HuH-6細胞係（人肝母細胞瘤細胞係）

HuH-6細胞係是一種人類肝母細胞瘤細胞係，於(yu) 1982年從(cong) 一名57歲日本男性的肝癌組織中建立。huh6細胞係展現出上皮細胞樣的形態，並能夠合成球蛋白和甲胎蛋白，被廣泛用於(yu) 肝癌和相關(guan) 疾病的研究中。

HuH-6細胞的主要用於(yu) 研究丙型肝炎病毒（HCV）感染和肝癌。在藥物代謝和藥代動力學領域，huh6細胞被用於(yu) 通過分析各種CYP450酶的基因表達來評估藥物相互作用（DDI）的潛力。另一個(ge) 重要應用是研究轉運蛋白介導的藥物外排抑製。通過在膠原蛋白基質上培養(yang) 這些肝細胞，並用基底膜提取物覆蓋，可以形成極化的細胞表麵結構，從(cong) 而促進膽汁外排轉運蛋白的重新表達。這種方法有助於(yu) 分析代謝速度較慢的藥物，以開發出在體(ti) 內(nei) 更持久有效的藥物。

HuH-6細胞係特性特征

• 蛋白表達：HuH-6細胞能夠合成球蛋白和甲胎蛋白。
  

• 基因表達：HuH-6細胞係的基因表達特征使其成為(wei) 研究藥物代謝和藥代動力學的理想模型，尤其是通過分析細胞色素P450（CYP450）酶的表達來評估藥物相互作用（DDI）的潛力。

• 轉運蛋白：HuH-6細胞可用於(yu) 研究轉運蛋白介導的外排抑製。通過在膠原蛋白上鍍肝細胞並覆蓋基底膜提取物，可以形成極化的細胞表麵結構，並重新表達膽汁外排轉運蛋白。

HuH-6細胞係參數表

HuH-6人肝母細胞瘤細胞係培養教程

HuH6細胞複蘇

• 解凍: 將存有1mL HuH6細胞懸液的凍存管迅速置於(yu) 37℃水浴中，輕輕搖晃直至完全解凍。

• 培養(yang) 基處理: 將解凍後的HuH6細胞懸液轉移至離心管中，加入4mL含89% DMEM、10%胎牛血清（FBS）和1%雙抗的培養(yang) 基，輕輕混勻。

• 離心: 在1000rpm離心4分鍾，棄去上清液。

• 重懸: 加入1-2mL新鮮培養(yang) 基，將HuH6細胞懸液輕輕吹勻後，轉移至T25培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。

• 換液與(yu) 檢查: 第二天更換新鮮培養(yang) 基，並檢查HuH6細胞的密度及狀態。

HuH6細胞傳代

• 傳(chuan) 代時機: 當HuH6細胞達到80%-90%匯合度時，即可進行傳(chuan) 代操作。

• PBS清洗: 棄去培養(yang) 上清液，用PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）潤洗HuH6細胞1-2次，以去除殘餘(yu) 血清。

• 細胞消化: 加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液，放置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，期間在顯微鏡下觀察HuH6細胞的消化進展。當大部分HuH6細胞變圓並開始脫落時，迅速取回操作台。

• 終止消化: 輕敲培養(yang) 瓶，加入適量含血清的培養(yang) 基終止消化過程。

• 離心與(yu) 重懸: 將HuH6細胞懸液轉移至離心管中，補充培養(yang) 基至6-8mL，在1000rpm離心4分鍾，棄去上清液後，加入1-2mL培養(yang) 基，輕輕吹勻。

• 分瓶: 按1:2比例將HuH6細胞懸液分至新的T25培養(yang) 瓶中，每瓶補加8mL培養(yang) 基，並將其置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

HuH6細胞凍存

• 凍存準備: HuH6細胞生長狀態良好且密度適當時，可進行凍存操作。

• PBS清洗與(yu) 消化: 棄去培養(yang) 基，加入PBS清洗HuH6細胞1次，然後加入1mL胰蛋白酶消化，待HuH6細胞變圓脫落後，加入1mL含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 離心與(yu) 重懸: 在1000rpm離心4分鍾，棄去上清液。根據HuH6細胞數量加入適量血清，將細胞重懸。

• 凍存液製備: 根據需要加入10% DMSO至HuH6細胞懸液中，輕輕混勻。確保HuH6細胞密度不低於(yu) 1×10^6/mL，每支凍存管分裝1mL細胞懸液。

• 凍存與(yu) 標識: 確保凍存管已正確標識，使用梯度降溫法將HuH6細胞緩慢降溫至-80℃，最終儲(chu) 存於(yu) 液氮罐中以保持長期活性。