
PaTu 8988t人胰腺癌細胞
- 來源:胰腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+5% FBS+5% HS+1% P/S
- 其他:遺傳(chuan) 特征:微衛星穩定型(MSS), KRAS和TP53基因突變
PaTu 8988t細胞係是由1985年從(cong) 一名64歲女性患者的胰腺癌肝轉移病灶中建立。PaTu 8988t細胞係與(yu) PaTu 8988S同樣起源於(yu) 該患者,屬於(yu) 胰腺癌細胞係。
PaTu 8988t人胰腺癌細胞特性特征
微衛星穩定性:PaTu 8988t細胞係屬於(yu) 微衛星穩定型(MSS)。
基因突變:KRAS基因:存在突變;TP53基因:存在突變
基因表達特征:表達上皮細胞標誌物,如E-cadherin;表達胰腺癌相關(guan) 標誌物,如CA19-9和CEA
信號通路激活:MAPK信號通路激活,與(yu) KRAS突變相關(guan) ;PI3K/AKT信號通路可能被激活,促進細胞生存和增殖
代謝特征:可能表現出Warburg效應,即即使在有氧條件下也傾(qing) 向於(yu) 進行糖酵解
藥物敏感性:對某些化療藥物如吉西他濱可能表現出一定的敏感性;可能對EGFR抑製劑有抗性,這與(yu) KRAS突變狀態相關(guan)
PaTu 8988t人胰腺癌細胞參數表
細胞名稱 | PaTu 8988t人胰腺癌細胞 |
細胞別稱 | PaTu 8988t (PA-TU-8988T, PaTu8988t, PaTu8988T, PATU8988T, PaTu 8988 T, PaTu-8988t, PATU-8988T, PATU-T, PA-TU T, 8988T, PaCL4) |
患者信息 | 人源, 64歲, 女性 |
組織來源 | 胰腺癌的肝轉移瘤 |
生長特性/形態 | 貼壁生長, 上皮細胞樣 |
保藏信息 | DSMZ; ACC-162 |
培養基/血清 | DMEM(高糖)+ 5%胎牛血清 + 5%馬血清+2mM L-穀氨酰胺 + 1% 青黴素-鏈黴素 |
培養條件 | 37℃,5% CO2,濕度70-80% |
傳代信息 | 密度80%-90%, 比例1:2至1:3, 每周2-3次 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液 |
細胞規格/凍存 | 1x10^6 cells/T25或1mL凍存管, 無血清凍存液, 液氮儲存 |
質控檢測 | 支原體陰性, STR鑒定通過 |
遺傳特征 | 微衛星穩定型(MSS), KRAS和TP53基因突變 |
表達標誌物 | E-cadherin, CA19-9, CEA |
活化通路 | MAPK, PI3K/AKT |
藥物敏感性 | 吉西他濱敏感, EGFR抑製劑可能有抗性 |
生長特性 | 倍增時間22-30小時, 建議使用10代以內 |
培養教程
PaTu 8988t人胰腺癌細胞培養教程
PaTu 8988t細胞接收與初步處理
收到PaTu 8988t細胞後,檢查細胞瓶是否完好,確認培養(yang) 液是否存在漏液或渾濁現象。如有異常,請及時聯係供應商。
使用顯微鏡觀察PaTu 8988t細胞的生長狀態。去除封口膜,將T25培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中穩定細胞2-4小時。
棄去T25瓶中的運輸培養(yang) 基,加入6 mL完全培養(yang) 基(DMEM,含5%胎牛血清、5%馬血清、2 mM L-穀氨酰胺和1%青黴素-鏈黴素)。
第二天,檢查PaTu 8988t細胞的密度和汙染情況。如發現異常,及時聯係供應商。
PaTu 8988t細胞複蘇
在37℃水浴中快速解凍含有1 mL PaTu 8988t細胞懸液的凍存管。
將細胞懸液轉入4 mL培養(yang) 基中混合均勻,1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液後補加1-2 mL培養(yang) 基並輕輕吹打。
將PaTu 8988t細胞懸液加入培養(yang) 瓶中過夜培養(yang) ,或轉移至10 cm培養(yang) 皿,加入約8 mL培養(yang) 基,進行過夜培養(yang)
第二天換液,並檢查PaTu 8988t細胞的密度和生長情況。
PaTu 8988t細胞傳代
當PaTu 8988t細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
推薦的傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2,即將一個(ge) T25瓶的PaTu 8988t細胞分至兩(liang) 個(ge) T25瓶或兩(liang) 個(ge) 6 cm培養(yang) 皿。
棄去培養(yang) 上清液,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗PaTu 8988t細胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA),確保消化液覆蓋所有細胞。棄去消化液,將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
在顯微鏡下觀察PaTu 8988t細胞的消化情況。若細胞大部分變圓並脫落,立即終止消化,輕敲培養(yang) 瓶後加入少量培養(yang) 基。
補加6-8 mL培養(yang) 基至離心管中,輕輕混勻後,以1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yang) 基並吹打均勻。
將PaTu 8988t細胞懸液按1:2比例分裝至新培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中,並加入8 mL培養(yang) 基。
PaTu 8988t細胞凍存
當PaTu 8988t細胞生長狀態良好時,進行凍存操作。
按照傳(chuan) 代步驟處理PaTu 8988t細胞。
離心後棄去上清液,加入凍存液(10% DMSO + 90%胎牛血清),以1x10^6 cells/mL的濃度分裝至凍存管。
逐步降溫至-80°C(降溫速度為(wei) 每分鍾1°C),然後轉移至液氮中長期保存。
確保凍存管上標記清晰,包括PaTu 8988t細胞的名稱、日期和代次等信息。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 23 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 7,8 |
D8S1179 | 13,16 |
D13S317 | 12,13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 26 |
FGA | 23 |
Penta D | 8 |
Penta E | 14 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |
參考文獻
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