
HepG2 2.2.15細胞係(人肝癌細胞係)
- 來源:肝癌;HBV陽性
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S+0.4mg/mL G418
- 其他:HepG2 2.2.15細胞具有穩定整合的HBV D型基因組
HepG2 2.2.15細胞係源自肝母細胞瘤組織(是從(cong) 15歲男性患者的肝母細胞瘤組織中分離出親(qin) 本HepG2的細胞係),是從(cong) 親(qin) 本HepG2細胞中分離出的亞(ya) 克隆,具有穩定整合的HBV D型基因組。
HepG2 2.2.15細胞能夠長期穩定地在培養(yang) 基中分泌HBV表麵抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和完整的HBV顆粒(Dane顆粒),特別應用體(ti) 外篩選抗HBV藥物研究工具。
相比親(qin) 代HepG2細胞,HepG2/2.2.15細胞表現出較低的增殖和侵襲活性,以及較低的裸鼠致瘤性,同時表達微管相關(guan) 標誌物雙皮質素(DCX),適合用於(yu) 研究HBV相關(guan) 癌症及肝細胞對幹擾素(IFN)應答的實驗模型。
HepG2 2.2.15細胞起因
肝細胞癌是肝髒的主要原發性惡性腫瘤,也是全球癌症相關(guan) 死亡的主要原因之一,發病機製與(yu) 乙型肝炎病毒(HBV)感染密切相關(guan) 。為(wei) 了研究肝癌的進展和基本生物學特性,開發了穩定轉染乙型肝炎病毒基因組的HepG2 2.2.15人肝癌細胞係。
HepG2 2.2.15細胞特性
HepG2 2.2.15細胞係是從(cong) 肝母細胞瘤組織中分離的親(qin) 本HepG2細胞,穩定表達整合的乙型肝炎病毒(HBV)D型基因組。
HepG2 2.2.15細胞是用於(yu) 研究乙型肝炎病毒複製、肝細胞對幹擾素(IFN)應答的重要細胞模型之一。
HepG2 2.2.15細胞係對G418具有抗性,且含有HBV D型基因組的兩(liang) 個(ge) 首尾二聚體(ti) 。
HepG2 2.2.15細胞表達微管相關(guan) 標誌物雙皮質素(DCX),適合用於(yu) 研究HBV相關(guan) 癌症。
HepG2/2.2.15細胞穩定表達乙型肝炎病毒的HepG2人肝母瘤的亞(ya) 克隆,是HBV相關(guan) 肝病最廣泛使用的模型之一。
HepG2 2.2.15細胞參數表
細胞名稱 | Hep G2.2.15人肝癌細胞(STR鑒定正確) |
細胞別稱 | Hep-G2/2.2.15; HepG2-2.2.15; HepG2.2.15; 2.2.15;人肝癌細胞(HBV) |
細胞類型 | 人肝癌細胞 |
年齡性別 | 男;15歲 |
細胞形態 | 典型的肝癌細胞形態,貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
細胞來源 | 肝母細胞瘤組織中的親本HepG2細胞 |
轉染物 | 乙型肝炎病毒(HBV)D型基因組 |
抗性 | 對G418抗性 |
分泌物 | HBV表麵抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)、完整的HBV顆粒(Dane顆粒)、複製中間體 |
生物學活性 | 比親代HepG2細胞具有較低的增殖和侵襲活性,裸鼠中的致瘤性也較低 |
標誌物 | 雙皮質素(DCX) |
生物安全等級 | 2 |
支原體檢測 | 無 |
培養基 | MEM+10% FBS+380ug/ml G418+1%雙抗 |
培養條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
傳代比例 | 1:3傳代,3-4天傳代一次 |
倍增時間 | 50-60小時(DSMZ) |
凍存液配方 | 完全培養基+10% DMSO |
培養難點 | 細胞有堆疊生長的特性,消化後需要兩天貼壁至完全攤開 |
應用 | 研究乙型肝炎病毒複製、HBV相關癌症、肝細胞對幹擾素(IFN)應答 |
研究工具 | 體外篩選抗HBV藥物的良好模型 |
收錄 | ATCC |
培養教程
HepG2 2.2.15細胞培養教程
複蘇HepG2 2.2.15細胞
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加4-6mL完全培養(yang) 基後吹勻。
將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜,第二天換液並檢查細胞密度。
傳代HepG2 2.2.15細胞
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-2分鍾,觀察細胞消化情況。
細胞脫落後,加入含10%血清的完全培養(yang) 基終止消化,吹勻後離心。
按1:2到1:5的比例分到新的含5-6ml培養(yang) 液的培養(yang) 瓶或皿中。
凍存HepG2 2.2.15細胞
收集消化好的細胞到離心管中,根據細胞密度決(jue) 定凍存密度。
1000rpm離心3-5分鍾,去掉上清液,用細胞凍存液重懸細胞。
分配到凍存管中,標注名稱、代數、日期後置於(yu) -80度冰箱過夜,之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 15,16 |
D13S317 | 9,13 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 13,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 22,25 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 15,20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17 |
參考文獻
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