
mv411細胞係由Rovera課題組建立,來源於(yu) 一名10歲男性患者的外周血(患者被診斷為(wei) 雙表型B粒單核細胞白血病),這是一種罕見的白血病類型。細胞最初由Wistar研究所分離並建立細胞係。
mv411細胞的核型為(wei) 48,XY,t(4;11)(q21;q23),+8,+19。mv411細胞呈淋巴細胞狀,懸浮生長,主要用於(yu) 癌症和免疫學研究。
mv411細胞特性
mv411細胞來源於(yu) 一名10歲男孩的外周血,患有雙表型B型骨髓單核細胞白血病。
mv411細胞用於(yu) 癌症和免疫學研究。
mv411細胞生長必須有生長因子,特別是GM-CSF。
IL-3可獨立支持細胞長期生長,但在GM-CSF存在時會(hui) 抑製細胞增殖。
G-CSF與(yu) GM-CSF協同促進細胞增殖,單獨使用G-CSF會(hui) 引起瞬時刺激。
mv411細胞可在不添加生長因子的10%FBS培養(yang) 基中生長。
抗原表達:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。
基因表達:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。
mv411細胞形態呈淋巴細胞狀,懸浮生長。
mv411細胞參數表
細胞名稱 | mv411細胞 (人髓性單核細胞白血病細胞) |
細胞別稱 | MV-4-11; MV-4:11; MV4:11; MV4; 11; MV4; 11; MV411; MV(4; 11); MV4II |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 10歲男性 |
組織來源 | 外周血 |
細胞類型 | 雙表型B粒單核細胞白血病 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態 | 淋巴母細胞樣 |
細胞代數 | 10代以內 |
染色體數目 | 48,近二倍體 |
遺傳學特征 | 基因突變:MLL-AF4融合基因; 染色體(ti) 異常:t(4;11)(q21;q23) |
表麵標記 | CD抗原:CD4+, CD10+, CD13+, CD15+, CD19+, CD33+, CD38+, HLA-DR+; 其他標記:TdT+, cyCD79a+ |
推薦培養基 | IMDM + 10% FBS + 1% PS+10% 胎牛血清+1% 慶大黴素-兩性黴素B混合溶液 |
培養環境 | 37°C,5% CO2,95%空氣 |
傳代 | 密度80%-90%,比例1:2至1:3,頻率每周約3次 |
凍存條件 | 基礎培養基 + 5% DMSO + 20% FBS |
細胞密度 | 維持在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL |
細胞倍增時間 | 約50-60小時 |
生長因子響應 | IL-3, G-CSF, GM-CSF對生長有促進作用 |
流式檢測 | 可提供流式染色檢測報告 |
支原體檢測 | 陰性 |
生物安全等級 | 1級 |
保藏機構 | ATCC (CRL-9591); DSMZ (ACC-102) |
應用領域 | 癌症研究,白血病研究,免疫學研究,藥物篩選 |
特殊用途 | MLL重排白血病模型,抗白血病藥物研究 |
注意事項 |
|
背景簡介 | 由Rovera課題組建立,來源於雙表型B粒單核細胞白血病患者 |
相關文獻 | Lange B, et al. Blood. 1987;70(1):192-199. |
培養教程
mv411人髓性單核細胞白血病細胞培養教程
MV-411細胞複蘇步驟
解凍細胞: 從(cong) 液氮中取出凍存的MV-411細胞,迅速置於(yu) 37°C水浴中解凍。
離心: 解凍後立即將MV-411細胞懸液轉移到含15mL預熱培養(yang) 基的50mL離心管中,800g離心5分鍾,棄上清。
重懸: 用5mL新鮮培養(yang) 基重懸MV-411細胞。
培養(yang) : 將細胞懸液轉移到25cm²培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
MV-411細胞日常培養管理
