RT4細胞（人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞）

RT4人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞係是從(cong) 63歲白人男性移行細胞乳頭狀瘤患者膀胱組織中分離出的上皮形態細胞，用於(yu) 研究膀胱癌及免疫腫瘤學。移行細胞乳頭瘤是膀胱癌的一個(ge) 亞(ya) 型，起源於(yu) 上皮細胞。

RT4細胞係具有非整倍體(ti) 的男性染色體(ti) 模式，染色體(ti) 數量模態數為(wei) 49，範圍為(wei) 42至55。盡管細胞的染色體(ti) 計數接近二倍體(ti) ，但在個(ge) 別傳(chuan) 代中可能會(hui) 觀察到占主導地位的近四倍體(ti) 細胞群。48號和49號核型具有一條X和一條Y染色體(ti) ，而高倍性核型中則包含兩(liang) 條X和一條Y染色體(ti) 。研究還發現四種標記染色體(ti) ：del(6)(q21)、del(10)(p11)、14p+、12p+。但在高倍性中期製備的核型中，未發現標記染色體(ti) M4。

RT4細胞特性特征

• 致瘤性：RT4細胞在類固醇處理過的倉(cang) 鼠的頰囊中形成腫瘤。

• 抗原表達：HLA A25（10）、A3、B12、Cw3；O型血。

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1-2；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1-2；PGM3，1-2。

• RT4細胞表達多種上皮細胞特異性標誌物，包括細胞角蛋白（cytokeratins）和上皮細胞粘附分子（EpCAM）。
  

• RT4細胞表達表皮生長因子受體(ti) （EGFR）和其他與(yu) 細胞增殖相關(guan) 的受體(ti) 。

• RT4細胞表達多種細胞粘附分子，如E-鈣粘蛋白（E-cadherin），這與(yu) 其上皮細胞特性一致。

• 分化程度：RT4細胞是一種高分化的膀胱癌細胞係，保留了許多正常膀胱上皮細胞的特征。

• 侵襲性：相比其他膀胱癌細胞係，RT4細胞表現出較低的侵襲性和轉移潛能。

• 藥物敏感性：由於(yu) 其高分化特性，RT4細胞對某些化療藥物可能表現出較高的敏感性。

• 細胞極性：RT4細胞保持了一定程度的細胞極性。

RT4細胞參數表

RT4人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞培養教程

RT4細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出凍存的RT4細胞，迅速放入37°C水浴中解凍。

• 將解凍後的RT4細胞懸液轉移到含有預熱完全培養(yang) 基的離心管中。

• 在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清液。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸RT4細胞，然後轉移到培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) RT4細胞。

RT4細胞傳代

• 當RT4細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去舊培養(yang) 基，並用PBS緩衝(chong) 液輕輕衝(chong) 洗RT4細胞1-2次。

• 加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C下消化2-3分鍾。

• 觀察RT4細胞在顯微鏡下變圓並開始脫落時，加入含血清的完全培養(yang) 基終止消化。

• 吹打RT4細胞懸液，收集到離心管中。

• 在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸RT4細胞，並以1:2或1:3的比例接種到新的培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱繼續培養(yang) RT4細胞。

RT4細胞換液

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基：棄去舊培養(yang) 基，加入預熱的新鮮完全培養(yang) 基以確保RT4細胞的健康生長。

RT4細胞凍存

• 製備凍存液：90%胎牛血清加10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO）。

• 收集對數生長期的RT4細胞。

• 在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清。

• 用凍存液重懸RT4細胞，將密度調整至1-2×10^6個(ge) 細胞/mL。

• 將RT4細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 將凍存管放入程序降溫盒中，於(yu) -80°C冰箱中存放過夜。

• 次日將RT4細胞凍存管轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• 保持無菌操作以防止RT4細胞汙染。

• 定期檢查RT4細胞的形態和生長狀況。

• 避免RT4細胞過度生長或密度過高。

• 使用前請仔細閱讀RT4細胞說明書(shu) ，了解具體(ti) 的培養(yang) 條件和操作要求。

維持RT4細胞培養環境穩定的方法

• 使用適合RT4細胞的培養(yang) 基，確保其含有所有必要的營養(yang) 成分。

• 確保培養(yang) 箱的溫度、濕度和CO2濃度穩定，適合RT4細胞生長。

• 定期更換RT4細胞培養(yang) 基，以確保營養(yang) 供應和代謝廢物的清除。

• 在RT4細胞密度達到80-90%時及時進行傳(chuan) 代，避免過度擁擠。

RT4細胞培養常見問題及解決方案

• 生長緩慢：可能是由於(yu) 培養(yang) 基成分不適合、溫度或CO2濃度不正確、或RT4細胞接種密度過低。應調整這些條件。

• 細胞貼壁不良：可能由於(yu) 培養(yang) 基表麵處理不當或胰蛋白酶消化時間過長。確保培養(yang) 基的質量和適當的消化時間適合RT4細胞。

• 細胞形態異常：可能由於(yu) 培養(yang) 環境不適、汙染或RT4細胞老化。需檢查培養(yang) 條件和防止汙染。

• 細胞汙染：細菌、真菌或支原體(ti) 汙染可導致培養(yang) 基渾濁或pH變化。嚴(yan) 格的無菌操作和定期檢查培養(yang) 基的清澈度是防止RT4細胞汙染的關(guan) 鍵。

• 細胞脫落：可能是由於(yu) 培養(yang) 基pH異常或機械損傷(shang) 。確保適當的培養(yang) 基pH和操作溫和以保持RT4細胞的貼壁。

• 細胞分化和傳(chuan) 代困難：長期培養(yang) 可能導致RT4細胞特性改變，影響實驗結果。保持適當的傳(chuan) 代頻率和胰蛋白酶濃度可改善此問題。