
ECV304細胞(人膀胱癌細胞)
- 來源:膀胱癌
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:ECV304細胞的特性與(yu) 膀胱癌細胞(如T24細胞)相似
ECV304細胞係來源於(yu) 人臍靜脈內(nei) 皮細胞(HUVEC)自發轉化而來,通過深入的基因組分析,發現ECV304細胞係與(yu) T24膀胱癌細胞係在基因上高度一致,證實被膀胱癌細胞汙染。ECV304細胞被重新歸類為(wei) 膀胱癌細胞係,而不是內(nei) 皮細胞係。ECV304細胞最早源自一名82歲男性患者的膀胱癌組織,廣泛用於(yu) 膀胱癌的相關(guan) 研究中。
ECV304細胞(人膀胱癌細胞)參數表
細胞名稱 | ECV304細胞(人膀胱癌細胞) |
別稱 | ECV 304; ECV304; ECV; E304; T24(ECV304) |
細胞類型 | 人膀胱癌細胞係(汙染自人臍靜脈內皮細胞) |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
來源 | 一名82歲男性患者的膀胱癌組織 |
基因特征 | 與T24膀胱癌細胞係基因相同 |
培養基成分 | DMEM(高糖) + 10% 胎牛血清 + 1% 青黴素-鏈黴素 |
培養條件 | 37℃,5% CO₂ |
細胞密度 | 1×10^6 細胞/T25培養瓶 |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞生長狀況 | 生長良好,形態正常 |
運輸條件 | 冰袋避光發貨 |
注意事項 | 使用時應注意無菌操作,避免汙染 |
凍融注意 | 凍融後可能有少量絮狀物析出,但不影響正常使用 |
應用領域 | 膀胱癌研究、藥物篩選、細胞生物學研究 |
細胞特性 | 表達腫瘤相關抗原和生長因子受體 |
培養教程
ECV304人膀胱癌細胞培養教程
細胞複蘇步驟
細胞解凍: 從(cong) 液氮罐中取出凍存的ECV304細胞管,並立即置於(yu) 37℃的水浴中迅速解凍,直至細胞懸液完全融化。
細胞轉移: 使用無菌移液管,將融化後的細胞懸液緩慢移入含有10 ml預熱培養(yang) 基的15 ml離心管中。
細胞離心: 以200×g的速度離心5分鍾,棄去上清液。
細胞重懸: 使用5 ml新鮮培養(yang) 基重懸細胞,然後將細胞懸液接種到T25培養(yang) 瓶中,並加入足夠的培養(yang) 基,使總體(ti) 積達到10 ml。
細胞培養(yang) : 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。
細胞傳代步驟
細胞匯合狀態: 當細胞貼壁生長至80-90%匯合時,棄去舊的培養(yang) 基,用PBS溶液衝(chong) 洗細胞1-2次。
消化細胞: 加入2-3 ml 0.25%胰酶-EDTA溶液,並在37℃孵育2-3分鍾,直至細胞脫落。
終止消化: 加入5 ml培養(yang) 基終止消化反應,並輕輕吹打以使細胞懸浮均勻。
細胞離心: 以200×g的速度離心5分鍾,棄去上清液。
細胞重懸與(yu) 傳(chuan) 代: 用5 ml新鮮培養(yang) 基重懸細胞,並按1:3或1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。根據細胞密度,加入適量培養(yang) 基。
細胞培養(yang) : 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
細胞培養周期與注意事項
培養(yang) 周期: ECV304細胞的培養(yang) 周期通常為(wei) 2-3天,具體(ti) 周期取決(jue) 於(yu) 細胞的生長狀態和密度。在細胞生長至80-90%匯合時,應進行傳(chuan) 代。複蘇後的細胞通常需要約24小時的適應期,之後進入正常的生長階段。
傳(chuan) 代頻率: 細胞狀態應每2-3天檢查一次,確保在達到適宜的匯合度時及時傳(chuan) 代。
生長條件: ECV304細胞在適宜的培養(yang) 條件下生長迅速,形態穩定,表現出良好的細胞分裂與(yu) 增殖速度。
培養(yang) 基更換: 培養(yang) 基應每2-3天更換一次,以保證細胞的生長環境清潔。
無菌操作: 傳(chuan) 代和培養(yang) 過程需嚴(yan) 格遵循無菌操作規範,避免細胞汙染。
細胞凍存: 使用含10% DMSO的凍存液進行細胞凍存,以確保細胞的長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 10,14 (DSMZ=ACC-310) |
14 (CLS=300452; PubMed=11416159) | |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 16,18 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29 |
FGA | 17,22 |
Penta D | 11,15 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 |
參考文獻
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