
小鼠表皮角化上皮細胞(kaiyun网站安全)
- 來源:皮膚組織
- 細胞特征:貼壁 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:原代上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:表皮角化細胞(KC)是構成表皮的主要細胞成分
小鼠表皮角化細胞分離自小鼠皮膚組織。表皮角化細胞是表皮的主要細胞成分,表皮角化細胞在體(ti) 內(nei) 不斷增殖。分裂的角化細胞主要分布在基底層,少數位於(yu) 棘細胞層。隨著細胞向表層推移,其分化程度逐漸增加,同時喪(sang) 失分裂活性。
小鼠表皮角化上皮細胞是先通過中性蛋白酶消化,然後采用胰蛋白酶和膠原酶的混合消化法。
小鼠表皮角化上皮細胞特性
表皮位於(yu) 動物皮膚的外層、由胚胎時期外胚層形成、具有抗摩擦和抗損傷(shang) 的作用
表皮角化細胞(KC)是構成表皮的主要細胞成分
表皮角化細胞在體(ti) 內(nei) 處於(yu) 不斷增殖過程中、分裂的角化細胞主要位於(yu) 基底層,少數位於(yu) 棘細胞層
隨著向表層的推移,細胞的分化程度逐漸增加,並喪(sang) 失分裂活性
小鼠表皮角化上皮細胞參數表
產品名稱 | 小鼠表皮角化上皮細胞(kaiyun网站安全) |
組織來源 | 昆明小鼠、C57小鼠(出生1-3天) |
產品規格 | 5×10⁵ cells/T25 細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 小鼠表皮角化細胞分離自皮膚組織。 |
細胞製備方法 | 先中性蛋白酶消化,後胰蛋白酶-膠原酶混合消化法製備 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養基 | kaiyun网站安全專用培養基 |
包被條件 | 鼠尾膠原Ⅰ (2-5 μg/cm²) |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
傳代特性 | 可傳1-2代左右 |
傳代比例 | 1:2 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
培養條件 | 氣相:空氣(95%),CO₂(5%) |
細胞汙染檢測 | HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測均為陰性 |
質量檢測 | 實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上 |
培養教程
小鼠表皮角化上皮細胞培養
貼壁細胞消化
吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基,用PBS清洗細胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至T25培養(yang) 瓶中,輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後,吸出多餘(yu) 胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3分鍾。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後,再加入5ml完全培養(yang) 基終止消化。
用吸管輕輕吹打混勻,按傳(chuan) 代比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代,然後補充新鮮的完全培養(yang) 基至5ml,置於(yu) 37℃、5% CO₂、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。
待細胞完全貼壁後,培養(yang) 觀察。之後按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yang) 基。
細胞實驗
由於(yu) kaiyun网站安全貼壁的特殊性,貼壁的kaiyun网站安全在消化後轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yang) 板、共聚焦培養(yang) 皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因未貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm²)、多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml)、明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
培養(yang) 基於(yu) 4℃條件下可保存3-6個(ge) 月。
在細胞培養(yang) 過程中,請注意保持無菌操作。
傳(chuan) 代培養(yang) 過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會(hui) 影響細胞貼壁及其生長狀態。
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STR鑒定及相關
參考文獻
- 中國組織工程研究 > 2014年29期
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- 《第十次全國牙周病學學術會議論文摘要匯編》 2014年
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