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mv411細胞 (人髓性單核細胞白血病細胞)貨號:STM-CL-5239 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

mv411細胞 (人髓性單核細胞白血病細胞)

  • 來源:雙表型B粒單核細胞白血病患者;外周血
  • 細胞特征:懸浮細胞, 淋巴母細胞樣
  • 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:IMDM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:G-CSF與(yu) GM-CSF協同促進細胞增殖,單獨使用G-CSF會(hui) 引起瞬時刺激。
Tags: 白血病細胞     單核細胞    
相關(guan) 附件下載:
價(jia) 格:¥ 1,450.00
提供STR鑒定報告

mv411細胞係由Rovera課題組建立,來源於(yu) 一名10歲男性患者的外周血(患者被診斷為(wei) 雙表型B粒單核細胞白血病),這是一種罕見的白血病類型。細胞最初由Wistar研究所分離並建立細胞係。

mv411細胞的核型為(wei) 48,XY,t(4;11)(q21;q23),+8,+19。mv411細胞呈淋巴細胞狀,懸浮生長,主要用於(yu) 癌症和免疫學研究。

mv411細胞特性

  • mv411細胞來源於(yu) 一名10歲男孩的外周血,患有雙表型B型骨髓單核細胞白血病。

  • mv411細胞用於(yu) 癌症和免疫學研究。

  • mv411細胞生長必須有生長因子,特別是GM-CSF。

  • IL-3可獨立支持細胞長期生長,但在GM-CSF存在時會(hui) 抑製細胞增殖。

  • G-CSF與(yu) GM-CSF協同促進細胞增殖,單獨使用G-CSF會(hui) 引起瞬時刺激。

  • mv411細胞可在不添加生長因子的10%FBS培養(yang) 基中生長。

  • 抗原表達:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。

  • 基因表達:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。

  • mv411細胞形態呈淋巴細胞狀,懸浮生長。

mv411細胞參數表

細胞名稱mv411細胞 (人髓性單核細胞白血病細胞)
細胞別稱MV-4-11; MV-4:11; MV4:11; MV4; 11; MV4; 11; MV411; MV(4; 11); MV4II
種屬來源
年齡性別10歲男性
組織來源外周血
細胞類型雙表型B粒單核細胞白血病
生長特性懸浮生長
細胞形態淋巴母細胞樣
細胞代數10代以內
染色體數目48,近二倍體
遺傳學特征

基因突變:MLL-AF4融合基因;

染色體(ti) 異常:t(4;11)(q21;q23)

表麵標記

CD抗原:CD4+, CD10+, CD13+, CD15+, CD19+, CD33+, CD38+, HLA-DR+;

其他標記:TdT+, cyCD79a+

推薦培養基IMDM + 10% FBS + 1% PS+10% 胎牛血清+1% 慶大黴素-兩性黴素B混合溶液
培養環境37°C,5% CO2,95%空氣
傳代密度80%-90%,比例1:2至1:3,頻率每周約3次
凍存條件基礎培養基 + 5% DMSO + 20% FBS
細胞密度維持在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL
細胞倍增時間約50-60小時
生長因子響應IL-3, G-CSF, GM-CSF對生長有促進作用
流式檢測可提供流式染色檢測報告
支原體檢測陰性
生物安全等級1級
保藏機構ATCC (CRL-9591); DSMZ (ACC-102)
應用領域癌症研究,白血病研究,免疫學研究,藥物篩選
特殊用途MLL重排白血病模型,抗白血病藥物研究
注意事項
  1. 懸浮細胞,收集時需離心,不可直接倒掉培養(yang) 液;

  2. 僅(jin) 限科研使用,不可用於(yu) 臨(lin) 床;

  3. 細胞對IL-3敏感,低濃度可能抑製生長

背景簡介由Rovera課題組建立,來源於雙表型B粒單核細胞白血病患者
相關文獻Lange B, et al. Blood. 1987;70(1):192-199.

