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UM-UC-3細胞(人膀胱移行細胞癌細胞)貨號:STM-CL-5345 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

UM-UC-3細胞(人膀胱移行細胞癌細胞)

  • 來源:膀胱;疾病:移行細胞癌
  • 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:MEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:基因突變:可能包含TP53、FGFR3等突變
Tags: 膀胱移行細胞癌細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,350.00
提供STR鑒定報告

UM-UC-3細胞係是源自一名男性膀胱移行細胞癌患者的膀胱組織,UMUC3細胞是膀胱癌的肌層浸潤性細胞係。

UM-UC-3細胞係是超三倍體(ti) 的,模式染色體(ti) 數為(wei) 80,約42%的細胞顯示此特征。部分細胞具有78條染色體(ti) 的特征也較為(wei) 常見,且倍性較高的細胞占比達到2.5%。每個(ge) 細胞通常含有30條或更多的標記染色體(ti) ,包括但不限於(yu) der(1)t(1;?)(p32;?)、t(1p5p)、i(3q)、t(7q14q)以及t(2p3p)等。此外,X和N3染色體(ti) 在每個(ge) 細胞中各有一份,而其他染色體(ti) 則常以兩(liang) 至三個(ge) 拷貝存在。

致瘤性:在皮下接種10(7)個(ge) 細胞的裸鼠中形成腫瘤,腫瘤在21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)發展。

UM-UC-3細胞參數表

細胞名稱UM-UC-3細胞(人膀胱移行細胞癌細胞)
別稱UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3
種屬來源人(Homo sapiens)
組織來源膀胱移行細胞癌
供體信息成年男性
細胞形態上皮細胞樣
生長特性貼壁生長
細胞代數10代以內
生物安全1級
支原體檢測
保藏機構ATCC: CRL-1749, ECACC: 96020936, 中國科學院分子細胞科學卓越創新中心
核型超三倍體,42%的細胞染色體數為80,78也有較高出現頻率
基因突變可能包含TP53、FGFR3等突變(具體需基因測序確認)
培養基DMEM 或 MEM + 10% FBS + 1% 青黴素-鏈黴素或 1X 非必需氨基酸
培養環境37°C, 5% CO2, 飽和濕度
傳代比例1:2至1:3,每3-4天
消化0.25% 胰蛋白酶-EDTA,37°C消化2-3分鍾
凍存液基礎培養基 + 5% DMSO + 10% FBS 或 20% FBS
凍存密度1-2 × 10^6 cells/mL
儲存溫度液氮氣相
解凍方式37°C水浴快速解凍
接種密度不低於3 × 10^4 cells/cm^2
倍增時間約24-30小時(需實驗確認)
貼壁時間48-72小時(傳代後不建議移動)
成瘤性在裸鼠中100%成瘤
主要用途膀胱癌研究、藥物篩選、信號通路研究
無菌檢測細菌、真菌、支原體檢測陰性
病毒檢測HIV、HBV、HCV檢測陰性
質量控製細胞活力 ≥85%;細胞純度 ≥98%;細胞代數 ≤10代
包裝規格1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管
貨期現貨,約1周
運輸方式複蘇狀態(T25瓶)或凍存狀態(幹冰)
應用範圍僅限科學研究,不可用於臨床
培養注意貼壁和形態展開較慢,傳代後48小時內避免移動
培養技巧平躺培養以增大空氣交換麵積,液體高度不超過3mm,T25培養瓶加6-8ml培養基,T75培養瓶加15ml左右培養基

培養教程

UM-UC-3人膀胱移行細胞癌細胞培養教程

  • 準備工作:預熱培養(yang) 基至37°C、準備0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液。

  • 細胞消化:吸去舊的培養(yang) 基、使用PBS輕輕衝(chong) 洗UMUC3細胞。

  • 添加適量的0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C孵育2-3分鍾,觀察UMUC3細胞開始脫落。


