
BIU-87細胞(人膀胱癌細胞)
- 來源:膀胱癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:凝集反應:對ConA、WGA、PSL均有反應
BIU-87細胞係是由俞莉章等研究人員於(yu) 1989年建立,來源於(yu) 一位男性膀胱癌患者的膀胱乳頭狀移行上皮癌。
BIU-87細胞的群體(ti) 倍增時間為(wei) 34小時,並能夠在軟瓊脂中生長。BIU-87細胞係主要用於(yu) 研究膀胱癌的生物學特性和藥物抗性,特別是在癌症研究領域。
BIU-87細胞特性特征
克隆形成能力:BIU87細胞能夠在軟瓊脂上生長,克隆形成率為(wei) 23%。
BIU87細胞以0.2 mL的接種體(ti) 積,將約5×10^8個(ge) 細胞注射至裸鼠皮下,表現出明顯的進行性腫瘤生長特征。
凝集反應:對ConA、WGA和PSL等有凝集反應,顯示出特定的細胞表麵特征。
潛在汙染:根據EXPASY細胞庫的信息,BIU87細胞係可能存在錯誤識別或汙染的情況,似乎被非人細胞汙染(PubMed=2616706),使用時需謹慎。
BIU-87細胞參數表
細胞名稱 | BIU-87細胞(人膀胱癌細胞) |
別稱 | BIU87 |
種屬來源 | 人類 |
組織來源 | 膀胱乳頭狀移行上皮癌 |
建立信息 | 1989年俞莉章等 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時間 | 約34小時(22代群體) |
克隆形成率 | 23%(在軟瓊脂上生長) |
凝集反應 | 對ConA、WGA、PSL均有凝集反應 |
生物安全等級 | 1 |
支原體檢測 | 陰性 |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2 - 1:3 |
推薦換液頻率 | 2 - 3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO;儲存於液氮中 |
培養條件 | 溫度:37℃,氣相:95%空氣 + 5% CO2 |
保藏機構 | KCB; KCB 2006103YJ |
應用領域 | 膀胱癌生物學特性研究、藥物抗性研究、細胞增殖與凋亡實驗 |
培養教程
BIU-87人膀胱癌細胞培養教程
BIU-87細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出凍存的BIU-87細胞管,迅速將其置於(yu) 37℃的水浴中,輕輕搖動,直至BIU-87細胞完全解凍。
準備4 mL預熱的RPMI-1640培養(yang) 基(含10%胎牛血清FBS和1%青黴素/鏈黴素P/S),以便複蘇BIU-87細胞。
將解凍後的BIU-87細胞懸液小心轉移到含有4 mL培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻以減少BIU-87細胞的損傷(shang) 。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹打以使BIU-87細胞均勻分散。
將BIU-87細胞懸液轉移到培養(yang) 瓶中,或將其分布在10 cm培養(yang) 皿中,並添加約8 mL培養(yang) 基。將BIU-87細胞置於(yu) 37℃、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
第二天觀察BIU-87細胞狀態,若BIU-87細胞密度達到80%-90%,即可進行傳(chuan) 代。
BIU-87細胞傳代培養
準備不含鈣、鎂離子的PBS溶液和消化液(0.25%胰蛋白酶與(yu) 0.53 mM EDTA的混合溶液),以便傳(chuan) 代BIU-87細胞。
棄去培養(yang) 瓶中的BIU-87細胞培養(yang) 基,用PBS潤洗BIU-87細胞1-2次以去除殘留的培養(yang) 基。
向培養(yang) 瓶中加入1 mL消化液,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,直至BIU-87細胞大部分變圓並開始脫落。
輕輕敲擊培養(yang) 瓶壁,隨後加入少量培養(yang) 基中和胰蛋白酶的作用。
將BIU-87細胞懸液轉移至離心管中,以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹打混勻BIU-87細胞。
將BIU-87細胞懸液按1:2的比例分配至新的培養(yang) 瓶中,補加8 mL培養(yang) 基,繼續在37℃、5% CO2環境中培養(yang) 。
BIU-87細胞凍存
待BIU-87細胞生長良好,達到80%-90%匯合時,可進行BIU-87細胞凍存準備。
棄去培養(yang) 基,用PBS洗滌BIU-87細胞,加入1 mL胰蛋白酶消化液,待BIU-87細胞變圓脫落後,立即加入含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。
以1000 RPM離心4分鍾,棄去上清液。
加入適量的FBS,將BIU-87細胞重懸至適當密度(一般為(wei) 1×10^6 BIU-87細胞/mL),隨後加入DMSO使其終濃度達到10%。
每支凍存管分裝1 mL BIU-87細胞懸液,做好標識後,將BIU-87細胞凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80℃冰箱中預凍2小時後轉入液氮中長期保存。
研究應用與注意事項
凝集反應的研究:
BIU-87細胞對凝集素ConA、WGA和PSL有反應,這一特性可用於(yu) BIU-87細胞特性的鑒定,特別是在膀胱癌的生物學研究中,有助於(yu) 分析BIU-87細胞的黏附性、遷移能力及侵襲性。
藥物篩選與(yu) 抗性研究:
通過觀察BIU-87細胞在藥物處理後的凝集反應變化,可以評估藥物對BIU-87細胞增殖和生存的影響,進而用於(yu) 潛在抗癌藥物的篩選。
分子機製探索:
研究BIU-87細胞的凝集反應,有助於(yu) 揭示BIU-87細胞表麵糖蛋白與(yu) 糖脂的相互作用,以及這些分子在腫瘤微環境中的作用。
無菌操作:
在進行所有BIU-87細胞實驗操作時,應確保無菌條件,以避免BIU-87細胞汙染。
定期檢查細胞狀態:
經常觀察BIU-87細胞生長狀況,及時進行BIU-87細胞傳(chuan) 代和BIU-87細胞凍存,以保持BIU-87細胞活性和實驗一致性。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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