觀察細胞狀態: 每2-3天觀察MV-411細胞狀態,計數細胞密度。
維持細胞密度: 保持MV-411細胞密度在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL之間。
傳(chuan) 代: 當MV-411細胞密度達到1.5 x 10^6 cells/mL時進行傳(chuan) 代。
MV-411細胞傳代步驟
均勻分散: 輕輕搖晃培養(yang) 瓶,使MV-411細胞均勻分散。
稀釋: 取適量MV-411細胞懸液,用新鮮培養(yang) 基稀釋至0.5 x 10^6 cells/mL。
轉移: 將稀釋後的MV-411細胞懸液轉移到新的培養(yang) 瓶中。
MV-411細胞換液步驟
離心: 每3-4天更換一次培養(yang) 基,800g離心5分鍾,棄上清。
重懸: 用等體(ti) 積新鮮預熱培養(yang) 基重懸MV-411細胞。
MV-411細胞凍存步驟
準備凍存液: 90% FBS + 10% DMSO。
收集細胞: 收集對數生長期的MV-411細胞,計數。
離心: 800g離心5分鍾,棄上清。
重懸: 用冷的凍存液重懸MV-411細胞,調整密度至5-10 x 10^6 cells/mL。
分裝: 將MV-411細胞懸液分裝到凍存管中,每管1mL。
降溫: 使用程序降溫盒,以-1°C/分鍾的速率降至-80°C。
長期保存: 24小時後轉移到液氮中長期保存。
MV-411細胞培養注意事項
所有操作均需在無菌條件下進行。
MV-411細胞對IL-3敏感,低濃度可能抑製生長,使用時需注意。
定期檢測MV-411細胞是否有支原體(ti) 汙染。
建議每3-4個(ge) 月進行一次STR鑒定,確保MV-411細胞係純度。
常見問題及MV-411細胞培養解決方案
MV-411細胞生長緩慢或停滯
原因:培養(yang) 基不適合或營養(yang) 不足、細胞密度過低或過高、培養(yang) 環境不適宜(溫度、CO2濃度等)。
解決(jue) 方法:檢查並更換新鮮培養(yang) 基,調整MV-411細胞密度至適宜範圍,確保培養(yang) 箱溫度和CO2濃度正確。
MV-411細胞汙染
原因:操作不當導致細菌或真菌汙染、試劑或器材未經充分消毒。
解決(jue) 方法:嚴(yan) 格遵守無菌操作規程,定期檢查並更換抗生素,對可疑試劑或器材進行消毒或更換。
MV-411細胞形態異常
原因:細胞老化或過度傳(chuan) 代、培養(yang) 基成分不適合。
解決(jue) 方法:使用低代次MV-411細胞重新培養(yang) ,嚐試更換或優(you) 化培養(yang) 基配方。
MV-411細胞貼壁不良(貼壁細胞)
原因:培養(yang) 瓶表麵處理不當、MV-411細胞活性降低。
解決(jue) 方法:使用經過適當處理的培養(yang) 瓶,提高接種密度或添加細胞外基質蛋白。
MV-411細胞死亡率高
原因:MV-411細胞解凍或傳(chuan) 代操作不當、培養(yang) 環境應激(如pH值異常、滲透壓不適)。
解決(jue) 方法:優(you) 化MV-411細胞解凍和傳(chuan) 代流程,調整培養(yang) 基pH值,確保滲透壓適宜。
MV-411細胞分化或表型改變
原因:培養(yang) 條件不適合維持MV-411細胞特性、細胞代次過高。
解決(jue) 方法:優(you) 化培養(yang) 條件,添加必要的生長因子,使用低代次MV-411細胞重新培養(yang) ,定期進行細胞特性鑒定。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,9 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 11,17 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 32 (DSMZ=ACC-102) |
32,32.2 (ATCC=CRL-9591; CLS=300295; COG; PubMed=25877200) | |
32.2 (PubMed=20922763) | |
FGA | 19,21 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,15 |