  • 終止消化

  • 添加含10% FBS的培養(yang) 基以終止消化。

  • 輕輕吹打細胞懸液,使UMUC3細胞完全脫落。


  • 細胞收集

  • 將細胞懸液轉移至離心管中,1000 rpm離心5分鍾。

  • 吸去上清,加入新鮮培養(yang) 基重懸UMUC3細胞。


  • 細胞接種

  • 按所需傳(chuan) 代比例(1:2至1:3)接種UMUC3細胞至新培養(yang) 瓶中。

  • 加入適量培養(yang) 基(T25瓶中添加6-8 mL,T75瓶中添加15 mL)。

  • 培養(yang) :將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) UMUC3細胞。

UMUC3細胞凍存方法

  • 準備工作:預冷凍存液(基礎培養(yang) 基 + 5% DMSO + 10% FBS或20% FBS)至4°C。

  • 細胞收集:按傳(chuan) 代方法步驟1-4收集UMUC3細胞。

  • 細胞重懸:用預冷的凍存液重懸UMUC3細胞,細胞密度約為(wei) 1-2 × 10^6 cells/mL。

  • 分裝:將細胞懸液分裝到凍存管中,每管1 mL。

  • 程序降溫:將凍存管放入程序降溫盒中,以-1°C/min的速度降溫至-80°C。

  • 長期儲(chu) 存:將凍存管轉移至液氮氣相中進行長期保存UMUC3細胞。

UMUC3細胞複蘇步驟

  • 解凍:將凍存管從(cong) 液氮中取出,立即放入37°C水浴中快速解凍,輕輕搖動。


  • 接種

  • 解凍後,將UMUC3細胞懸液轉移至含10 mL培養(yang) 基的離心管中,1000 rpm離心5分鍾。

  • 吸去上清,加入新鮮培養(yang) 基重懸UMUC3細胞。


  • 培養(yang)

  • 將細胞懸液接種至培養(yang) 瓶中,添加適量培養(yang) 基。

  • 將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中繼續培養(yang) UMUC3細胞。

保持UMUC3細胞培養基的新鮮度

  • 現配培養(yang) 基

  • 盡量現配UMUC3細胞培養(yang) 基,避免長時間儲(chu) 存。配好的培養(yang) 基應在兩(liang) 周內(nei) 使用完畢,因為(wei) 某些成分(如葉酸)在長時間儲(chu) 存中會(hui) 分解。

  • 小批量配製UMUC3細胞培養(yang) 基以減少浪費。


  • 儲(chu) 存條件

  • 配製好的UMUC3細胞培養(yang) 基應儲(chu) 存在4°C冰箱中,避免反複凍融。

  • 對於(yu) 光敏感成分,應使用遮光瓶或將瓶子包裹在鋁箔中儲(chu) 存。


  • 無菌操作

  • 在無菌條件下配製和分裝UMUC3細胞培養(yang) 基,使用無菌過濾器(0.22μm)過濾以去除可能的汙染物。

  • 使用無菌容器儲(chu) 存UMUC3細胞培養(yang) 基,防止二次汙染。


  • 定期更換

  • 即使UMUC3細胞培養(yang) 基沒有變黃,也應每2-3天更換一次,以保證細胞獲得足夠的新鮮營養(yang) 。

  • 換液時,輕輕側(ce) 過培養(yang) 瓶/皿,避免細胞飄起,用巴氏吸管輕輕吸取部分上清棄去,然後補加等體(ti) 積的新鮮UMUC3細胞培養(yang) 基。


  • 使用前預熱

  • 使用前將UMUC3細胞培養(yang) 基預熱至37°C,以避免對細胞的溫度衝(chong) 擊。


  • 添加劑的穩定性

  • 某些添加劑如抗生素、非必需氨基酸應在使用前新鮮加入UMUC3細胞培養(yang) 基中,避免長期儲(chu) 存導致活性下降。


  • 培養(yang) 基標記

  • 每次配製UMUC3細胞培養(yang) 基時,在瓶子上標記配製日期和有效期,確保在有效期內(nei) 使用。

相關資料

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STR鑒定及相關

AmelogeninX
CSF1PO10 (ECACC=96020936; PubMed=25877200; PubMed=27270441)
10,11 (ATCC=CRL-1749; Cosmic-CLP=724838)
D2S133823
D3S135817,18
D5S81812
D7S8208,9 (ATCC=CRL-1749; Cosmic-CLP=724838; ECACC=96020936; PubMed=25877200)
9 (PubMed=27270441)
D8S117913
D13S3178
D16S5398,9
D18S5114
D19S43314,15
D21S1131
FGA20,21
Penta D13
Penta E12
TH016,9
TPOX10
vWA17

參考文獻

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