
hbl100細胞(人整合SV40基因的乳腺上皮細胞)
- 來源:乳腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:hbl100細胞含有整合型SV40病毒基因組序列
HBL-100細胞係源自一位沒有乳腺病變或乳腺癌家族史的哺乳母親(qin) 的乳汁中建立。hbl100細胞培養(yang) 至第7代時發現異常核型,但具有合成少量乳糖的能力,對催乳素/雌激素刺激/酪蛋白產(chan) 生反應。
HBL-100細胞由於(yu) 含有整合型SV40病毒基因組序列,與(yu) 早期認為(wei) hbl100細胞係是自發永生的觀點矛盾,最初認為(wei) hbl100細胞源自女性,後發現存在Y染色體(ti) ,可能來源男性。
hbl100細胞特性
HBL-100細胞係具有合成少量乳糖的能力,對催乳素或雌激素刺激增加酪蛋白產(chan) 生反應。
hbl100細胞表現上皮細胞特征、內(nei) 有微絨毛、原纖維和橋粒。
hbl100細胞含有整合型SV40病毒基因組序列。
hbl100細胞參數表
細胞名稱 | hbl100細胞(人整合SV40基因的乳腺上皮細胞) |
別稱 | HBL 100; HBL100 |
細胞類型 | 轉化上皮細胞係 |
細胞來源 | 人乳腺 |
供體來源 | 哺乳期婦女 |
供體特征 | 無乳腺病變和乳腺癌家族史 |
年齡(性別) | 最初認為來源於27歲女性,但檢測發現Y染色體存在,可能來源於男性 |
組織來源 | 乳腺 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生物安全等級 | BSL-2 |
致瘤性 | 在裸鼠中表現出致瘤性 |
培養基 | RPMI-1640 (TM175)+10%FBS(TS500) |
培養條件 | 空氣,95%;CO2,5%;37℃ |
傳代比例 | 1:2-1:4 |
換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~28-40 hours |
凍存條件 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO, 液氮 |
抗原表達情況 | HLA A1 A10 A11 B7 B8 |
保藏機構 | ATCC; HTB-124RCB; RCB0460 CCTCC;GDC0195 |
特殊性 | 具有合成少量乳糖的能力 |
通過增加酪蛋白的產生對催乳素或雌激素刺激的反應 | |
顯微鏡分析證實存在微絨毛、原纖維和橋粒,顯示上皮特征 | |
存在SV40基因組序列,並非自發永生的細胞係 | |
染色體組型在第7代時就不正常 | |
爭議性 | 細胞來源存在爭(zheng) 議,可能不是來源於(yu) 女性 |
應用 | 乳腺癌研究 |
注意事項 | HBL-100細胞含有SV40病毒基因,因此在使用時應注意生物安全。 HBL-100細胞並非正常細胞,因此其研究結果應謹慎解釋。 |
培養教程
HBL-100細胞培養
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出HBL-100細胞凍存管,迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍,待完全解凍後立即進行下一步操作。
將解凍後的細胞懸液轉移至離心管中,加入1ml培養(yang) 基,1000rpm離心3分鍾,棄去上清液。
用PBS緩衝(chong) 液清洗細胞2次,每次1ml,1000rpm離心3分鍾,棄去上清液。
加入適量培養(yang) 基重懸細胞,接種到培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。
將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳代
當細胞生長至80%-90% confluency時,即可進行傳(chuan) 代。
棄去培養(yang) 上清液,用PBS緩衝(chong) 液清洗細胞2次,每次1ml。
加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液,使細胞完全浸潤。
將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,待細胞大部分變圓並脫落後,加入培養(yang) 基終止消化。
用細胞計數板計數細胞,按1:2-1:4的比例將細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。
加入適量培養(yang) 基,將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞凍存
當細胞生長至80%-90% confluency時,即可進行凍存。
棄去培養(yang) 上清液,用PBS緩衝(chong) 液清洗細胞2次,每次1ml。
加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液,使細胞完全浸潤。
將培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,待細胞大部分變圓並脫落後,加入培養(yang) 基終止消化。
用細胞計數板計數細胞,製備細胞懸液,其中DMSO的最終濃度為(wei) 5%,細胞密度不低於(yu) 1x10^6 cells/ml。
將細胞懸液分裝到凍存管中,每管1ml。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,以-1℃/分鍾的速度降溫至-80℃,然後轉入液氮中保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X (CCRID; PubMed=25877200; PubMed=28889351) |
X,Y (ATCC=HTB-124; CLS=300178; PubMed=11416159) | |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 18,24 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 12,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 25 |
Penta D | 12 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 16 |