mc3t3-e1細胞 （小鼠顱頂前骨細胞亞(ya) 克隆14細胞）

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞(ya) 克隆14是從(cong) 小鼠新生兒(er) 分離的前成骨細胞係分離一係列克隆中的一個(ge) ，屬於(yu) 一係列克隆中的代表性亞(ya) 克隆。MC3T3-E1細胞係特別適用於(yu) 體(ti) 外研究成骨細胞分化以及細胞外基質（ECM）信號傳(chuan) 導的機製，其行為(wei) 類似於(yu) 原始顱骨成骨細胞。

MC3T3-E1細胞具有一定的致瘤性，能夠在免疫缺陷小鼠體(ti) 內(nei) 形成骨樣小骨。

基因表達：MC3T3-E1細胞表達膠原蛋白。

MC3T3-E1 Subclone 14在抗壞血酸和3-4 mM無機磷酸鹽的培養(yang) 條件下生長，表現出高水平的成骨細胞分化能力。經過10天的培養(yang) ，形成了高度礦化的細胞外基質（ECM），這是骨組織形成的重要步驟之一。

相比之下，其他亞(ya) 克隆，比如MC3T3亞(ya) 克隆24和MC3T3子克隆30，在相同的培養(yang) 條件下表現出較低的成骨細胞分化能力，不能形成礦化的ECM。因此，它們(men) 可用作亞(ya) 克隆4細胞和14細胞的陰性對照。礦化亞(ya) 克隆選擇性表達成骨細胞標誌物、骨唾液蛋白（BSP）、骨鈣素（OCN）和甲狀旁腺激素（PTH）/甲狀旁腺激素相關(guan) 蛋白（PTHrP）受體(ti) 的mRNA。

在培養(yang) 條件下，高度分化的MC3T3-E1 Subclone 14細胞和分化程度較低的細胞產(chan) 生了類似量的膠原，並表達了相對基礎水平的成骨細胞相關(guan) 轉錄因子Osf2/Cbfa1的mRNA。這表明即使細胞分化程度不同，它們(men) 對於(yu) 膠原的合成以及關(guan) 鍵轉錄因子的表達都具有一定的穩定性。

植入免疫缺陷小鼠後，高分化的亞(ya) 克隆形成類似編織骨的骨樣小骨，而分化差的細胞隻產(chan) 生纖維組織。

MC3T3-E1細胞產品參數表

準備材料：

• α-MEM培養(yang) 基

• 胎牛血清（FBS）

• 青黴素/鏈黴素（P/S）

• 0.25%胰酶-EDTA

• 培養(yang) 皿、吸頭、移液管等實驗器材

• CO2培養(yang) 箱

• 顯微鏡

MC3T3-E1細胞培養步驟：

培養(yang) 基配製：

• 將α-MEM培養(yang) 基加熱至37攝氏度，加入10% FBS和1% P/S。

細胞傳(chuan) 代：

• 當細胞密度達到80-90%時，使用0.25%胰酶-EDTA進行細胞消化。

• 將消化後的細胞分配到新的培養(yang) 皿中，按照1:2至1:4的比例進行傳(chuan) 代。

培養(yang) 條件：

• 將細胞培養(yang) 在37攝氏度、5% CO2的培養(yang) 箱中。

• 每周更換新鮮培養(yang) 基2-3次，保持細胞的健康狀態。

細胞觀察：

• 定期觀察mc3t3-e1細胞形態和生長狀態，確保細胞呈現成纖維細胞樣形態並貼壁生長。

誘導分化：

• 如果需要，可添加特定的生長因子或藥物，如β-甘油磷酸鈉和維生素C，來誘導MC3T3-E1細胞分化為(wei) 特定類型的細胞。

細胞質量控製：

• 定期檢查mc3t3-e1細胞是否受到支原體(ti) 等微生物汙染，確保細胞係的純度和健康。

MC3T3-E1細胞培養注意事項：

• 操作過程中保持實驗環境的清潔和無菌。

• 嚴(yan) 格控製培養(yang) 條件，確保mc3t3-e1細胞的穩定生長和分化狀態。