
HC11細胞(小鼠乳腺上皮細胞)
- 來源:乳腺
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:蛋白質生產(chan) : HC11細胞能夠生產(chan) 牛乳蛋白,如β-酪蛋白
HC11小鼠乳腺上皮細胞係是通過轉染從(cong) 其親(qin) 本細胞係COMMA-1D中分離得到的催乳素反應型克隆。HC11細胞無需額外添加複雜的細胞外基質或與(yu) 其他細胞類型共培養(yang) 即可在培養(yang) 過程中實現分化。HC11細胞係能夠自主產(chan) 生如層粘連蛋白等細胞外基質蛋白。
HC11細胞源於(yu) 中期妊娠BALB/c小鼠乳腺的COMMA-1D細胞,經轉染後篩選出HC11克隆。
HC11細胞特性特征
HC11細胞能夠自主產(chan) 生細胞外基質蛋白,如層粘連蛋白,這對其結構和功能至關(guan) 重要。
激素響應:HC11細胞對泌乳激素(如催乳素、胰島素和地塞米鬆)具有良好的響應能力,能夠誘導產(chan) 生乳蛋白,如β-酪蛋白。
基因表達特征
未分化狀態: 表達Lgals1、Ran、Jam-A、Bmpr1a、Nfkbiz、Trib 1、Rps21和ler3等基因。
分化狀態: 表達Id1,顯示出與(yu) 乳腺上皮細胞分化相關(guan) 的基因表達的動態變化
HC11小鼠乳腺上皮細胞參數表
細胞名稱 | HC11細胞(小鼠乳腺上皮細胞) |
細胞別稱 | HC-11; HC11 Mammary Epithelium |
來源及類型 | 中期妊娠BALB/c小鼠乳腺,乳腺上皮細胞係 |
細胞形態 | 上皮樣,貼壁細胞 |
培養基及體係 | RPMI-1640或DMEM;90% RPMI + 10% FBS |
培養條件 | 37°C,5% CO₂ |
傳代及密度 | 比例1:2-1:3;密度約1×10^5細胞/mL |
貼壁及周期 | 貼壁時間24小時;傳代周期2-3天 |
細胞代數 | 通常使用10代以內 |
基質及激素 | 產生層粘連蛋白;對催乳素、胰島素、地塞米鬆有反應 |
蛋白產物 | β-酪蛋白 |
保存及複蘇 | 液氮保存;37°C水浴快速解凍 |
質量控製 | 支原體檢測 |
研究用途 | 乳腺生物學、細胞信號轉導、乳腺上皮細胞分化研究 |
培養教程
HC11小鼠乳腺上皮細胞培養教程
複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出HC11細胞凍存管,迅速放入37°C水浴中,輕輕搖動,快速解凍(約1-2分鍾)。
解凍後,立即將HC11細胞轉移至含有10 mL培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
以1000 rpm離心5分鍾,去除上清液。
加入適量新鮮培養(yang) 基(約5 mL),輕輕重懸HC11細胞。
將HC11細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中,放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。
HC11細胞傳代
傳(chuan) 代時機:當HC11細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去HC11細胞的培養(yang) 上清,使用PBS洗滌細胞。
加入適量胰酶(0.25%)消化HC11細胞,通常消化時間為(wei) 2-5分鍾,觀察細胞是否脫落。
加入培養(yang) 基中和胰酶,輕輕吹打混勻HC11細胞。
以1000 rpm離心5分鍾,去除上清液。
重懸HC11細胞,按1:2的比例接種到新的培養(yang) 瓶中(如1個(ge) T25瓶接種到2個(ge) T25瓶或2個(ge) 6cm皿)。
換液:每3天更換一次HC11細胞培養(yang) 基,以保持細胞的良好生長狀態。
HC11細胞注意事項
細胞觀察:定期觀察HC11細胞形態和生長狀態,確保無汙染。
支原體(ti) 檢測:定期進行支原體(ti) 檢測,以確保HC11細胞的純淨性。
凍存:HC11細胞傳(chuan) 代後可進行凍存,使用無血清凍存液,液氮儲(chu) 存。
提高HC11細胞生長的建議
基礎培養(yang) 基:使用RPMI-1640或DMEM作為(wei) HC11細胞的基礎培養(yang) 基,確保其質量。
胎牛血清 (FBS):增加FBS的濃度至15%或20%,以提供更多的生長因子和營養(yang) 物質,促進HC11細胞生長。
添加物:丙酮酸鈉 (Sodium Pyruvate): 增加至1%或2%,以促進HC11細胞的能量代謝。
穀氨酰胺 (GlutaMAX): 維持在1%或增加至2%,以支持HC11細胞的增殖。
抗生素: 適量添加青黴素-鏈黴素(PS),以防止細菌汙染。
生長因子:考慮添加生長因子(如EGF或FGF),以促進HC11細胞的增殖和分化。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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