RPMI-2650細胞（人鼻腔上皮細胞）

RPMI-2650細胞係源自一名52歲男性的鱗狀細胞癌患者，其腫瘤起源於(yu) 鼻中隔，並轉移至胸腔，導致胸腔積液的產(chan) 生。該患者的癌症被確診為(wei) 間變性鱗狀細胞癌，這是一種罕見的鼻中隔惡性腫瘤。

RPMI-2650細胞係具備準二倍體(ti) 核型，染色體(ti) 數目保持穩定，是一種特有的永久性人類細胞係。RPMI-2650細胞係的細胞通常較小，傾(qing) 向於(yu) 成簇生長，並在培養(yang) 基中融合形成致密的細胞層。RPMI-2650細胞係在癌症研究和毒理學領域中具有重要意義(yi) ，尤其是在與(yu) 鼻腔疾病和藥物遞送係統相關(guan) 的研究中。

RPMI-2650細胞特性特征

• 免疫標記：通過免疫過氧化物酶染色，RPMI-2650細胞對角蛋白呈陽性反應，這表明其上皮細胞的特征。

• MUC5AC水平：研究顯示，RPMI-2650細胞的MUC5AC水平較低，這與(yu) 其在鼻腔藥物遞送模型中的應用相關(guan) 。MUC5AC是一種重要的粘液糖蛋白，通常與(yu) 呼吸道上皮的功能相關(guan) 。
  

• 纖毛標記：RPMI-2650細胞係表現出較低的纖毛標記和跨膜電阻（TEER），這可能影響其在模擬鼻腔生理條件下的功能。

• 基因組穩定性：RPMI-2650細胞可能攜帶一些與(yu) 腫瘤發生相關(guan) 的基因突變或表達異常，但具體(ti) 的基因組分析數據尚需進一步研究確認。
  

• 應用潛力：RPMI-2650細胞係在癌症研究、藥物遞送係統開發及毒理學評估中具有廣泛應用潛力，尤其是在研究鼻腔相關(guan) 疾病及藥物透過性的機製方麵

RPMI-2650細胞參數表

RPMI-2650人鼻腔上皮細胞培養教程

檢查和初始處理

• 收到RPMI-2650細胞後，檢查運輸容器是否完整，是否有漏液現象。如有問題，及時聯係供應商。

• 將RPMI-2650細胞置於(yu) 顯微鏡下，觀察細胞的形態和密度。如果細胞生長正常，繼續培養(yang) 操作。

• 去除培養(yang) 瓶的封口膜後，將RPMI-2650細胞置於(yu) 37°C培養(yang) 箱內(nei) 孵育2-3小時，使細胞適應新的環境。

• 棄去原培養(yang) 基，添加6 mL新鮮的DMEM/F12完全培養(yang) 基，繼續培養(yang) ，待RPMI-2650細胞密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代操作。

RPMI-2650細胞複蘇步驟

• 從(cong) 液氮中取出凍存的RPMI-2650細胞，迅速置於(yu) 37°C水浴中，輕輕搖晃，直至完全融化。

• 解凍後，將RPMI-2650細胞懸液加入4 mL預溫的培養(yang) 基中混勻。

• 以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。

• 補加1-2 mL新鮮培養(yang) 基輕輕吹打細胞懸液，將其移入10 cm培養(yang) 皿或T25培養(yang) 瓶中，加入8 mL培養(yang) 基。

• RPMI-2650細胞在37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中孵育過夜。次日更換新鮮培養(yang) 基並檢查細胞的狀態和密度。

RPMI-2650細胞傳代

• 當RPMI-2650細胞達到80%-90%匯合度時，準備進行傳(chuan) 代操作。

• 棄去培養(yang) 基，用不含鈣、鎂離子的PBS衝(chong) 洗RPMI-2650細胞1-2次，以去除殘餘(yu) 的血清和代謝物。

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育1-2分鍾，觀察RPMI-2650細胞變圓並脫落。

• 當細胞大部分脫落後，輕敲培養(yang) 瓶，並加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 收集消化後的RPMI-2650細胞懸液，1000 RPM離心4分鍾後，棄去上清。加入1-2 mL培養(yang) 基將細胞重新懸浮，並按1:2的比例進行分瓶培養(yang) 。

RPMI-2650細胞凍存

• 選擇狀態良好的RPMI-2650細胞，棄去舊培養(yang) 基並用PBS清洗細胞。

• 加入1 mL胰酶消化RPMI-2650細胞，加入培養(yang) 基終止消化，利用血球計數板對細胞進行計數，確保每凍存管含細胞密度不低於(yu) 1×10⁶細胞。

• RPMI-2650細胞收集後離心，加入含10% DMSO和90%血清的凍存液重懸，確保DMSO終濃度為(wei) 10%。

• 將1 mL RPMI-2650細胞懸液分裝至凍存管中，置於(yu) 程序降溫盒中，在-80°C冷凍2小時後移入液氮長期保存。做好凍存管的標識，並記錄其位置。