capan-1細胞（人胰腺癌細胞係）

Capan-1細胞係是源自40歲白人男性胰腺癌患者的一種上皮形態的細胞係。

capan-1細胞係表達多種特征性抗原，包括血型A、Rh+和HLA A2、A9、B13、B17，並且表達囊性纖維化跨膜電導調節因子（CFTR）以及能夠分泌胃型粘蛋白。
Capan-1細胞以其高增殖率、穩定的傳(chuan) 代能力以及腫瘤特異性而著稱，適合轉染宿主細胞。

Capan-1細胞係需要在培養(yang) 皿底部貼附生長，形成單層上皮細胞形態。

Capan-1細胞特性

• 40歲白人男性患者的胰腺癌中分離出來，也有從(cong) 肝轉移中分離的例子。

• 具有上皮形態，需要貼附在培養(yang) 皿底部生長，如果capan-1細胞變得太重，就會(hui) 從(cong) 生長表麵脫落。

• 抗原表達：血型A；Rh+；HLA A2、A9、B13、B17

• 基因表達：粘蛋白；血型A；Rh+；HLA：（A2；A9；B13；B17）

• 表達式標記：孕酮受體(ti) ，陽性；雌激素受體(ti) ，α，陽性

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1, 1-2；PGM3，1

• Capan-1細胞表達囊性纖維化跨膜電導調節因子（CFTR）並分泌胃型粘蛋白。

Capan-1細胞參數表

capan-1人胰腺癌細胞係培養

複蘇Capan-1細胞

• 將含有1 mL Capan-1細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yang) 基混合均勻。

• 在1000 rpm條件下離心3分鍾，棄去上清液，加1-2 mL培養(yang) 基後吹勻。

• 將所有Capan-1細胞懸液加入含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將Capan-1細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。

• 第二天換液並檢查細胞密度。

Capan-1細胞傳(chuan) 代

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗Capan-1細胞1-2次。

• 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53 mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，使消化液浸潤所有Capan-1細胞，棄去消化液，將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1分鍾，然後在顯微鏡下觀察Capan-1細胞消化情況。若Capan-1細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化。

• 按6-8 mL/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後裝入無菌離心管中，1000 rpm離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yang) 液後吹勻。

• 將Capan-1細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yang) 基的新皿中或者瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 當Capan-1細胞密度達80%-90%時，進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

Capan-1細胞凍存

• 收集Capan-1細胞及細胞培養(yang) 液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行Capan-1細胞計數。

• 根據Capan-1細胞數量加入無血清細胞凍存液，使Capan-1細胞密度達到5×10^6~1×10^7/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1 mL Capan-1細胞懸液，注意凍存管做好標識。

• 將凍存管放入-80℃冰箱，24小時後轉入液氮罐儲(chu) 存，記錄凍存管位置以便下次拿取。

• 待Capan-1細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

注意事項

• 傳(chuan) 代處理後24-48小時內(nei) 盡量不要移動培養(yang) 瓶，Capan-1細胞易聚團成斑塊狀生長，生長非常緩慢。

• Capan-1細胞複蘇和凍存過程中要確保操作迅速，以免Capan-1細胞受損。