Hep3B細胞（Hep3B2.1-7人肝癌細胞）

Hep3B2.1-7（也稱為(wei) Hep 3B、Hep-3B、Hep3B）是一種人類肝癌細胞係，源自一名8歲黑人青年的肝髒組織。hep3b細胞係表現為(wei) 上皮形態，並含有整合的乙型肝炎病毒基因組，適合用作轉染實驗的宿主。

hep3b細胞係的模態染色體(ti) 數為(wei) 60，其中包含82個(ge) 亞(ya) 梯形模態，並且1號染色體(ti) 出現了重排現象。Hep3B細胞呈多角形，並具有緊密的細胞連接。Hep3B細胞係由於(yu) 其高增殖能力和穩定的遺傳(chuan) 特性，廣泛應用於(yu) 肝癌相關(guan) 的實驗研究。

Hep3B細胞特性特征

• 致瘤性：hep3B細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 能夠形成腫瘤，表明其具有致瘤特性。

• 基因組：Hep3B細胞係包含完整的乙型肝炎病毒（HBV）基因組，適合用於(yu) 研究HBV與(yu) 肝癌之間的關(guan) 係。
  

• 基因表達：甲胎蛋白（AFP，甲胎蛋白）；乙型肝炎表麵抗原（HBsAg）；白蛋白；α2-巨球蛋白；α1-抗胰蛋白酶；轉鐵蛋白，α1-抗糜蛋白酶；觸珠蛋白；銅藍蛋白；纖溶酶原補體(ti) （C3、C4）、C3激活劑；纖維蛋白原；α1酸性糖蛋白，α2-HS糖蛋白；β脂蛋白；視黃醇結合蛋白

• 轉染宿主：Hep3B細胞係是合適的轉染宿主，常用於(yu) 基因功能研究和藥物篩選。

• 增殖能力：在適宜的培養(yang) 條件下，Hep3B細胞能夠快速增殖，適合大規模培養(yang)

Hep3B細胞參數表

Hep3B2.1-7人肝癌細胞培養教程

Hep3B細胞複蘇

• 快速解凍：從(cong) 液氮罐中取出Hep3B細胞凍存管，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動凍存管，使其均勻解凍。Hep3B細胞的解凍過程應在1-2分鍾內(nei) 完成，以防細胞長時間暴露於(yu) 高溫下。

• 添加培養(yang) 基：解凍後的Hep3B細胞懸液迅速轉移至含有10% FBS的溫預培養(yang) 基中，輕輕混勻以降低DMSO的毒性。

• 細胞清洗：將Hep3B細胞懸液以1200 rpm離心3分鍾，去除上清液，消除DMSO。

• 重懸Hep3B細胞：使用新鮮的預溫培養(yang) 基重懸Hep3B細胞，並調整細胞濃度至適當水平。

• 接種：將Hep3B細胞均勻接種到T25培養(yang) 瓶中，並加入適量的培養(yang) 基，以確保Hep3B細胞在初期能充分獲得營養(yang) 。

Hep3B細胞培養

• 在37℃、5% CO₂環境下孵育Hep3B細胞。
  

• 初次接種後的2-4小時內(nei) ，靜置培養(yang) 以促進Hep3B細胞附壁。隨後，可輕輕晃動培養(yang) 瓶檢查Hep3B細胞的附壁情況。

• 換液頻率：每2-3天更換一次培養(yang) 基，去除老化Hep3B細胞和代謝廢物，補充新鮮養(yang) 分。

Hep3B細胞傳代

• 準備工作：在進行Hep3B細胞傳(chuan) 代前，準備好新鮮的培養(yang) 基和預溫的PBS溶液。

• 吸出培養(yang) 液：小心吸出培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，避免擾動附壁的Hep3B細胞。

• 細胞洗滌：向培養(yang) 瓶中加入約2 mL PBS，輕輕搖晃後吸出並丟(diu) 棄，以去除殘留的血清。

• Hep3B細胞消化：入1 mL的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，輕輕搖動使其覆蓋所有Hep3B細胞。將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中，觀察Hep3B細胞形態變化。通常在2-3分鍾內(nei) ，Hep3B細胞會(hui) 開始變圓並逐漸脫壁。

• 終止消化：加入3 mL含10% FBS的培養(yang) 基中和胰蛋白酶，輕輕吹打培養(yang) 瓶以形成單細胞懸液。

• 離心：將Hep3B細胞懸液以1200 rpm離心3分鍾，去除上清液。

• 重懸和接種：用新鮮培養(yang) 基重懸Hep3B細胞後，按1:2或1:3的比例接種至新培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

Hep3B細胞凍存

• 準備凍存液：配製55%的基礎培養(yang) 基、40%的FBS和5%的DMSO混合液，確保DMSO濃度不超過5%，以保護Hep3B細胞在凍存過程中的活力。

• 離心Hep3B細胞：將Hep3B細胞懸液離心去除培養(yang) 基。

• 重懸Hep3B細胞：用凍存液重懸Hep3B細胞，細胞濃度調整至1×10^6 cells/mL。

• 凍存：將Hep3B細胞懸液分裝入凍存管中，逐漸降溫至-80℃後，轉移至液氮中長期保存。