KPL-4細胞（人乳腺癌細胞）

KPL-4細胞係源自一位52歲日本女性的炎性乳腺癌患者，細胞來源於(yu) 胸腔積液的轉移灶。炎性乳腺癌是一種罕見且高度侵襲性的乳腺癌，常伴隨乳房紅腫、皮膚增厚等症狀，容易被誤認為(wei) 感染。
KPL-4細胞係呈現上皮樣形態，具有貼壁生長特性，廣泛用於(yu) 研究乳腺癌的生物學行為(wei) 和炎性乳腺癌的侵襲性特征。由於(yu) 其對HER2靶向治療的潛在敏感性，KPL-4在探索針對HER2陽性乳腺癌的治療策略中發揮了重要作用。

KPL-4細胞特性特征

• 分子特征：KPL-4細胞ER（雌激素受體(ti) ）陰性、PR（孕激素受體(ti) ）陰性和ERBB2（HER2）陽性。對雌激素和孕激素不敏感，但可能對HER2靶向治療有效。

• 表達特征：KPL-4細胞表達高水平的HER2蛋白。HER2是一種重要的腫瘤促進因子,在KPL-4細胞中過度表達可能促進腫瘤的生長和侵襲。

• 基因特征：盡管KPL-4細胞的基因突變譜尚未完全闡明,但炎性乳腺癌通常與(yu) TP53基因的突變相關(guan) 。TP53是一種重要的腫瘤抑製基因,其失活可能導致細胞失去對DNA損傷(shang) 的正常應答

KPL-4細胞參數表

KPL-4人乳腺癌細胞培養教程

細胞複蘇步驟

• 取出凍存細胞：從(cong) 液氮罐中取出裝有KPL4細胞的凍存管，立即放入37°C的水浴中，快速解凍，期間輕輕搖動凍存管（約1-2分鍾）。

• 解凍後處理：解凍完成後，迅速將KPL4細胞轉移至含有10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基中，混勻。

• 離心去除DMSO：將細胞以1000 rpm離心5分鍾，去除含有DMSO的上清液。

• 重懸細胞：將沉澱的KPL4細胞用新鮮的RPMI-1640培養(yang) 基重懸，並準備接種。

細胞培養

• 接種細胞：將重懸後的KPL4細胞以1x10^5至1x10^6 cells/ml的密度接種至預先滅菌的T-25或T-75培養(yang) 瓶中。

• 培養(yang) 基體(ti) 積應足夠覆蓋細胞，通常每個(ge) T-25培養(yang) 瓶使用5-10 ml培養(yang) 基。
  

• 更換培養(yang) 基：每2-3天更換一次培養(yang) 基，確保KPL4細胞處於(yu) 最佳生長狀態，定期觀察細胞形態以避免汙染。更換培養(yang) 基時可以用RPMI-1640培養(yang) 基輕輕衝(chong) 洗一次。

傳代操作

• 細胞狀態檢查：在顯微鏡下觀察KPL4細胞，確認細胞形態正常，未出現汙染。

• 去除舊培養(yang) 基：倒掉舊的培養(yang) 基，並用PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 液）輕輕洗滌一次。

• 胰酶消化細胞：加入適量的胰酶（Trypsin-EDTA），每個(ge) T-25瓶1-2 ml，輕輕搖勻後放置2-5分鍾，直到KPL4細胞開始脫落。

• 終止消化：當細胞完全脫落後，加入等量的含10% FBS的RPMI-1640培養(yang) 基，終止胰酶的作用。

• 離心和重懸：將消化後的KPL4細胞轉移至離心管，以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，並用新鮮的培養(yang) 基重懸KPL4細胞。

• 接種傳(chuan) 代：根據實驗需求，將重懸後的KPL4細胞按適當的密度重新接種於(yu) 新的培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 準備凍存液：使用含10% DMSO和90% FBS的凍存液，將KPL4細胞重懸。

• 分裝凍存管：將KPL4細胞懸液分裝至凍存管，每管約1 ml。

• 逐步降溫保存：將凍存管放入冷卻盒中，放置於(yu) -80°C冰箱中逐步降溫，隨後轉移至液氮罐中長期保存。