C127細胞（小鼠乳腺腫瘤細胞）

C127細胞（小鼠乳腺腫瘤細胞）源自RⅢ小鼠的乳腺惡性腫瘤，是一種未經轉化的細胞克隆株。與(yu) 許多其他腫瘤細胞係不同，C127細胞在體(ti) 外培養(yang) 時未經曆轉化，因此其上清液中不含逆轉錄酶活性。C127細胞係廣泛應用於(yu) 肉瘤病毒誘導的細胞聚集實驗以及牛刺瘤病毒的體(ti) 外定量檢測。

C127細胞特性特征

• 增殖速率：C127細胞增殖速度快，適合在不同實驗條件下仔細檢查細胞過程、生長和分化。

• 逆轉錄酶活性：C127細胞的上清液不含逆轉錄酶活性。

• 腫瘤研究：C127細胞常用於(yu) 研究乳腺癌的發生與(yu) 發展機製，尤其是在藥物作用和細胞信號通路的研究中。

• 病毒研究：廣泛應用於(yu) 肉瘤病毒誘導的聚集實驗及牛刺瘤病毒的體(ti) 外定量測試。最近，C127細胞也被用作牛刺瘤病毒DNA質粒轉化的受體(ti) 。

• 基因特征：C127細胞在基因表達上具有特定的特征，適合用於(yu) 轉基因研究和基因功能分析

C127細胞參數表

C127小鼠乳腺腫瘤細胞培養教程

C127細胞複蘇步驟

• 從(cong) 液氮罐中取出C127細胞凍存管，並立即將其置於(yu) 37℃的水浴中，輕輕搖動，直至C127細胞完全融化（通常不超過1分鍾）。
  

• 將融化後的C127細胞懸液迅速轉移至含有9 mL完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻以稀釋DMSO。
  

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，保留C127細胞沉澱。

• 用1-2 mL完全培養(yang) 基重懸C127細胞沉澱，將懸液轉移到新的T25或T75培養(yang) 瓶中，並加入足量的完全培養(yang) 基。
  

• 將培養(yang) 瓶放入培養(yang) 箱中，培養(yang) 至C127細胞貼壁並開始增殖。

C127細胞傳代操作

• 當C127細胞的匯合度達到70-80%時，準備進行傳(chuan) 代操作。
  

• 吸除培養(yang) 基後，用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液洗滌C127細胞層兩(liang) 次，去除殘留的血清。
  

• 加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，溫和消化C127細胞，通常需要1-2分鍾，避免過度消化。

• 觀察C127細胞邊緣變圓並開始脫落時，立即加入6-8 mL完全培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打培養(yang) 瓶底部，確保C127細胞完全分散。

• 將C127細胞懸液按1:3至1:5的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中，加入適量的完全培養(yang) 基。
  

• 將新培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中，按需定期更換培養(yang) 基，通常每2-3天更換一次。

C127細胞凍存方法

• 當C127細胞匯合度達到70-80%時，可以進行細胞凍存操作。
  

• 按上述傳(chuan) 代步驟消化C127細胞後，用含55%基礎培養(yang) 基、40%胎牛血清（FBS）和5%DMSO的凍存液重懸C127細胞，確保細胞濃度達到1×10⁶ cells/mL。
  

• 將C127細胞懸液分裝至凍存管中，密封並標記。

• 將C127細胞凍存管緩慢降溫，首先在-80℃冷凍24小時，然後轉移至液氮中長期保存，以保持C127細胞的活力。
  

注意事項

• 在所有操作中務必保持無菌，以避免C127細胞汙染，定期檢查培養(yang) 環境。
  

• 定期觀察C127細胞的形態，確保C127細胞健康生長，若發現C127細胞形態異常，需及時采取措施。
  

• 定期監測C127細胞的培養(yang) 基pH值，確保其在7.2-7.4之間，維持適宜的生長環境。