
Panc02細胞(小鼠胰腺癌細胞)
- 來源:胰腺導管腺癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Pan02細胞係表達與(yu) 胰腺癌相關(guan) 的多種基因
Panc02小鼠胰腺癌細胞係由Corbett等人通過在C57BL/6小鼠胰腺內(nei) 植入攜帶3-甲基膽蒽的棉線,誘導導管腺癌形成,並通過連續皮下移植建立。作為(wei) 來源於(yu) 小鼠胰腺導管腺癌的細胞係,Pan02細胞呈上皮樣形態,具有貼壁生長特性,廣泛應用於(yu) 胰腺癌的生物學研究、藥物篩選及腫瘤微環境模擬等領域。
Panc02細胞(小鼠胰腺癌細胞)參數表
細胞名稱 | Panc02細胞(小鼠胰腺癌細胞) |
別稱 | Panc-02; Panc 02; Pan02; PAN 02; Panc02-H0 |
種屬 | 小鼠(Mus musculus) |
組織來源 | 胰腺(胰腺導管腺癌) |
性別 | 雄性 |
細胞形態 | 上皮樣,多角形 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞類型 | 胰腺癌細胞 |
細胞代數 | 通常在10代以內 |
培養基 | 95% DMEM(高糖) + 5%胎牛血清(FBS) + 1%青黴素/鏈黴素(PS) |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣,5%二氧化碳 |
換液周期 | 每2-3天更換培養基 |
傳代比例 | 1:2至1:4(具體視細胞生長速度而定) |
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%時進行傳代 |
培養瓶體積 | T25瓶10-12mL;10cm皿12-15mL |
凍存條件 | 使用無血清凍存液,儲存於液氮中(-196℃) |
細菌檢測 | 細菌、真菌、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢測 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢測均為陰性 |
複蘇存活率 | 複蘇後存活率>90% |
生物安全 | 所有腫瘤和病毒轉染的細胞視為有潛在生物危害性,需在二級生物安全台內操作 |
研究用途 | 廣泛應用於癌症研究、藥物篩選、細胞信號通路研究、腫瘤微環境模擬等 |
使用限製 | 僅供科學研究,絕不可用於動物或人類疾病的治療 |
培養教程
Panc02小鼠胰腺癌細胞培養教程
Panc02細胞複蘇
將培養(yang) 基(高糖DMEM + 5% 胎牛血清 + 1% 青黴素/鏈黴素)預熱至37℃。
準備無菌的離心管和移液器,確保無菌操作環境,避免Panc02細胞汙染。
從(cong) 液氮中取出Panc02細胞凍存管,立即置於(yu) 37℃水浴中輕輕搖動,直至Panc02細胞完全解凍(約1-2分鍾),解凍後迅速取出,避免Panc02細胞暴露在水浴中超過5分鍾。
將解凍後的Panc02細胞轉移至15 mL離心管中,加入9 mL預熱的培養(yang) 基,輕輕混勻。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液,保留Panc02細胞沉澱。
在5 mL培養(yang) 基中輕輕重懸Panc02細胞,將其轉移至T25培養(yang) 瓶中,並補足培養(yang) 基至10-12 mL。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) ,觀察Panc02細胞狀態並定期更換培養(yang) 基。
Panc02細胞培養
培養(yang) 條件:溫度37℃,5% CO₂濃度。
換液周期:每2-3天更換Panc02細胞的培養(yang) 基。
Panc02細胞傳代操作
當Panc02細胞匯合度達到80%-90%時,準備進行傳(chuan) 代。
吸棄舊培養(yang) 基,用3-4 mL PBS輕輕洗滌Panc02細胞,之後棄去PBS。
加入1 mL胰酶,均勻覆蓋Panc02細胞後,將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化2-5分鍾。
觀察Panc02細胞開始脫落但未完全分離時,加入2-3 mL培養(yang) 基終止消化,輕輕混勻Panc02細胞。
以900 rpm離心3-5分鍾,棄去上清,重懸Panc02細胞於(yu) 新培養(yang) 基中。
將重懸後的Panc02細胞分至新的培養(yang) 瓶中,補足培養(yang) 基,放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
Panc02細胞凍存
準備凍存液:使用含10% DMSO的凍存液(如FBS + 10% DMSO)。
將Panc02細胞重懸於(yu) 凍存液中,通常每1 mL凍存液中含有約1×10^6個(ge) Panc02細胞。
將Panc02細胞分裝至1.2 mL凍存管中。
將凍存管置於(yu) -80℃冷凍24小時後,轉移至液氮中長期保存Panc02細胞。
Panc02細胞培養的注意事項
無菌操作:在無菌操作台內(nei) 進行所有Panc02細胞操作,使用無菌的培養(yang) 基、移液槍頭和離心管。操作時要保持手部和工作環境清潔,縮短Panc02細胞培養(yang) 瓶暴露時間以防止汙染。
胰酶消化:胰酶消化時間需嚴(yan) 格控製,避免Panc02細胞過度消化,影響Panc02細胞狀態。
培養(yang) 基凍融後變化:凍融後的培養(yang) 基可能會(hui) 出現少量絮狀物析出,但不影響正常使用。培養(yang) 基的pH值可能會(hui) 有輕微變化,但仍在可接受範圍內(nei) ,不會(hui) 顯著影響Panc02細胞培養(yang) 效果。
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