Hcc1569細胞（人乳腺癌細胞）

HCC1569是一種來源於(yu) 70歲黑人女性乳腺化生性癌患者的上皮細胞係。該患者的FHIT基因攜帶種係突變，其女兒(er) 也具有相同的突變，患者曾接受過化療，並且沒有乳腺癌的家族遺傳(chuan) 史。腫瘤被診斷為(wei) TNM IV期3級化生性癌，在18個(ge) 淋巴結中檢測到4個(ge) 轉移，病理分類為(wei) 分化不良。

HCC1569細胞係建立於(yu) 1995年，曆時19個(ge) 月完成。HCC1569細胞係具有多倍體(ti) 特性，是研究Her2/neu陽性的乳腺癌提供了重要的實驗模型。

Hcc1569細胞特性特征

• 癌症基因：HER2/neu：表達陽性；p53：表達陰性，Hcc1569細胞存在p53基因突變；FHIT基因：存在種係突變，患者及其女兒(er) 均攜帶該突變。

• 表達特征：上皮糖蛋白2 (EGP2)：呈陽性；細胞角蛋白19：呈陽性，進一步確認其上皮性質。

• 受體(ti) 表達：雌激素受體(ti) (ER)：陰性，Hcc1569細胞係不依賴於(yu) 雌激素生長；孕激素受體(ti) (PR)：陰性，通過細胞質蛋白測定，PR的表達水平較低。

• 腫瘤特征：分化程度：細胞分化較差，通常與(yu) 腫瘤的侵襲性和預後不良相關(guan) ；腫瘤分期：被分類為(wei) TNM IV期3級化生癌，在18個(ge) 淋巴結中發現4個(ge) 轉移。

Hcc1569細胞參數表

Hcc1569人乳腺癌細胞培養教程

HCC1569細胞複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出HCC1569細胞凍存管，立即置於(yu) 37°C水浴中解凍，時間控製在1-2分鍾內(nei) ，避免長時間暴露於(yu) 高溫中。

• 解凍後，將HCC1569細胞轉移至含有10ml RPMI 1640培養(yang) 基和10% FBS的培養(yang) 瓶中，輕輕混勻。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中靜置4小時，等待HCC1569細胞適應新的培養(yang) 環境。

培養基更換

• 4小時後，棄去含有凍存保護劑的舊培養(yang) 基，注意操作時避免損傷(shang) HCC1569細胞。

• 加入新鮮的RPMI 1640培養(yang) 基（含10% FBS），然後繼續在37°C、5% CO₂環境下培養(yang) HCC1569細胞。

HCC1569細胞觀察

• 每天使用倒置顯微鏡觀察HCC1569細胞的生長狀態，檢查其形態和附壁情況。通常在24小時內(nei) ，HCC1569細胞開始附壁並增殖。

• 確保HCC1569細胞形態正常，避免出現細胞漂浮或生長緩慢的現象。

HCC1569細胞傳代操作

• 當HCC1569細胞生長到70%-80%融合時，進行傳(chuan) 代操作：

• 棄去舊培養(yang) 基。

• 加入適量0.25%胰酶溶液，確保HCC1569細胞層完全浸泡。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C孵育1-3分鍾，觀察到HCC1569細胞變得半透明並逐漸脫落。

• 棄去胰酶溶液，用含有10% FBS的RPMI 1640培養(yang) 基中止消化。

• 使用移液器輕輕吹打HCC1569細胞，使其均勻分散後，以1:2至1:4的比例轉移至新的培養(yang) 瓶中。

HCC1569細胞凍存

• 對數生長期的HCC1569細胞可以進行凍存：

• 收集HCC1569細胞並用含10% DMSO的凍存液重懸。

• 將HCC1569細胞分裝到凍存管中，並逐步降溫，最後存入液氮中進行長期保存。