培養教程

mv411人髓性單核細胞白血病細胞培養教程

MV-411細胞複蘇步驟

  • 解凍細胞: 從(cong) 液氮中取出凍存的MV-411細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。

  • 離心: 解凍後立即將MV-411細胞懸液轉移到含15mL預熱培養(yang) 基的50mL離心管中,800g離心5分鍾,棄上清。

  • 重懸: 用5mL新鮮培養(yang) 基重懸MV-411細胞。

  • 培養(yang) : 將細胞懸液轉移到25cm²培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

MV-411細胞日常培養管理

  • 觀察細胞狀態: 每2-3天觀察MV-411細胞狀態,計數細胞密度。

  • 維持細胞密度: 保持MV-411細胞密度在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL之間。

  • 傳(chuan) 代: 當MV-411細胞密度達到1.5 x 10^6 cells/mL時進行傳(chuan) 代。

MV-411細胞傳代步驟

  • 均勻分散: 輕輕搖晃培養(yang) 瓶,使MV-411細胞均勻分散。

  • 稀釋: 取適量MV-411細胞懸液,用新鮮培養(yang) 基稀釋至0.5 x 10^6 cells/mL。

  • 轉移: 將稀釋後的MV-411細胞懸液轉移到新的培養(yang) 瓶中。

MV-411細胞換液步驟

  • 離心: 每3-4天更換一次培養(yang) 基,800g離心5分鍾,棄上清。

  • 重懸: 用等體(ti) 積新鮮預熱培養(yang) 基重懸MV-411細胞。

MV-411細胞凍存步驟

  • 準備凍存液: 90% FBS + 10% DMSO。

  • 收集細胞: 收集對數生長期的MV-411細胞,計數。

  • 離心: 800g離心5分鍾,棄上清。

  • 重懸: 用冷的凍存液重懸MV-411細胞,調整密度至5-10 x 10^6 cells/mL。

  • 分裝: 將MV-411細胞懸液分裝到凍存管中,每管1mL。

  • 降溫: 使用程序降溫盒,以-1°C/分鍾的速率降至-80°C。

  • 長期保存: 24小時後轉移到液氮中長期保存。

MV-411細胞培養注意事項

  • 所有操作均需在無菌條件下進行。

  • MV-411細胞對IL-3敏感,低濃度可能抑製生長,使用時需注意。

  • 定期檢測MV-411細胞是否有支原體(ti) 汙染。

  • 建議每3-4個(ge) 月進行一次STR鑒定,確保MV-411細胞係純度。

常見問題及MV-411細胞培養解決方案

MV-411細胞生長緩慢或停滯

  1. 原因:培養(yang) 基不適合或營養(yang) 不足、細胞密度過低或過高、培養(yang) 環境不適宜(溫度、CO2濃度等)。

  2. 解決(jue) 方法:檢查並更換新鮮培養(yang) 基,調整MV-411細胞密度至適宜範圍,確保培養(yang) 箱溫度和CO2濃度正確。

MV-411細胞汙染

  1. 原因:操作不當導致細菌或真菌汙染、試劑或器材未經充分消毒。

  2. 解決(jue) 方法:嚴(yan) 格遵守無菌操作規程,定期檢查並更換抗生素,對可疑試劑或器材進行消毒或更換。

MV-411細胞形態異常

  • 原因:細胞老化或過度傳(chuan) 代、培養(yang) 基成分不適合。

  • 解決(jue) 方法:使用低代次MV-411細胞重新培養(yang) ,嚐試更換或優(you) 化培養(yang) 基配方。

MV-411細胞貼壁不良(貼壁細胞)

  • 原因:培養(yang) 瓶表麵處理不當、MV-411細胞活性降低。

  • 解決(jue) 方法:使用經過適當處理的培養(yang) 瓶,提高接種密度或添加細胞外基質蛋白。

MV-411細胞死亡率高

  • 原因:MV-411細胞解凍或傳(chuan) 代操作不當、培養(yang) 環境應激(如pH值異常、滲透壓不適)。

  • 解決(jue) 方法:優(you) 化MV-411細胞解凍和傳(chuan) 代流程,調整培養(yang) 基pH值,確保滲透壓適宜。

MV-411細胞分化或表型改變

  • 原因:培養(yang) 條件不適合維持MV-411細胞特性、細胞代次過高。

  • 解決(jue) 方法:優(you) 化培養(yang) 條件,添加必要的生長因子,使用低代次MV-411細胞重新培養(yang) ,定期進行細胞特性鑒定。

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STR鑒定及相關

AmelogeninX,Y
CSF1PO10,12
D2S133824,25
D3S135816,17
D5S81811,12
D7S8208,9
D8S117913
D13S31713
D16S53911,12
D18S5111,17
D19S43315
D21S1132 (DSMZ=ACC-102)
32,32.2 (ATCC=CRL-9591; CLS=300295; COG; PubMed=25877200)
32.2 (PubMed=20922763)
FGA19,21
Penta D9,10
Penta E7,18
TH018,9.3
TPOX8,11
vWA14,15

參考文獻

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