
原代小鼠尿道上皮細胞
- 來源:尿道組織
- 細胞特征:貼壁, 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:原代上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基
- 其他:高可塑性;具有多種功能特殊類型
原代小鼠尿道上皮細胞是從(cong) 小鼠尿道管組織中分離。
尿道作為(wei) 連接膀胱和體(ti) 外的通道,在維持泌尿係統功能和保護機製中扮演著關(guan) 鍵角色。
小鼠尿道上皮細胞也表達著雌激素和生長因子受體(ti) ,這在細胞的生長、修複和免疫應答中發揮著重要作用。小鼠尿道上皮細胞能夠釋放多種細胞因子和免疫係統介質,參與(yu) 調節局部免疫反應和細胞間通訊。
小鼠尿道上皮細胞特征
小鼠尿道上皮細胞源自尿道管組織,尿道是連接膀胱和體(ti) 外的管道。
尿道上皮細胞具有多種功能,主要包括:
構成膀胱的防禦係統,防止病原體(ti) 粘附,保持尿液的不滲透性。
表達雌激素α、β受體(ti) 、上皮生長因子受體(ti) 和纖維母細胞生長因子受體(ti) ,在損傷(shang) 和感染時發揮重要作用。
能夠釋放多種細胞因子和免疫係統介質。
小鼠尿道上皮細胞參數表
細胞類型 | 小鼠尿道上皮細胞(kaiyun网站安全) |
組織來源 | 尿道管組織 |
分離方法 | 胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法 |
細胞總量 | 約5×10⁵ cells/瓶 |
細胞特性 | 高可塑性;具有多種功能特殊類型 |
功能 | 構成膀胱防禦係統,防止病原體(ti) 粘附; 表達雌激素和生長因子受體(ti) ,參與(yu) 細胞生長、修複和免疫應答; 釋放多種細胞因子和免疫係統介質 |
質量檢測 | PCK免疫熒光鑒定,純度≥90%,無HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等 |
包被條件 | 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培養條件 | 氣相:空氣95%,CO2 5% |
培養教程
小鼠尿道上皮細胞分離與處理
從(cong) 無菌條件下取出小鼠尿道組織,切割成約1mm³大小的組織塊。
用PBS清洗組織塊,使其幹淨。
將組織塊加入含有酶消化液(0.1% 胰蛋白酶和0.1% 膠原酶)的培養(yang) 皿中,混懸10秒,然後在37℃條件下消化10分鍾。
使用滴管吹打製成單細胞懸液,沉澱並收集上清,用含有10% FBS的培養(yang) 基終止消化後置於(yu) 4℃。
重複消化步驟,直至組織完全被消化。
用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,離心後棄去上清,沉澱的細胞用含有10% FBS的培養(yang) 基混懸。
將細胞接種於(yu) 25cm²培養(yang) 瓶中,放置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) ,貼壁培養(yang) 1小時後,吸出培養(yang) 基,按需接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) 。
小鼠尿道上皮細胞細胞處理
當細胞生長至適當密度時,吸出培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10分鍾。
使用適量的膠原酶消化液進行細胞消化處理,具體(ti) 時間和濃度根據實驗需求進行調整。
對細胞進行PBS衝(chong) 洗2次,每次10分鍾。
選擇適當的固定液(例如4%多聚甲醛)在適當條件下固定細胞。
進行適當的透膜處理、封閉和抗體(ti) 孵育等步驟,具體(ti) 條件和時間根據實驗需要確定。
最後,用PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10分鍾,觀察並拍攝細胞圖像。