分泌肝髒特異性蛋白,如白蛋白和糖原
高通透性特性由於缺乏細胞間連接和基底膜,具有較高的通透性
研究領域

肝髒疾病機製研究、藥物篩選、免疫反應研究、再生醫學

適用於(yu) 肝髒相關(guan) 的生物學和病理學研究

用於(yu) 評估藥物對肝髒的代謝和毒性影響

研究肝髒內(nei) 細胞間的相互作用及其對肝髒功能的影響

培養教程

HSEC人肝竇內皮細胞TERT永生化培養教程

培養步驟

  • 確保所有試劑和材料在操作前均已恢複至室溫,特別是用於(yu) HSEC細胞培養(yang) 的試劑。

  • 使用75%酒精消毒操作台及培養(yang) 瓶外表麵,確保HSEC細胞培養(yang) 環境的無菌性。

  • 小心吸盡培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基,避免HSEC細胞幹燥。

  • 加入3-4 ml常溫PBS,輕輕搖動以洗滌HSEC細胞,持續10-20秒,隨後吸走PBS。

  • 向T25瓶中加入約1 ml的0.25%胰酶,輕輕搖晃培養(yang) 瓶,使胰酶均勻覆蓋HSEC細胞層。

  • 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中,觀察HSEC細胞開始收縮和脫離培養(yang) 基底。

  • 當HSEC細胞間隙擴大且細胞尚未完全脫離時,可輕拍培養(yang) 瓶助脫並加入2-3 ml完全培養(yang) 基以中和胰酶作用。

  • 輕輕混勻HSEC細胞懸液以確保均勻分布。

  • 將HSEC細胞懸液轉移至離心管,1000 rpm離心3-5分鍾,棄去上清液。

  • 在HSEC細胞沉澱中加入適量新鮮培養(yang) 基,輕輕重懸HSEC細胞。

  • 將HSEC細胞均勻分配至新的培養(yang) 瓶中。

  • 添加適量的完全培養(yang) 基,確保HSEC細胞在合適的環境中生長。

  • 將培養(yang) 瓶放回37℃培養(yang) 箱中,繼續培養(yang) HSEC細胞。

注意事項

  • 消化時間:不同品牌胰酶的活性可能有所不同,因此應嚴(yan) 格控製HSEC細胞的消化時間。建議每30秒觀察HSEC細胞狀態,避免過度消化。

  • HSEC細胞狀態監測:在傳(chuan) 代和換液過程中,密切關(guan) 注HSEC細胞狀態,避免HSEC細胞過度聚集或大麵積脫落。

  • 培養(yang) 基更換:每2-3天更換培養(yang) 基,以保持HSEC細胞生長的最佳環境。

  • 傳(chuan) 代比例:根據HSEC細胞的生長密度和狀態,通常采用1:2至1:4的傳(chuan) 代比例。

  • HSEC細胞凍存:如需凍存HSEC細胞,建議使用培養(yang) 基+45% FBS + 5% DMSO的凍存液。在凍存前,應確保HSEC細胞充分消化並通過離心收集。

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參考文獻

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