SMMC-7721細胞（人肝癌細胞）

SMMC-7721細胞係由中國第二軍(jun) 醫大學的董榮春教授於(yu) 1977年建立，源自一名50歲男性原發性肝細胞癌患者的手術切除組織。SMMC-7721細胞係的建立旨在提供一個(ge) 穩定的肝癌研究模型。細胞通過靜置和旋轉管法培養(yang) ，經過約11天開始生長，23天後完成首次傳(chuan) 代並具備穩定的增殖能力。SMMC-7721細胞形態為(wei) 上皮樣，具有貼壁生長特性，增殖初期較慢，傳(chuan) 代後生長迅速且穩定。SMMC-7721細胞係在肝癌的基礎研究和藥物篩選中具有廣泛應用價(jia) 值。

SMMC-7721細胞特性特征

• 增殖特性：SMMC-7721細胞初代培養(yang) 時細胞增殖較慢，但在傳(chuan) 代後生長迅速且穩定。細胞呈上皮樣形態，具有貼壁生長的特性。
  

• 簇生長：SMMC-7721細胞在培養(yang) 中常表現為(wei) 簇生長現象。

• 生物標誌物：SMMC-7721細胞對甲胎蛋白（AFP）免疫熒光染色呈陽性，表明其與(yu) 肝癌相關(guan) 的特征。此外，LDH同工酶譜變化與(yu) 典型肝癌細胞一致。
  

• 基因表達：用Northern Blot方法未能檢測到SMMC-7721細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達，這可能與(yu) 其特定的分子機製有關(guan) 。

• SMMC-7721細胞在免疫缺陷小鼠體(ti) 內(nei) 具有較高的成瘤率，其腫瘤組織形態與(yu) 原手術標本相似。這表明該細胞係能夠有效模擬肝癌的生物學行為(wei) 。
  

• 在應激反應中，SMMC-7721細胞表現出與(yu) 多種應激原相關(guan) 的基因表達變化。研究發現，在不同應激條件下，有53個(ge) 基因的表達量顯著變化，其中17個(ge) 基因在G418和氯化鈣處理下表現出一致的變化趨勢。
  

SMMC-7721細胞參數表

SMMC-7721人肝癌細胞培養教程

SMMC7721細胞複蘇

• 在37℃水浴中預熱5 mL完全培養(yang) 基。
  

• 從(cong) 液氮中快速取出凍存的SMMC7721細胞，立即放入37℃水浴中輕輕搖晃以加速解凍（約1分鍾）。

• 將解凍的SMMC7721細胞轉移至15 mL離心管中，加入預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻，隨後在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清液。

• 用2 mL完全培養(yang) 基重懸細胞沉澱。

• 將重懸的SMMC7721細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 24小時後觀察SMMC7721細胞的貼壁情況，吸棄舊培養(yang) 基，加入新鮮預熱的完全培養(yang) 基。

SMMC7721細胞傳代

• 當SMMC7721細胞生長至80%-90%匯合度時，準備進行傳(chuan) 代。

• 吸棄舊培養(yang) 基，用1 mL無菌PBS洗滌細胞，以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基及血清。

• 加入1 mL 0.25%胰酶，放入37℃培養(yang) 箱消化1-2分鍾，觀察細胞皺縮並變圓。

• 加入1 mL完全培養(yang) 基終止消化，輕輕拍打使細胞脫落成單個(ge) 細胞懸液。

• 將細胞懸液收集於(yu) 15 mL無菌離心管中，在1000 rpm下離心5分鍾。

• 收集SMMC7721細胞沉澱，用適量的完全培養(yang) 基重懸，依據需要調整接種比例（如1:2），然後轉移至新的培養(yang) 瓶中。

SMMC7721細胞凍存

• 按照傳(chuan) 代方法收集SMMC7721細胞沉澱，並取少量用於(yu) 細胞計數。
  

• 用預冷的凍存液將細胞重懸，密度為(wei) 1×10^6 cells/mL。

• 將重懸的SMMC7721細胞分裝至1.2 mL凍存管中，並做好標記。

• 將凍存管放入程序凍存盒，置於(yu) -80℃過夜後，再轉入液氮進行長期保存。