
人軟骨細胞係(原代軟骨細胞)
- 來源:人軟骨細胞
- 細胞特征:貼壁 ,梭形、多角形
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:軟骨細胞具有再生能力,從(cong) 幼稚細胞逐漸分化為(wei) 成熟的細胞。
人體(ti) 內(nei) 的軟骨細胞來源於(yu) 軟骨組織,軟骨組織由軟骨細胞、基質和纖維構成。
軟骨細胞具有較強的再生能力,從(cong) 幼稚的細胞逐漸分化為(wei) 成熟的細胞,形成軟骨基質。軟骨細胞是一種位於(yu) 關(guan) 節軟骨中的特殊細胞,其主要職責是分泌II型膠原以及其他細胞外基質大分子。
人軟骨細胞特性
軟骨細胞存在於(yu) 關(guan) 節軟骨中,分泌II型膠原和其他細胞外基質大分子。
軟骨細胞的增殖和分化與(yu) 脊椎動物骨架的發育密切相關(guan) 。
軟骨細胞能夠分泌和響應生長因子,包括IGF-1和IL-1。
人軟骨細胞分離自軟骨組織,軟骨組織由軟骨細胞、基質及纖維構成。
軟骨細胞具有再生能力,從(cong) 幼稚細胞逐漸分化為(wei) 成熟的細胞。
軟骨組織可分為(wei) 透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種。
骨細胞位於(yu) 軟骨陷窩內(nei) ,形態呈橢圓形,細胞質內(nei) 含有脂滴。
成熟的軟骨細胞多分布於(yu) 軟骨陷窩內(nei) ,由同一個(ge) 母細胞分裂增殖而成。
人軟骨細胞參數表
細胞名稱 | 原代人軟骨細胞 |
細胞類型 | 軟骨細胞 (Chondrocyte) |
存在部位 | 人的關節組織 |
功能 | 分泌II型膠原和其它類型的膠原以及非膠原的細胞外基質大分子 |
生長因子 | 能分泌和響應包括IGF-1和IL-1在內的一係列生長因子 |
細胞鑒定 | Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)免疫熒光染色為陽性 |
細胞純度 | 高於90% |
汙染檢測 | 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
生長方式 | 長梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養 |
細胞形態 | 幼稚細胞呈橢圓形,長軸與(yu) 軟骨表麵平行; 成熟細胞體(ti) 積增大,呈圓形或卵圓形,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37℃ |
培養液 | kaiyun网站安全專用培養基 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內狀態最佳 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
凍存條件 | 90%FBS,DMSO 10%,或使用無血清凍存液 |
同源細胞群 | 由同一個母細胞分裂增殖而成,2-8個細胞成群分布於軟骨陷窩內 |
組織再生能力 | 強 |
研究應用 | 研究軟骨修複和關節炎病理的有用模型,研究細胞生理功能、藥物作用及各種致病因素作用下的病理生理改變 |
染色特點 | 細胞核染色淺,細胞質弱嗜堿性 |
電鏡特點 | 細胞有突起和皺褶,細胞質內含有粗麵內質網和發達的高爾基複合體,少量線粒體 |
培養教程
人軟骨細胞永生化複蘇步驟
解凍:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4 mL培養(yang) 基混合均勻。
離心:在1000 rpm條件下離心3分鍾,棄去上清液,加入1-2 mL培養(yang) 基後吹勻。
培養(yang) :將所有細胞懸液加入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜或加入6 cm皿中,培養(yang) 過夜。
換液:第二天換液並檢查細胞密度。
人軟骨細胞永生化傳代操作
消化:加入消化液(0.25% Trypsin-0.02% EDTA),37℃培養(yang) 箱中消化2-5分鍾。
觀察:在顯微鏡下觀察細胞消化情況。
停止消化:細胞脫落後,加入完全培養(yang) 基終止消化。
傳(chuan) 代:將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yang) 基的新皿中,或者瓶中培養(yang) 。
人軟骨細胞永生化凍存步驟
收集細胞:收集細胞及培養(yang) 液,裝入無菌離心管中,離心4分鍾。
清洗:用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
凍存:根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×10^6~1×10^7/mL,每支凍存管凍存1 mL細胞懸液,標識後放入-80℃冰箱,24小時後轉入液氮儲(chu) 存。
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參考文獻
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